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利用PVYN-CP和PLRV-CP基因构建了dsRNA原核表达载体L4440RYl,转至大肠杆菌HT115(DE3),获得菌株HTRYl。绘制了菌株HTRYl的生长曲线,研究了IPTG浓度和诱导时间对该菌株dsRNA表达量的影响。结果表明,接种3.5h,菌体浓度OD600为0.6,加入终浓度为0.3～0.4mmol/L的IPTG,诱导4～5h时,dsRNA表达量最高。dsRNA表达条件的研究,为dsRNA的应用研究奠定了基础。 相似文献
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[目的]以融合酸性木聚糖酶基因的大肠杆菌（E．coli）B121（DE3）为研究对象,研究以乳糖作为诱导剂时重组目的产物的表达规律。[方法]以重组木聚糖酶比酶活为评价指标,利用单因素试验和k（3。）正交试验考察摇瓶发酵条件下诱导剂浓度、诱导时机、诱导培养时间和诱导培养温度对木聚糖酶表达的影响。[结果]各因素影响程度依次为：诱导时机〉诱导温度〉诱导时间〉诱导剂浓度;最优表达条件为：诱导剂浓度5∥L、诱导时机0．5h、诱导培养时间4．5h、诱导培养温度32℃;在此工艺条件下,重组木聚糖酶比酶活可达49．69U／mg。[结论]乳糖作为诱导剂能够成功诱导酸性木聚糖酶在大肠杆菌中的表达。 相似文献
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为了提高犬细小病毒VP2基因在大肠杆菌E.coli BL21（DE3）中的表达量,通过改变诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度等条件对表达量产生影响,以SDS-PAGE电泳分析证明VP2基因蛋白表达的最佳条件,并通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱法纯化目的蛋白。结果表明,重组质粒E.coliBL21（DE3）在35℃,1.0 mmol/mL IPTG诱导6 h时条件下蛋白表达量最高。SDS-PAGE电泳检测的纯化目的蛋白约为90 kDa,与预计大小一致。VP2基因融合蛋白的优化表达和纯化为研究犬细小病毒亚单位疫苗奠定了基础。 相似文献
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源于马铃薯Y病毒CP基因的dsRNA原核表达及提取 总被引：1，自引：1，他引：0
以马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)为基础构建了含PVY CP基因3’端253bp反向重复片段的双链RNA(dsRNA)原核表达载体,并转化大肠杆菌HT115(DE3),经IPTG诱导产生dsRNA,用LiCl沉淀法提取,获得了高质量的dsRNA。 相似文献
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诱导提取的dsRNA粗提液对黄瓜绿斑驳花叶病毒的抑制作用 总被引：2，自引：0，他引：2
在已测序的黄瓜绿斑驳花叶病毒运动蛋白基因序列的基础上,设计特异引物,扩增全长基因,将其插入到原核表达载体L4440的2个T7启动子之间,构建能诱导形成双链RNA (dsRNA)的原核表达载体L4440-MP,并转化大肠杆菌HT115(DE3),经IPTG诱导,提取了高质量的dsRNA.将提取的dsRNA对黄瓜进行抗病性... 相似文献
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GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及纯化 总被引：1，自引：0，他引：1
优化GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中的表达条件,并对其表达产物进行纯化。通过改变诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度等条件,SDS-PAGE电泳分析以确定GST-LRF融合蛋白表达的最佳条件。并通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱和电洗脱法纯化目的蛋白。结果表明:重组质粒转化菌E.coliBL21(DE3)在37℃、0.1 mmol/L IPTG诱导5 h时,GST-LRF融合蛋白表达量最高,经电洗脱法纯化得到了GST-LRF融合蛋白。已确定GST-LRF融合蛋白在大肠杆菌的最佳表达条件,并纯化得到目的蛋白,为进一步制备抗LRF的单克隆抗体及LRF功能的研究奠定了基础。 相似文献
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[目的]为提高植原体膜蛋白Imp基因在E.coli BL21(DE3)中的表达量,优化Imp基因的原核表达条件。[方法]通过设计正交试验,考察不同的培养条件对工程菌E.coli BL21(DE3)-pET-28a(+)-Imp的影响。在获得最佳培养条件的基础上考察不同诱导条件对Imp蛋白表达量的影响。利用SDS-PAGE和Gene Tools凝胶分析软件分析融合蛋白Imp的表达量。[结果]表达条件优化结果表明,最佳培养条件为:温度37℃,pH 7.0,装液量20%,振荡速度200 r/min;最佳诱导条件为:温度37℃,起始OD600≈1.5,IPTG终浓度0.1mmol/L,诱导培养时间6 h。[结论]在最佳条件下Imp表达量达70.98 mg/L,确定了Imp融合蛋白在大肠杆菌的优化表达条件。 相似文献
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随着西部大开发战略的实施,种子工作紧紧围绕我县压麦、增油、扩豆、抓菜发展特色农业总体构想,必须立足我县种子工作的实际,质量为根本,效益为中心;以多渠道增加投入为手段;以引繁推优良品种求发展,走种子产业化、品种布局区域化、加工机械化、质量标准化、包装商品化、经营规模化、管理法制化的路子.在"十五"期间种子工作重点做好以下四个突破,三个扩大,一个引种. 相似文献
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1仔细观察发情,鉴定要准确,输精求适时适时输精是提高母牛受胎率的关键,为此要认真仔细的观察、准确判断把握排卵期。发情母牛最佳输精时间:一是发情母牛阴门肿胀刚开始消退,颜色变为紫红色;二是由乱跑鸣叫变为安静,不躲避人;三是手抓牛尾有拱背表现;四是输精器插入阴道后牛尾高举,阴户收缩,呈排尿姿势或立即排尿等;五是直肠 相似文献
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Source parameters of stick-slip friction events measured in the laboratory show particle and rupture propagation velocities which are similar to those observed for earthquakes and inferred from seismic source theory. This dynamic similarity strongly supports the idea that stick-slip is the mechanism for shallow earthquakes. 相似文献
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Agency for technological development for domestic programs 总被引：1，自引：0，他引：1
A Etzioni 《Science (New York, N.Y.)》1969,164(875):43-50
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张迪 《信阳农业高等专科学校学报》2007,17(3):1-5
社会和谐是社会主义的本质属性和内在要求。构建社会主义和谐社会有赖于经济发展、制度完善和社会公正。构建社会主义和谐社会既要大力弘扬中华民族的传统和谐思想文化,又要借鉴世界文明成果。 相似文献
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美国环保署农药地下水风险评估模型 总被引：1，自引：1，他引：0
在介绍美国农药环境风险评估的概念、分级、地下水农药监测情况及水资源的立法保护等基础上,重点阐述了美国环保署在农药登记管理过程中使用的2个地下水风险评估模型,即SCI-GROW和PRZM-GW模型。SCI-GROW是以好氧条件土壤半衰期和土壤有机碳分配系数为自变量的经验线性回归模型,而PRZM-GW则是描述农药在土壤中运动的一维、有限差分模型。本文通过对美国环保署这2个特点鲜明的模型的介绍,希望能为我国的农药地下水风险评估及模型的开发提供一个新视角。 相似文献
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石油污染土壤微生物治理技术发展方向 总被引：1，自引：0，他引：1
采油废水和含油固体废弃物的排放,在一些区域造成了严重的土壤石油污染.经济而无二次污染的微生物石油污染土壤治理技术具有难以比拟的优势,其实质是通过对石油污染土壤微生物群落进行定向调控,充分发挥功能微生物的石油污染治理作用,强化对石油烃类污染物质的转化,从而达到石油污染治理和污染土壤修复的目的. 相似文献
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测土施肥田间试验地块的选择与处理技术 总被引：1，自引：0，他引：1
针对测土施肥田间试验的地块选择、试验方案的布置设计以及试验小区的整理与区划进行了细致阐述。测土施肥技术的推广应用能够有效提高地力和肥效,对基层农业科技工作者从事试验示范和推广应用具有重要的指导意义。 相似文献
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Ahuja SK Aiuti F Berkhout B Biberfeld P Burton DR Colizzi V Deeks SG Desrosiers RC Dierich MP Doms RW Emerman M Gallo RC Girard M Greene WC Hoxie JA Hunter E Klein G Korber B Kuritzkes DR Lederman MM Malim MH Marx PA McCune JM McMichael A Miller C Miller V Montagnier L Montefiori DC Moore JP Nixon DF Overbaugh J Pauza CD Richman DD Saag MS Sattentau Q Schooley RT Shattock R Shaw GM Stevenson M Trkola A Wainberg MA Weiss RA Wolinsky S Zack JA 《Science (New York, N.Y.)》2006,314(5801):924-925