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探讨电激液中不同Ca2+浓度与不同电脉冲强度相互关系对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活的影响;以及山梨醇电激活液在猪孤雌激活中的应用。结果表明,当Ca2+浓度不高时,同时增加电激液Ca2+浓度和电脉冲强度能协同促进孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率的提高,Ca2+浓度为0.05和0.1mmol/L时,分别以1.6kV/cm和1.2kV/cm激活,得到的卵裂率为73.75%、74.70%;囊胚率为37.50%、36.83%,显著高于其余各组(P0.05);当Ca2+过高,增加脉冲强度卵母细胞孤雌发育能力反而下降,退化率升高;以山梨醇液进行电激活,在1.6kV/cm时,卵裂率和囊胚率最高,分别为77.23%和34.15%;与甘露醇电激液不同,施加交流电,山梨醇液不能对孤雌胚胎发育起到促进作用;将山梨醇、甘露醇电激液等体积混合,交流脉冲后进行电激活,1.2、1.6kV/cm组卵裂率分别为72.33%和70.03%,囊胚率分别为31.03%和29.60%,虽然略低于甘露醇组(77.07%、36.03%),但优于山梨醇组(69.63%、26.93%),差异不显著(P0.05)。以上结果说明,猪卵母细胞激活所需内流Ca2+浓度存在临界值,临界值内,提高Ca2+浓度或电参数,都能提高卵母细胞的激活效果;超过临界值,效果相反;山梨醇液能够取代甘露醇液用于猪卵细胞的电激活;同时以山梨醇和甘露醇作为电激液的基本成份,完全可以用于猪卵母细胞的电激活或融合。 相似文献
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兔卵母细胞的电刺激孤雌激活及体外发育 总被引:5,自引:0,他引:5
本文分析了影响兔卵母细胞电激活及发育的主要因素,建立了激活及体外发育的实验程序。试验表明,激活率随着卵龄的增加而升高,采用0.3M甘露醇为电激液时20h卵龄的激活率为40%,显著高于16及18h的14%(P<0.01)和20%(P<0.05)。含电解质成分的电激液的激活率显著高于非电解质液。随着电激次数及场强的增加,激活率亦显著升高,以0.3M甘露醇+100μM CaCl2+100μM MgCl2 相似文献
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为获得有效表达的产漆酶乳杆菌工程菌和既可以产乳酸又可以产漆酶的益生菌制剂。以杏鲍菇为试验材料,利用RT-PCR方法,克隆漆酶基因,将其与乳酸菌食品级表达载体质粒p MG36e进行连接,构建漆酶乳酸杆菌表达载体质粒p MG36e-Lacc1,通过电激转化法使其进入从青贮饲料中提取的布氏乳杆菌中,并探究影响布氏乳杆菌电转化的最适条件。试验结果表明:扩增得到长度为1 596 bp的漆酶基因片段,成功构建漆酶乳酸杆菌表达重组质粒,利用电激转化技术使其导入布氏乳杆菌基因组中,研究表明当电场强度达到1.75 k V,用SMRS培养基复苏培养1.5 h后,得到较高的电激转化率。 相似文献
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灰色理论把系统分为黑、灰、白三大类。白色系统为信息完全明确的系统,即其中的主要信息是确知的系统,而黑色系统与白色系统正好相反,系统内部的信息我们毫无所知或基本不知。简要介绍了灰色理论的基本原理及基本方法。通过回顾灰色理论的发展历程及研究现状,以及灰色理论在地震解释、地质评价、测井解释三方面应用研究的最新进展,指出灰色理论的发展趋势和方向。随着油田勘探开发进程的不断深入,灰色理论将受到越来越广泛的重视,在油气的勘探开发中所发挥的作用将越来越明显。 相似文献
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本文简单介绍了碳氧比能谱测井的测量原理、技术特点、主要用途和操作步骤.同时针对碳氧比测井资料在现河的应用进行了分析,阐述了应用碳氧比测井资料解决油藏的剩余油分布问题. 相似文献
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本文简单介绍了碳氧比能谱测井的测量原理、技术特点、主要用途和操作步骤。同时针对碳氧比测井资料在现河的应用进行了分析,阐述了应用碳氧比测井资料解决油藏的剩余油分布问题。 相似文献
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为探索镁离子对卵母细胞激活的作用 ,研究了电激液、操作液和培养液中镁离子对小鼠卵母细胞电激活效果的影响。注射 h CG后 18h获取的小鼠卵母细胞 ,在含有或不含有 Mg2 的电激液、操作液和培养液中进行电刺激、洗涤和培养 ,并于培养 6 h和 9h后分别检查原核形成情况。结果发现 ,当用既含钙又含镁离子的甘露醇 (PM)进行电刺激 ,用含 Mg2 的 M2 (M2 )和 Whitten′s液 (WM)进行洗涤和培养时 ,卵母细胞激活率为 6 7.4 % ,而当电激液为不含 Mg2 甘露醇 (PM- )时 ,激活率降至 5 1.3% ,2组间差异显著 (P<0 .0 5 )。用 PM-电刺激 ,以 M2或不含有 Mg2 的 M2 (M2 - )洗涤并用 WM或不含有 Mg2 的 Whitten′s(WM- )培养 6 h,卵母细胞激活率分别为 5 0 .0 %、4 9.6 %和 5 3.8% ,3者间差异不显著 ,但显著 (P<0 .0 5 )低于用 PM、M2和 WM处理的对照组的激活率 (72 % )。培养 9h检查时 ,3个处理组的激活率均显著 (P<0 .0 5 )增加 (分别增加了 16 .7%、19.2 %和 18.2 % ) ,而对照组的激活率增加不明显 (5 % )。这些结果说明 ,电激液中的 Mg2 对卵母细胞的电激活率和原核形成速度有明显的促进作用 ,而操作液和培养液中的 Mg2 则对卵母细胞的激活率和原核形成速度没有显著影响 相似文献
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兔胚胎核移植操作条件的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对影响家兔胚胎细胞核移植的几个重要因素进行了研究。以不同的融合电场强度对重组胚进行处理,结果表明脉冲参数为1.65kv/cm,脉宽为85μs,脉冲数为1时,融合率达到77.1%。显著高于其它场强的融合率。当场强增加至2.50kv/cm时,多数重组胚发生溶解。融合液中的离子成份对重组胚的激活有重要影响。以0.3M甘露醇为融合液时,电激三次的激活率(50%)显著高于一次(36%)和二次(22.2%P<0.05)。当加入100μnCa2+时,电激三次后的激活率达到71.4%,显著高于电激一次(48%,P<0.01)和二次(61.3%,P<0.05)。多次电激还可提高重组胚的发育率,当有Ca2+存在时,三次电激后的囊胚发育率为31.4%。此外,随着卵母细胞卵龄的增加,重组胚的囊胚发育率下降,而融合胚的碎裂率则增高。当卵龄为HCG后21—24小时,碎裂率高达52%。对8-,16-,32-细胞期卵裂球的重组胚体外发育能力的研究表明,8-细胞期卵裂球的重组胚之囊胚发育率显著高于16-及32-细胞期卵裂的重组胚(36.4%比26%、27.5%,P<0.05)。将部分32-细胞期卵裂球的重组胚移入受体后,产出了3只核移植 相似文献
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黑熊人工采精,授精及妊娠管理的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究结合家畜与野生黑熊的繁殖机理,采用电采精刺激雄体,人工授精激母体诱导发情,再自然交配,提高公熊利用率和母熊受孕率,同时强化母熊妊娠期管理,提高产仔成活率。 相似文献
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兔卵母细胞的孤雌激活 总被引:8,自引:0,他引:8
从电脉冲次数、脉冲强度、脉冲间隔时间三方面对兔卵母细胞的孤雌激活进行了研究。结果表明,注射HCG后16h的MⅡ期卵,用1.4kV/cm、60μs的直流脉冲电激,脉冲次数分为1、2、4、8次4组,每次间隔30min,随着电激活次数的增加,活化率从46.5%增加到95.8%(P<0.01),但是电激活8次后,桑椹胚率却从63.6%下降列21.2%,囊胚率从23.6%下降列2.8%(P<0.01);用60μs的直流脉冲电激3次,每次间隔30min,分为0.4、1.2、2.4kV/cm3组,以1.2kV/cm脉冲强度的兔卵母细胞激活较为理想,脉冲强度增加到2.4kV/cm时,卵细胞死亡率升为67.1%(P<0.01)。用1.4kV/cm、60μs的直流脉冲电激3次,电脉冲间隔时间分为30、120、240min3组,卵细胞活化率分别为68.6%、91.5%、91.9%(p<0.01)。 相似文献