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青霉植酸酶生产条件及纯化的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
青霉培养液的原始pH值为5.5时，植酸酶大量地产生，酶活性高，在青霉的生长过程中，维持培养液pH的不降低会抑制青霉的生长，植酸钙可促进植酸酶活性的提高，粗酶液经硫酸铵分级沉淀，再经SephadexG-100凝胶过滤，洗脱液有2个具有酶活力的蛋白峰，植酸酶被纯化了3.3倍，比活力达71.3U/mg。 相似文献
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一种新的耐热性植酸酶基因在烟草中的表达 总被引：3，自引：0，他引：3
[目的]探究一种新的耐热性植酸酶基因在烟草中的表达结果。[方法]克隆了泡盛曲霉植酸酶基因编码区全序列,使其在烟草中高效表达,对重组植酸酶与天然植酸酶性质进行初步的分析和比较。[结果]对烟草叶片的植酸酶活性检测结果表明,重组植酸酶基因在烟草中得到较高水平表达,转基因植株的最高植酸酶活力为对照烟草的13倍;对烟草重组植酸酶蛋白的酶学性质进行了初步分析,结果表明重组植酸酶拥有与天然植酸酶同样的最适pH值和最适温度,耐热性略微下降,但在80℃处理15 min后仍有33%的残余酶活力。[结论]该研究为该植酸酶基因转化饲料作物的开发提供理论依据,也为泡盛曲霉植酸酶的工业化生产开辟了新的途径。 相似文献
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植物植酸酶及其饲用价值 总被引：11，自引：0，他引：11
植物植酸不但能分解内源植酸磷 ,对外源植酸磷同样有明显的降解作用。在饲粮中添加植酸酶活性高的植物性饲料 ,可提高猪和家禽对植酸磷的利用率 ,降低粪便中磷的排泄量 ,提高生产性能。麦类籽实中具有较高的天然植酸酶活性 ,发芽能显著提高种子中植酸酶的活性 ,因而有希望通过发芽提高麦类籽实中的植酸酶活性 ,经提纯浓缩后可达到在实际生产中应用水平 ,从而减少在饲料中添加无机磷或价格昂贵的微生物植酸酶 相似文献
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从黑龙江大豆根部土壤中分离一株穗霉属菌株,对其诱变菌株26-13-4所产植酸酶进行研究。该植酸酶对植酸钠的适宜水解温度为45℃、适宜pH为5.0,在4、25和45℃下热稳定性好,在pH4.0～7.0时植酸酶比较稳定;低浓度的Fe2+、Mn2+、Ca2+对酶活性有促进作用,而Cu2+、Mg2+、Zn2+、Al3+以及高浓度Mn2+、Ca2+、Fe3+对酶活性有抑制作用;K+、低浓度的Fe3+对酶活没有任何影响。结果表明,该植酸酶以植酸钠为底物时的米氏常数Km为4.4×10-5mol·L-1。 相似文献
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[目的]研究植酸酶基因在毕赤酵母中的组成型表达。[方法]用PCR方法从嗜热真菌(Thermomyces sp.)中扩增到去除信号肽和内含子后约1.4 kb的phyT基因编码区片段,并对该片段进行克隆与序列测定。[结果]序列相似性分析表明,克隆的植酸酶基因无信号肽和内含子,与报道的嗜热真菌Thermomyces lanuginosus植酸酶基因相似性最高,DNA序列相似性为95%。从验证后的转化子筛选得到了表达嗜热真菌植酸酶的重组毕赤酵母菌株p-phy T,SDS-PAGE分析显示其分子量约为45 kD,重组毕赤酵母成功表达植酸酶。与野生型菌株相比,结果显示重组植酸酶酶活性提高了12.6%,最适温度65℃,75℃仍有64%以上酶活活性;最适pH值为5.5。[结论]嗜热真菌植酸酶基因用组成型质粒能在毕赤酵母中表达。 相似文献
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植酸酶的作用机理及影响植酸酶活性的因素 总被引：13，自引：0，他引：13
植酸是存在于植物中的一种抗营养因子,它的存在降低了饲料的利用率和动物的生产力。植酸酶的应用可以在一定程度上缓解这一不利因素。本文简要介绍了植酸酶的研究现状、来源和分类、植酸酶提高畜禽对蛋白质、矿物质的利用率和消化酶活性的机理以及影响植酸酶活性的因素。 相似文献
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毕赤酵母GS115/phyA产植酸酶诱导条件研究 总被引：1，自引：0，他引：1
植酸酶是催化植酸及其盐类水解成肌醇和磷酸的一类酶的总称。在饲料工业和食品工业中添加植酸酶可分解植酸磷为可利用磷，同时消除抗营养作用，提高蛋白质、微量元素的利用率，有重要的应用价值。自然界存在广泛可分解植酸的菌株， 相似文献
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对用黑曲霉植酸酶基因构建的一株重组酵母E22所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明E22植酸酶分别在pH2.5～3.0和pH5.5左右具有2个最适pH峰,有活性pH范围为pH2.0～7.5,pH2.5时的最适温度为45℃左右、对植酸钠的Km值为0.000 2 mol/L、比活为493 328.7 u/mg、受Fe2+抑制,pH5.5时的最适温度为55℃.对植酸钠的Km值为0.000 1 mol/L、比活为624 376.2 u/mg、受Ca2+和Zn2+抑制,85℃热处理10 min酶活性保留70%,pH2.5下用胃蛋白酶、pH5.5下用胰蛋白酶处理6 h后酶活均保留90%左右,分子量为61.7KD,等电点在4.5到5.0之间. 相似文献
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[目的]研究植酸酶在猪饲料中的应用条件。[方法]采用钒钼酸法测定植酸酶活力,研究植酸酶活力及时间、温度和pH等因素对饲料中植酸酶作用的影响。[结果]各样品溶液的OD平均值分别为0．241、0．245和0．220。总磷量平均值分别为1．6948、1．7229和1．5516μmol／g,酶活平均值分别为5891．78、5743．00和5171．89IU／g。植酸酶的最适温度为55℃。50～65℃下饲料中植酸磷的降解率接近100％,40℃下其降解率为80％。4h后植酸磷的降解率为80％,5～6h后植酸磷基本被完全降解。pH值为2.5和5．5时植酸酶的活性最强;pH值为7．0时,植酸酶的活性很低。在温度为55℃和pH值为5．5的条件下,5h以上植酸酶对植酸钠中植酸磷的降解率为60％-100％;在温度为40℃和pH值为2．5的条件下,4h后其降解率为60％。[结论]该研究为植酸酶在畜禽养殖中的应用提供了理论依据。 相似文献
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TAN Wan-qin Phang Chiun Yee Sieo Chin Chin Yiap Beow Chin Clemente Michael Wong Vui Ling Norhani Abdullah Son Radu Ho Yin Wan 《农业科学学报》2015,14(9):1816-1826
The full length phytase gene of Mitsuokella jalaludinii was successfully cloned and was found to be 1 047 bp in length, with 348 amino acids, and was designated as PHY7 phytase gene. A comparison of the sequence of PHY7 phytase gene of M. jalaludinii with various microbial phytase gene sequences showed that it was not similar to those from other bacteria except Selenomonas ruminatium, thus suggesting that they may both express a new class of phytase. The PHY7 phytase gene was subsequently subcloned into bacterial expression vector, p ET32 a, for expression in Escherichia coli strain Rosetta-gami. Expression of the recombinant phytase gene was optimised and characterised. The recombinant phytase was estimated to be approximately 55 k Da by SDS-PAGE analysis. The recombinant phytase exhibited optimum activity at 55°C, p H 4.5 and showed good p H stability from p H 3.5 to 5.5(78% relative activity). Metal ions such as Ca2+, Mg2+, and K+ were found to exert significant stimulatory effect on the recombinant phytase activity while Cu2+, Fe3+, and Zn2+ greatly inhibited the enzyme activity. The recombinant phytase showed moderate resistance to trypsin proteolysis, but susceptible to pepsin proteolysis. The results of the study showed that several characteristics of recombinant phytase were slightly different from the native enzyme. Unfavourable characteristics such as reduced p H stability and metal ion effects should be taken into consideration during feed enzyme formulation. 相似文献
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草酸青霉菌I1的cDNA文库构建及其溶磷相关基因的筛选 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】构建草酸青霉菌I1的cDNA文库,筛选溶磷相关基因。【方法】利用SMART技术构建草酸青霉菌I1的初级cDNA文库,通过难溶磷培养基筛选具有溶磷能力的转化子,测序并进行生物信息学分析。在难溶磷液体培养基中,进行转化子对溶液pH值、可溶磷含量的影响和产有机酸试验。【结果】成功构建了草酸青霉菌I1的初级cDNA文库,其库容量约为5.29×106 cfu•mL-1,重组率为99%;利用难溶磷固体培养基筛选,得到具有溶磷圈的转化子48个,其中转化子I-4的cDNA序列全长536 bp,为一个新的序列,基因编码氨基酸残基序列长129 n.t。转化子E. coli HST08 I-4在液体难溶磷培养基中培养,提高了有机酸的表达量,并增加了有机酸的种类,在培养12 h后,开始产生乙酸,24 h后,溶液中产生乳酸、苹果酸和α-酮戊二酸,培养36 h,溶液pH值由6.32降到3.69,可溶磷含量达到0.1076 mg•mL-1。【结论】从草酸青霉I1中筛选到一个溶磷相关基因pstI。 相似文献
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通过对不同寄主或不同来源的11种29株拟青霉进行抗白色念珠菌和清除自由基的活性筛选,发现古尼拟青霉菌株RCEF0866的菌丝体乙酸乙酯提取物具有较强的抗真菌活性,在菌丝浓度为100.0 mg.mL-1时,其提取物的抑菌圈达到(18.1±1.7)mm;菌株RCEF0866和RCEF4118的菌丝体甲醇提取物还具有较强的清除自由基活性,在菌丝浓度为5.0 mg.mL-1时,其对0.4 mg.mL-1的DPPH(1,1 diphenyl-2-picryhydrazyl)自由基的清除率分别为82.75%和79.53%。对菌株RCEF0866菌丝体的乙酸乙酯提取物进行薄层抑菌试验发现,其抗真菌主要成分的Rf值为0.90,表明该抗真菌成分为低极性成分。二苯代苦味肼基自由基薄层试验结果表明,RCEF0866菌丝体的甲醇提取物中具清除自由基活性的成分的Rf值为0.80,表明该清除自由基成分也为低极性成分。 相似文献
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从云斑天牛肠道中筛选到一株产植酸酶活性较高的假单胞菌Pseudomonas sp.TN06。采用简并PCR和TAIL-PCR的方法获得一个新的β-折叠桶植酸酶基因(phyA06),开放阅读框全长1 902 bp,编码633个氨基酸和1个终止密码子,预测其前23个氨基酸为信号肽,含有两个β-折叠桶结构域。将phyA06基因在大肠杆菌中表达,重组蛋白经镍柱纯化后达到电泳纯。纯化后的重组酶最适pH为7.0,在pH 6.0~10.0的条件下具有很好的稳定性;最适温度为55℃,热稳定性良好。同时,该酶在低温下仍保持一定活力,甚至0℃仍有活性。该植酸酶具有应用于水产饲料行业的潜在价值。 相似文献
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Maize grain is primarily used as an energy source for poultry and other animals. Maize has relatively high phytate-P content and very low intrinsic phytase activity. Given that feed phosphates are produced from finite rock phosphate resources, a reduction in the use of feed phosphates in maize-based diets by increasing the utilization of plant P sources by animals is necessary to make poultry meat and egg production more sustainable. The utilization of P by poultry is affected by two intrinsic characteristics of maize: the concentration of inositol phosphates and the activity of the intrinsic phytase of the grain in the digestive tract. The objective of this review is to present data on the variation that exists in composition of maize relevant for P use and to address factors that influence P utilization in maize-based diets of poultry. Broiler chickens and laying hens have the potential to degrade phytate in the gastrointestinal tract, but this is depressed by high dietary Ca and P concentrations. Published values of phytate degradation in broilers are overall higher than those in laying hens. Differences also exist between broiler chickens and growing turkeys and Pekin ducks. The exogenous supplementation of microbial phytases and the introduction of transgenic high phytase maize in poultry diets are efficient not only for the improvement of phytate-P digestibility, production performance, egg quality and bone mineralization, but also for the reduction of P excreta to control environmental impact. 相似文献