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用淀粉凝胶电泳分析了柑桔叶片提取液中己糖激酶(HK)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、亮氨酸氨肽酶(LAP)、苹果酸脱氢酶(MDH)和苹果酸酶(ME)的同工酶。前三种酶显示出单一的活性区域,暗示了它们各自为单基因所决定。带型表明了HK和LAP是单节显性,而IDH是双节显性。在几种栽培的柑桔及枳壳中发现了Hk和Idh的四个等位基因和Lap的三个等位基因。MDH的同工酶在三个凝胶区域出现,它们显然为四个基因所决定,其中 相似文献
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苹果细胞质型苹果酸脱氢酶基因克隆、表达及酶活性分析 总被引：2，自引：0，他引：2
根据亚细胞定位,苹果酸脱氢酶可分为5种类型,其中依赖于NAD的细胞质型苹果酸脱氢酶(cyMDH)在植物上的研究较少.从苹果果实中分离了cyMDH的全长cDNA序列,命名为Mal-cyMDH (GenBank登录号为DQ221207),该序列含有一个996 bp的开放阅读框(ORF).序列同源性分析表明Mal-cyMDH与其他物种cyMDH有较高的同源性,进化树分析表明几乎所有的cyMDH可以聚类在一个分支上,并且cyMDH可能是MDH的最原始种.原核表达得到一个37 kD左右的融合蛋白,酶活测定表明该酶主要催化合成苹果酸.苹果果实中cyMDH酶活分析表明在高酸和低酸基因型中该酶的还原活性存在明显差异. 相似文献
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根据亚细胞定位,苹果酸脱氢酶可分为5种类型,其中依赖于NAD的细胞质型苹果酸脱氢酶（cyMDH）在植物上的研究较少。从苹果果实中分离了cyMDH的全长cDNA序列, 命名为Mal-cyMDH（Genebank登录号为DQ221207）,该序列含有一个996 bp的ORF。序列同源性分析表明Mal-cyMDH与其他物种cyMDH有较高的同源性,进化树分析表明几乎所有的cyMDH可以聚类在一个分支上,并且cyMDH可能是MDH的最原始种。原核表达得到一个37 kD左右的融合蛋白,酶活测定表明该酶主要催化合成苹果酸。苹果果实中cyMDH酶活分析表明在高酸和低酸基因型中该酶的还原活性存在明显差异。 相似文献
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杏果实发育过程中有机酸积累与相关代谢酶的关系 总被引：1，自引：0，他引：1
以新世纪杏为试材,测定了果实发育过程中有机酸质量分数及相关代谢酶—柠檬酸合成酶(CS)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)、乌头酸酶(ACO)和苹果酸脱氢酶(MDH)的活性,并对果实中有机酸积累与酶活性的关系进行了分析。结果表明,杏果实有机酸主要有苹果酸和柠檬酸,成熟果实中苹果酸占总酸量的95%以上,在果实发育过程中,有机酸质量分数缓慢上升,花后51d达最大值,之后逐渐下降。相关分析表明,苹果酸质量分数与MDH活性呈正相关,与CS活性及ACO活性呈负相关。柠檬酸质量分数与CS活性呈正相关,与MDH活性呈显著负相关,相关系数为-0.8675*。研究认为,CS、MDH和ACO是杏果实有机酸积累的主要酶,PEPC的作用不大。 相似文献
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美味侧耳五种酶的同工酶 不同菌体组织中的变化 总被引：2，自引：0，他引：2
比较了美味侧耳不同菌体组织中5种酶的同工酶谱变化。酯酶（EST）和苹果酸脱氢酶（MDH）在子实体中的酶带数和活性均高于液培菌丝，过氧化物酶（POD）的情况则正好相反，乙醇脱氢酶（ADH）的山梨醇脱氢酶（SODH）的酶带只在子实体中发现，酶谱随子实体培位而变异的程度同酶种类有关，POD变化较大，EST和MDH较不明显，ADH和SODH没有变化，本实验结果为今后以这5种酶为生化遗传标记研究美味侧耳提供了基础依据。 相似文献
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为研究柑橘砧木香橙对酸性土壤的适应机理,从‘资阳香橙’根cDNA文库中随机测序克隆了苹果酸脱氢酶基因CjMDH（Genbank Accession No. ABI75147）。该基因cDNA序列长1 368 bp,其开放阅读框为1 239 bp,推测其编码412个氨基酸残基,在编码氨基酸序列中存在苹果酸脱氢酶的NAD结合位点1个和苹果酸结合位点8个,iPSORT分析表明该基因编码氨基酸序列N端存在叶绿体转移肽。同源性分析显示CjMDH与拟南芥、烟草、大豆、豌豆、水稻、苜蓿等植物的MDH一致性约为80%,相似性在85%以上。在与苹果酸脱氢酶功能有关的NAD和苹果酸结合位点处氨基酸残基高度保守,表明这两个区域是MDH重要的功能区。Northern blot和Real Time RT-PCR分析结果表明该基因在香橙根和叶中优势表达,在根中表达量最高,茎中表达最低。将CjMDH基因构建到组成性启动子CaMV35S驱动的载体中,对烟草进行转化。从转基因烟草株系中筛选获得了CjMDH基因高表达的株系3个。将表达量高的转基因株系进行耐铝试验,初步结果表明在烟草中超量表达CjMDH,可以提高植株对铝毒的耐受能力。 相似文献
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苹果果实中苹果酸代谢关键酶与苹果酸和可溶性糖积累的关系 总被引：3，自引：0，他引：3
以‘东光’ב富士’苹果杂交后代为试材,研究苹果果实中苹果酸代谢关键酶与苹果酸和可溶性糖积累的关系。结果表明,负责苹果酸合成的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)、细胞质NAD依赖的苹果酸脱氢酶(cyMDH)和负责苹果酸跨膜运输的H+-焦磷酸酶(VHP)在高、低酸苹果果实成熟过程中活性没有明显差异,而负责苹果酸跨膜运输的H+-ATPase酶(VHA)在高酸果实中有较高的活性,负责苹果酸降解的细胞质NADP依赖的苹果酸酶(cyME)和ATP依赖的磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PEP-CK)则在低酸果实中有较高的活性。还从苹果酸向可溶性糖转化的角度探讨了苹果酸代谢关键酶对可溶性糖积累的影响。 相似文献
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利用同工酶鉴定柑桔杂种与遗传分析的研究 总被引：9，自引：1，他引：8
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对柑桔几个杂交组合材料进行了同工酶分析。结果表明,利用谷草转氨酶(GOT)同工酶可以鉴别华农本地早×三湖化红的杂种植株。谷草转氨酶、过氧化物酶(POX)、苹果酸脱氢酶(MDH)三种同工酶系统以及叶片形状四个指标均能充分鉴别华农本地早×宜昌橙的杂种。对华农本地早×宜昌橙F_2代进行GOT、POX同工酶遗传分析表明,GOT-2的分离符合二个或三个基因位点控制的假说;而POX-B分离广泛,尚难以进行遗传解释。对GOT-2、POX-B两种同工酶谱之间及其与叶片形状、嫩梢颜色两个形态学性状之间进行了独立测验,表明它们之间无连锁关系。 相似文献
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<正>同工酶主要指来源相同、催化性质相同而分子结构有差异的酶蛋白分子。近年来,同工酶技术在蔬菜上应用研究已相当广泛,已成为蔬菜研究不可缺少的一个手段。迄今,在蔬菜上已研究过的同工酶有过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶 相似文献
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两种石蒜中酯酶和苹果酸脱氢酶酶谱分析 总被引：1，自引：1，他引：0
对2种石蒜用3种方法提取酶液,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行酯酶和苹果酸脱氢酶同工酶酶谱分析,同时对提取酶液在白色点滴板上显色.结果表明:从酶谱分析可知,石蒜酯酶有1条谱带,相对迁移率(Rf)为0.17;苹果酸脱氢酶有2条谱带,Rf值分别为0.51和0.69.忽地笑酯酶有1条谱带,Rf值为0.17;苹果酸脱氢酶有4条谱带,Rf值分别为0.43,0.47,0.51和0.69.从显色试验可知,3种提取方法对酶提取的充分性、活性有差异;研磨后,经60%超声的提取方法对酶能够充分提取,而且能更好地保持酶的活性. 相似文献
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培养时间对黑木耳单核菌株同32酶酶谱的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了不同培养时间对黑木耳(Auricularia auricula)单核菌株7种酶同工酶的影响,其中EST、MDH、FDH的同工酶酶谱在菌丝生长阶段较稳定,培养20d的单核菌株H2和J3的EST、MDH和FDH的同工酶分别出现3个、2个和1个多态性位点,可用于H2与J3杂交后代同工酶基因位点的遗传分析.培养时间不同的H2和J3的ADH、GDH、ME、ACP的同工酶酶谱变化较小,单核菌株H2和J3的同工酶酶谱无显著的多态性表现. 相似文献
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通过柑桔五种叶片同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析来探讨柑桔裁培种与野生种的系统发育关系。共分析了谷氨酸草酰乙酸转氨酶(GOT)三个位点、过氧化物歧化酶(SOD)二个位点及苹果酸脱氢酶(MDH)、过氧化物酶(PX)、多酚氧化酶(PPO)的一个位点。 分析结果表明宽皮柑桔类品种有三个遗传起源地,即印度,中国和日本。中国的许多宽皮柑桔类品种[包括乳桔(kinokuna)及朱砂桔(Chu Sha Chu)]具有独特的基因型,而栟柑及丹西蜜桔在PX位点上表现的基因型不同于中国宽皮柑桔类品种,由此表明他们象以前认为的一样起源于印度。另外,被认为起源中国的Szu—ui—Kom则具有一个与印度宽皮柑桔类相同的基因C。 相似文献
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培养时间与培养基种类对毛木耳同工酶酶谱的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
通过研究培养时间和培养在种类对毛木耳同工酶凝胶电泳图谱的影响,证实酯酶同工酶在毛木耳中是一种稳定表达的酶类,培养时间和培养基种类对其无明显影响,苹果酸脱氢酶同工酶不受培养基种类的影响,但随培养时间的延长,由５～１０ｄ时的三条条减为１５～２５ｄ时的二条带,多酚氧化酶同工酶和过氧化物酶同工酶受培养基种类的影响显著,但除培养初期酶带数较少外,在１０～２５ｄ时酶带数稳定不变,由此可筛选出最适培养时间和培养 相似文献
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同工酶分析在黄瓜杂种一代纯度检测上的应用研究 总被引：11，自引：0，他引：11
应用垂直板不连续系统的聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）法，分析了黄瓜农大秋棚二号（Ｆ１）及其双亲发芽种子子叶苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）同工酶酶谱。发现了２个具有多态性的同工酶位点ＭＤＨ—２和ＭＤＨ—４。并以这两个位点为标记检测Ｆ１代（出现“杂种二聚体”）的纯度。对该一代杂种Ｆ２代及ＢＣ１、ＢＣ２代进行的遗传分析表明ＭＤＨ－４位点受一对共显性等位基因（ＭＤＨ－４Ｆ、ＭＤＨ－４Ｓ）遗传控制，ＭＤＨ—２位点存在－隐性虚等位基因（ＭＤＨ—２ｎ），这两个位点均符合孟德尔单基因分离规律，证实了黄瓜杂种一代农大秋棚二号及其双亲间苹果酸脱氢酶同工酶酶谱差异的遗传基础。 相似文献
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一、概述 同工酶(isozyme**)是指催化反应相同而结构不同的一类酶,也就是指生物体内酶的多型性。 自从本世纪五十年代,首先发现乳酸脱氢酶的多型现象以来,已知50％以上的酶分子都有同工酶,在国际酶学委员会登记的700多种酶中,已酶谱化的同工酶数超过了100种。 相似文献