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用猪瘟、猪肺疫、猪丹毒三联疫苗和猪丹毒1a、2型氢氧化铝吸附甲醛灭活疫苗分别免疫断奶仔猪,采用Dot-PPA-ELISA监测免疫猪血清抗体变化。结果,弱毒疫苗免疫后第7d猪丹毒血清抗体效价开始升高,第2~3周达最高值;灭活疫苗免疫后第3~4周抗体效价达最高值,且灭活疫苗免疫猪的抗体水平明显高于三联疫苗免疫猪。免疫6周后,用C43004(1a型)、C43179(1b型)和C43-12(2型)3株不同血清型的猪丹毒混合强毒同时对不同抗体效价的免疫猪和对照猪进行了皮肤内接种攻毒,并根据其皮肤和体温反应确定1:32为猪能抵抗混合强毒攻击的抗体保护效价。经对44头50~60日龄未免疫的断奶仔猪血清检测,其抗体效价在1:32以下的猪占88.36%,278头免疫猪血清的抗体效价在1:32或以上的猪占92.81%。表明Dot-PPA-ELISA适用于猪群猪丹毒的免疫监测和免疫力测定。 相似文献
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Dot-PPA-ELISA检测仔猪副伤寒血清抗体方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以沙门氏菌的改良H.E.抗原为膜载抗原,建立了检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot-PPA-ELISA方法.研究选取了特异性良好的抗原,确定了Dot-PPA-ELISA的最佳工作条件,初步确定了感染仔猪副伤寒的Dot-PPA-ELISA抗体阳性标准为1:32.本研究制备的诊断膜片特异性强、敏感性高,能够检测到1:2 048稀释的动物试验阳性血清;该方法操作简便快捷、结果客观、易于判定、各种试剂材料均可做到标准化,适合规模化养猪场仔猪副伤寒的抗体监测以及流行病学调查之用. 相似文献
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接种猪丹毒菌苗的母猪5头,经3~5个月后,用猪丹毒菌血清培养凝集试验,其血清中可测到猪丹毒的特异性抗体,但中和试验有3头母猪的血清未能保护小白鼠。用巯基乙醇处理母猪血清,证明其含有 IgG 与 IgM。未吃初乳的新生仔猪血清中没有特异性抗体,证明它不能通过胎盘传递给胎儿。初乳的乳清用凝集试验与中和试验均能测出猪丹毒特异性抗体。吃过初乳的仔猪在13日,15日龄,其血清用以上2种试验可测到猪丹毒特异性抗体,证明母源抗体可通过初乳传递给仔猪。吃过初乳的15~17日龄仔猪,可以抵抗皮内接种猪丹毒强毒活菌的攻击,20日龄仔猪不能抵抗强毒活菌的攻击。1、3、5、7、9及12周龄的仔猪接种猪丹毒菌苗,于3月龄后攻击猪丹毒强毒活菌,其免疫率分别为28.6%、25%、66.6%、75%、87.5%、及100%。根据以上试验结果,我们认为仔猪接种猪丹毒菌苗的适当年龄应在9周龄以后,12周龄时预防注射效果更好;如果在哺乳期注射了菌苗,则必须于断乳1个月后再注射1次,其免疫效果才比较确实。 相似文献
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Dot-PPA-ELISA检测猪血清伪狂犬病抗体的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本研究建立了Dot-PPA-ELISA检测猪伪狂犬病抗体的方法.制备的诊断膜片PRV点样抗原含量为0.5μg,可以检测的最低猪IgG含量为1.398×10-8g,灵敏性高.不与猪瘟、猪细小病毒病、猪衣原体病、布氏杆菌病、日本乙型脑炎、口蹄疫阳性血清发生交叉反应,特异性好.研究初步确定检测猪伪狂犬病抗体的阳性标准为血清效价1:64以上.试验结果表明:该法具有操作方便、快速,结果客观,易于判读等优点,可应用于猪场伪狂犬病的诊断和抗体检测. 相似文献
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用已经建立的检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot—PPA—ELISA,对不同仔猪副伤寒抗体水平试验组14头仔猪和对照组4头仔猪进行了血清抗体效价测定,并以沙门菌强毒攻击受试猪,测定血清抗体效价与保护力的关系。试验结果表明,以Dot—PPA—ELISA检测的仔猪副伤寒血清抗体几何平均效价不低于28^8.2时,85.7%的猪能够抵抗沙门菌强毒的攻击。试验初步确定以Dot—PPA—ELISA进行猪群免疫监测时,血清抗体的几何平均效价2^8.0。为仔猪副伤寒的保护临界标准,该标准的确定为集约化猪场用Dot—PPA—ELISA检测仔猪副伤寒血清抗体,进行仔猪副伤寒的诊断、免疫监测及流行病学调查提供了科学依据。 相似文献
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应用仔猪副伤寒琼扩抗原,对副伤寒高兔猪进行检测,第一次注射后第5天3/3阳转,抗体持续34-72天;对副伤寒弱毒苗免疫猪进行琼扩检测,于注苗后7天9/11阳转,14天11/11阳转,抗体持续7-40天,该法与猪布氏杆菌病、猪巴氏杆菌病、猪丹毒、猪弓形体病、猪瘟、猪密蠓旋体病、猪链球菌病均无交叉反应。用本法检测1288份现地血清,阳性率3.26%,试验肜该法监测仔猪副伤寒特异性强,操作简便、快速、具 相似文献
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建立了猪丹毒丝菌抗体竞争ELISA检测方法,用于猪丹毒疫苗效力检验。用SpaA蛋白(纯度90%)和辣根过氧化物酶(HRP)标记的SpaA蛋白单克隆抗体,建立猪丹毒丝菌竞争ELISA抗体检测方法,确定检测结果的判定标准,并对该方法的特异性、敏感性、重复性(批间重复性和批内重复性)等进行评价。建立效力检验血清学方法与免疫攻毒法的平行关系,并对两种方法符合率进行评价。结果表明,SpaA的最佳包被浓度为2.0 ng/μL,阴阳性对照血清的最佳稀释倍数为1∶75,HRP标记的单克隆抗体的最佳工作浓度为0.2 ng/μL。ELISA结果判定标准为血清样本抑制率PI≥8.0%时判定为阳性,PI<8.0%判定为阴性。该方法特异性良好,与空白小鼠阴性血清及A型和B型猪多杀性巴氏杆菌阳性血清均不发生交叉反应;敏感性良好,与敏感性血清样品可呈现不同梯度抑制率;重复性良好,批内重复和批间重复性试验结果变异系数均小于10%;与效力检验免疫攻毒法具备平行关系,小鼠血清效价≥1∶100时可抵抗1000 MLD强毒攻击;对用不同冻干代次菌种制备的4批猪丹毒丝菌灭活抗原和来自4家企业的7批猪丹毒灭活疫苗进行检测并... 相似文献