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从某一已免疫禽流感的种鹅场采取30份血样，分别以健康鸡红细胞悬液和健康皖西白鹅红细胞悬液为指示剂，对30份血样进行禽流感血凝和血凝抑制试验。结果：用鸡红细胞悬液作指示剂进行血凝试验，测出抗原4HAU为1：32；用鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝试验，测出抗原4HAU为1：8以1：32倍数稀释抗原，分别用鸡红细胞和鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝抑制试验，测出30份鹅血清禽流感H5免疫抗体效价的平均值分别为2^5.8和2^3.9；以1：8倍数稀释抗原，用鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝抑制试验，测出30份鹅血清禽流感免疫抗体的平均效价为2^5.1。 相似文献
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血凝（HA）和血凝抑制试验（HI）主要是用于新城疫病原鉴定和抗体效价测定,新版《新城疫诊断技术》（GB/T16550-2020）对HA和HI试验判定结果进行了修改和细化,使其更加标准和规范。为尽快理解新版标准要求,熟练掌握操作要领,对新、旧版标准中HA和HI试验进行了比较,新版标准增加了对HA和HI试验4HAU抗原配制的标定、静置时间以及结果判定的改变。新版标准在操作步骤上更为精准详细,4HAU抗原配置更加准确,从而使得HI试验结果更加科学。本文结合实际检测,为广大实验室检验人员、大专院校学生及科研人员更好地理解新版标准,更熟练地操作,从而为提高试验结果准确性提供了参考。 相似文献
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芒种内F1杂交种的配制及杂种真实性的分子鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
通过人工杂交方法,建立了一个包含有142个单株的芒正反交F1后代群体,并采用SSR分子标记对杂交种进行鉴定,结果表明:以HAU116和HAU388两个SSR标记表现为共显性,鉴定出的真杂种个体数分别是121株和138株;而以HAU72、HAU384和HAU517三个标记表现为显性,其中HAU72标记从C0344(♀)×A0420(♂)后代群体中鉴定出54株为真杂种,HAU384和HAU517标记则从A0420(♀)×C0344(♂)后代群体中分别鉴定出48株和47株为真杂种。尽管不同标记的鉴定结果不完全一致,但后代群体中的每一个体均被至少一个标记鉴定为真实杂种。 相似文献
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禽流感微量红细胞凝集抑制试验(HI检测),因为其微量、快速、可靠,能够处理大量样品,并能在短时间内报告禽类血样的禽流感抗体滴度水平,因此成为出入境检验检疫部门基层实验室常用的方法。禽流感HI检测结果准确与否,对于出入境检验检疫部门及时掌握禽群的禽流感抗体水平,提高对辖区内注册活禽养殖场的禽流感疫病的监控,保证供港澳活禽顺利出口至关重要。笔者长期从事禽流感HI检测,积累了一些经验,与大家进行交流探讨:1不同效价工作抗原的影响由于禽流感微量红细胞凝集抑制试验的结果判定是以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI… 相似文献
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以禽呼肠病毒S1133毒株尿囊腔接种10日龄无特定病原体(SPF)鸡胚,无菌收集24 h～120 h的死胚尿囊液,加1 mL/L的甲醛灭活,浓缩制得琼扩抗原;用该抗原制成灭活苗两次免疫SPF鸡,无菌采血分离制备阳性血清;选用SPF鸡无菌采血分离制备阴性血清.经过效价测定制备16单位琼扩抗原,8单位阳性血清;取免后的SPF鸡血样4个20～2-5稀释分别与1单位～8单位琼扩抗原做琼扩试验,确定了应该用4单位或8单位琼扩抗原做工作抗原;并以血清中和试验为参照证明琼扩试验在血清抗体监测中的可行性.本研究成功制备了禽呼肠病毒琼扩抗原与血清,为用琼扩试验定量检测禽呼肠病毒感染禽和疫苗免疫禽的抗体奠定了基础. 相似文献
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江鸣 《上海畜牧兽医通讯》1996,(5):17-17
在做中和试验和特异性鉴定时都需用阳性血清,而血清的代价较大,为了节约血清的用量,设想把血清进行稀释后再用,但又要达到完全中和的效果,为此做了以下试验,来找出能完全中和抗原的最少的阳性血清的用量和合理的抗原稀释倍数。1.材料和方法1.1.材料(1)10日龄鸡胚:本厂自孵。(2)Losota苗和H_(120)苗本厂自产。(3)生理盐水:本厂自产。(4)NDV和IBV阳性血清由中监所提供。1.2.试验方法1.2.1.取NDV阳性血清和IBV阳性血清各1ml,加生理盐水进行2倍、4倍、8倍稀释。1.2.2.把Losota苗和H_(120)苗用生理盐水稀释成10~(-3)、10~(-4)。 相似文献
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应用从鼠粪便中分离的小球隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)卵囊,经阿拉伯胶梯度离心后,超声粉碎制成可溶性抗原.按常规方法免疫BALB/c小鼠,经融合、克隆筛选建立了5个单克隆抗体株(1A_8、2B_2、3C_4、1A_3和2C_3).通过免疫荧光和免疫组化检测,发现1A_8、2B_2和3C_4克隆株针对子孢子,而lA_3和2C_3针对卵囊壁.1A_8、2B_2和3C_4株单抗腹水分别以10%、20%和30%的量与小球隐孢子虫子孢子(约4×10~4个)共同孵育1h后,接种到人胎肺细胞上培养,结果观察到30_8株腹水、10+_2株腹水和20<_4株腹水对子孢子有明显细胞毒作用.进而观察了2B_2株单抗腹水对培养虫体的反应性,发现其对裂殖体期虫体亦有作用;进行了2B_2株腹水对BALB/c 小鼠的被动保护性试验,发现以1mL/只剂量分别于攻虫前后1d接种,其对5×10~5个卵囊攻击的BALB/c鼠有明显的保护作用.Western印迹结果表明,2B_2株单抗是针对小球隐孢子虫抗原的28000蛋白质分子. 相似文献
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为研究不同H5亚型高致病性禽流感病毒(H5 HPAIV)的HA和NA匹配度对流感假病毒组装和功能的影响，本研究将5株H5 HPAIV的HA和NA基因节段分别克隆于pCMV/R载体，构建3个HA和5个NA重组质粒，两两随机组合后将HA、NA质粒与pCMV/RΔ8.9质粒、p HR-CMV-Luc质粒构成4质粒系统，利用磷酸钙法将4个质粒转染HEK293T细胞，检测各细胞培养上清液血凝效价，结果显示：有3个上清液无血凝效价，其余12个上清液的血凝效价在100 HAU/m L～400 HAU/m L，表明获得12株具有血凝效价的流感假病毒。超速离心后获得浓缩假病毒，通过western blot检测假病毒HA蛋白的表达，结果显示各假病毒均在75 ku、50 ku和25 ku有特异性条带。利用各假病毒分别感染MDCK.1细胞60 h后裂解细胞，采用荧光素酶试验检测假病毒的相对荧光素酶活性(RLA)，结果显示各假病毒RLA在5.0×101～4.5×105不等。上述结果首次表明不同H5 HPAIV的HA和NA相互匹配会对假病毒的血凝效价和相对荧光酶活性(R... 相似文献
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山羊蠕形螨病的早期免疫学诊断试验 总被引：5，自引：0，他引：5
采集新鲜皮张上的山羊蠕形螨病灶的内容物（含大量各期虫体，虫卵及其分泌物），经捣碎，冻融，粉碎，离心制成复合可溶性抗原，经紫外分光光度计测出抗原蛋白质含量为1．21mg/mL，应用（NH4）2SO4沉淀法制备兔抗羊IgG，用制备的抗原作Dot-ELISA和IHA敏感性试验，Dor-ELISA的敏感度比IHA高120－180倍，与肝片吸虫病，日本血吸虫病阳性血清作特异性试验，在NC膜上未出现棕色斑点，经株联法试验，测出抗原的最佳工作浓度为0．1ug/mL，血清的最佳稀释度为1：200. 相似文献
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用低致病性禽流感病毒H9N2亚型(Mildly Pathogenic Avian Influenza Virus,MPAIV)F株全病毒作为抗原,制备能够用于建立ELISA检测AIV的特异性单抗;以间接ELISA和HI试验筛选出阳性克隆,并经有限稀释法三次亚克隆之后,共获得三株稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,在Dot-ELISA试验中三株单抗中的两株与13个AIV H9N2国内分离株、4个AIV H5N1国内分离株都反应,而与10个NDV国内分离株,IBV、IBDV、EDSV-76、SPF鸡胚尿囊液不反应.一株与13个AIV H9N2国内分离株反应,与4个AIV H5N1分离株、NDV、IBV、IBDV、EDSV-76、SPF鸡胚尿囊液不反应. 相似文献
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猪链球菌病病原的分离与分群鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
对来自焦作、鹿邑等八个地方的疑似链球菌病的病料进行链球菌分离、纯化后,做了一系列的生化分群鉴定试验。结果证明,这八个地方的猪病料中的链球菌为D群的有4株,H、B、C群的各1株,抗原群未被确定的1株。据此认为,在这八个地方D群链球菌所占的比重较大。 相似文献
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应用体外培养的泰氏锥虫制备可溶性抗原Ⅰ、抗原Ⅱ和代谢抗原.经测定,其蛋白含量每毫升分别为6.5mg、7.4mg和7.1mg.薄层等电聚焦电泳测定结果表明,抗原Ⅰ出现22条区带,抗原Ⅱ21条区带,代谢抗原28条区带,对照的伊氏锥虫琼脂免疫扩散抗原14条区带.经分析,泰氏锥虫抗原和伊氏锥虫抗原有4条区带在同一迁移率上.琼脂免疫扩散反应中,3种泰氏锥虫抗原均与相应免疫兔血清发生沉淀反应,抗原Ⅰ出现1条致密沉淀线,抗原Ⅱ和代谢抗原出现2～3条沉淀线,抗原效价为1:4～16.免疫电泳显示了类似的结果,抗原Ⅰ与免疫兔血清出现1条弧形沉淀线,抗原Ⅱ和代谢抗原与免疫兔血清出现了3条弧形沉淀线.间接血凝试验结果表明,泰氏锥虫自然感染牛血清效价为1:20～40,免疫兔血清为1:1280～5120.所制泰氏锥虫抗原对伊氏锥虫和媾疫锥虫血清也能很好地发生交叉反应,3份伊氏锥虫病马血清和3份伊氏锥虫人工感染兔血清血凝效价分别为1:10～40和1:8～1024;5份媾疫马血清有4份血凝效价为1:20～320.4份环形泰勒虫病牛血清均为阴性. 相似文献
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为进一步做好高致病性禽流感强制免疫抗体效价评估工作,国家市场监督管理总局和国家标准化管理委员会于2020年12月14日发布实施了新版《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936—2020)。新版标准中重新规定了高致病性禽流感血凝和血凝抑制试验的技术要求,与旧版本比较内容有所变动。为尽快理解新版标准要求,熟练掌握操作要领,对新、旧版标准中血凝和血凝抑制试验进行了比较。经对比分析发现,新版标准增加了对血凝抑制试验4 HAU抗原配制的验证,鸭、鹅等水禽血清的预处理内容,并对其结果判定予以补充。新版标准在操作步骤上更为精准详细,在结果判定上更加科学准确,弥补了旧版本存在的诸多不足。本文为广大兽医实验室检测人员更好地理解新、旧标准差异以及新版标准优点,从而提高试验结果准确性提供了参考。 相似文献
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应用间接血凝试验检测兔出血症病毒抗体的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
应用纯化兔出血症病毒抗原,以戊二醛醛化绵羊红细胞为载体,成功地建立了间接血凝试验用以检测兔出血症病毒抗体.与血凝抑制试验和琼脂双扩散试验比较,其敏感性比血凝抑制试验高32倍,比琼脂双扩散试验高1024倍.致敏红细胞于4°C保存四个月仍有效. 相似文献
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壮观霉素对体外鸡毒支原体的抑菌试验和对鸡体内鸡毒支原体病的治疗试验 总被引：1，自引：0，他引：1
1 材料与方法1 .1 试验药物 壮观霉素为水溶性粉剂 ,批号940 71 2 ,由中国医学科学院医药生物技术研究所北抗药厂生产。对照药物壮观霉素 ,水溶性粉剂 ,由比利时生产 ,批号 573KS,由中国医学科学院医药生物技术研究所提供。1 .2 鸡毒支原体菌种 R株、S6株 ,均由中国兽医药品监察所保存。1 .3 试验鸡 9日龄北京白鸡 ,试验前经血清学检测 ,该鸡为鸡毒支原体血清学阴性反应。1 .4 鸡毒支原体血清平板凝集抗原 由中国兽医药品监察所生产 ,批号为 930 1。1 .5 抑菌试验 试验前将试验药壮观霉素用蒸馏水配成一定浓度的溶液过滤除菌… 相似文献