共查询到18条相似文献，搜索用时 250 毫秒
1.
2.
3.
尾赤桉DH201-2遗传转化体系建立的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以建立的尾赤桉(Eucalyptus urophylla × E. camaldulensis)DH201-2无性系高频再生体系为基础,利用GUS染色组织分析法研究了根癌农杆菌菌株、农杆菌预培养时间、浸染时间和共培养时间等因素对尾赤桉茎段和叶片外植体遗传转化的影响,探讨了适宜尾赤桉转化的卡那霉素和抑菌抗生素头孢塞污钠的使用浓度.结果表明,较优的转化条件是:采用农杆菌菌株GV3101,以茎段为受体材料,经过预培养6 d,在光密度OD600=0.5的菌液中浸泡30 min,然后转移到共培养培养基中共培养4 d,再转移到含90 mg/L卡那霉素和300 mg/L头孢噻肟钠的筛选培养基上,进行转化植株的再生,同时在共培养培养基和菌液中添加100 μM的乙酰丁香酮能够提高茎段外植体的转化效率. 相似文献
4.
5.
不同因素对农杆菌介导的杉木转化效率的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
以杉木试管苗靠近茎尖的茎段为受体材料,研究6个影响杉木遗传转化效果的因素,初步确定杉木茎段较为合适的转化体系为:预培养1～3 d,OD600 nm为0.1～0.4的菌液浸染10～15 min,共培养3～5 d,共培养基附加乙酰丁香酮(AS)80 μmol·L-1,共培养后延迟3 d筛选.在初次筛选培养基上共得到186个卡那霉素(Km)抗性芽,在二次筛选培养基上获得39个Km抗性芽.PCR检测有2个Km抗性芽呈稳定阳性,初步证明外源天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因已整合到这2个Km抗性芽的基因组DNA中. 相似文献
6.
为优化南林95杨叶片遗传转化体系,以南林95杨叶片为外植体,采用均匀设计U12(12×63),利用组织化学染色定位法,根据GUS基因的瞬时表达量,研究了农杆菌浸染时间、农杆菌菌液OD600值、共培养时间、乙酰丁香酮浓度等4个因素对遗传转化的影响。建立相关的线性回归方程,并优化了南林95杨叶片的农杆菌介导遗传转化体系,即农杆菌浸染时间35 min、农杆菌OD600值1.1、共培养时间4 d。 相似文献
7.
对农杆菌LBA4404转化柚木愈伤组织的适宜条件进行了优化．结果表明;LBA4404转化柚木愈伤组织的适宜预培养时间为11～15d,菌液光密度为0．5～0．8,共培养时间为13d,共培养的pH为5．6～6．2;重新悬浮的作用明显,乙酰丁香酮的作用不明显;不同无性系对LBA4404侵染的敏感性不一样,选择适宜的无性系可显著提高转化效率． 相似文献
8.
以烟草无菌苗叶片为外植体,利用叶盘法,将含生长素应答基因(auxin response factor,ARF)的根癌农杆菌LBA4404携带双元质粒载体(pBin438)介导进行遗传转化.结果表明:诱导烟草叶片不定芽的最佳分化培养基为MS 0.8 mg.L-16-BA 0.05mg.L-1NAA,生根培养基为1/2MS 0.02 mg.L-1IBA 0.02 mg.L-1NAA,分化率、生根率分别为96.9%、96.7%;将预培养3 d的外植体与农杆菌菌液浸染3~5 min后,共培养2~3 d,然后转化到含Km75 mg.L-1的选择培养基上进行分化筛选,再转入Km为75 mg.L-1、100 mg.L-1的培养基上进行生根筛选,生根率为66.1%;与对照相比,转基因烟草在形态上发生了明显的改变,叶片颜色变深绿,叶片增厚,主叶脉变粗壮等.PCR扩增,获得40株阳性转基因苗,证明ARF基因已导入烟草中. 相似文献
9.
国槐遗传转化体系的优化 总被引：1，自引：0，他引：1
采用根癌农杆菌介导的国槐叶盘转化法,在建立修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)转化体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行研究.结果表明:国槐叶片需在黑暗条件下在MS培养基上预培养5天,农杆菌菌株选用GV3101,农杆菌共培养3天较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.7,感染时间10 min;侵染前的菌液和共培养基中添加200/μmol·L-1乙酰丁香酮(AS)对国槐遗传转化有明显的促进作用;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)500mg·L-1最好.PCR和Southern blotting检测证实sck基因已整合到国槐基因组中. 相似文献
10.
本试验以建立的南林95杨高频再生体系为基础,利用正交试验设计,通过GUS组织染色分析法研究了预培养时间、茵液浓度、As浓度、侵染时间和共培养时间5个因素在4个水平上对南林95杨遗传转化的影响,并探讨了南林95杨转化中添加卡那霉素的适宜浓度。运用DPS软件对试验结果进行分析,建立了杨树遗传转化体系。结果表明：外植体预培养7d,在含As200μmol／L的茵液浓度为0．6的农杆菌液中侵染20rain,共培养3d为最佳遗传转化体系,适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg／L;本试验共获得6株转化植株,经GUS染色检测和PCR分析表明．GUS基因已初步整合进入南林95杨基因组中。 相似文献
11.
不同培养条件对金铁锁毛状根生长的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
利用发根农杆菌ATCC15834诱导金铁锁获得毛状根,研究金铁锁毛状根的最优培养条件。结果表明,在5种培养基中,以在1/2MS培养基中皂苷的总产量最大;添加3%蔗糖、水解乳蛋白(LH)及IBA利于毛状根的生长及总皂苷的积累;而添加IAA、NAA、6-BA及蛋白胨抑制其生长。 相似文献
12.
毛状根是产生植物次生代谢产物的重要生物反应器。本文简述了发根农杆菌Ri质粒诱导植物产生毛状根的基本原理与方法及影响因子,对毛状根培养次生代谢物在药用植物上的应用作了概述,并提出其产业化前景、存在的问题。 相似文献
13.
近年来,已发展出遗传转化高等植物的一些新技术,其中有些技术如脂质体融合,微注射技术和电击导入都是基于动物细胞培养方面的工作,而另一些技术是来自于植物界独特的天然转化系统,其中包括已知能遗传转化高等植物的农杆菌(Agrobacterium)的二个种,即致瘤农杆菌(A.tumefaciens)和发根农杆菌(A.rhizogenes),这二个种都能够将其致病质粒Ti或Ri所携带的DNA序列(T-DNA)插入到双子叶植物细胞核基因组中。pTi诱发寄主产生根基肿瘤,pRi诱发寄主产生毛状根。二者的差别可能是毛状根可以从毛状根培养物获得具有完整的T-DNA序列的有生育能力的再生植株,而从致病农杆菌(A.tumefaciens)菌株所诱发的肿瘤很难获得再生植株。因此,利用发根农杆菌(A.rhizogenes)pRi作为遗传转化高等植物的基因克隆载体的研究和应用日益受到重视。 相似文献
14.
《Scandinavian Journal of Forest Research》2012,27(1-4):46-51
Two‐ to three‐week‐old seedlings of Picea abies, Pinus sylvestris and Pinus contorta were inoculated with the supervirulent strain Agrobacterium rhizogenes R1600 2cm above the base of the hypocotyl; other treatments included inoculation with Agrobacterium tumefaciens strain A281 (pTVK291) or mock inoculation. Hairy or highly branched roots formed on 2–3% of seedlings of all 3 species that were infected by R1600 but on none of the other seedlings. Normal adventitious roots were also induced on 5–10% of Agrobacterium‐treated seedlings but none appeared on the other seedlings. Opine assays and growth rates of hairy and normal roots indicated that only roots with the hairy morphology were transformed. 相似文献
15.
试验以组织培养获得的柔枝松不定芽为对象,对其进行不定根诱导研究。结果发现：IBA对不定根的诱导无明显影响。IBA和NAA配合使用时,形成了大量畸形不定根。NAA对不定芽的伸长生长有明显的促进作用,当培养基中添加0．05mg·L^-1NAA时,苗高达3．12cm,显著高于其他处理。不同浓度NAA及其不同诱导时间对不定根的形成无明显促进作用,反而促进了大量愈伤组织的形成。总之,柔枝松不定芽在无植物生长调节剂的1／2GD培养基能稳定诱导不定根形成,最高生根率为16．67％,说明柔枝松不定芽可能易诱导潜伏根原基,并在无植物生长调节剂的刺激的培养条件下伸长生长。IBA和NAA的使用浓度和诱导时间仍需进一步研究。 相似文献
16.
Two-year seedlings of Quercus robur (pedunculateoak) were root-pruned before transplanting in order toevaluate the importance of coarse versus fine roots onregrowth. Root systems were pruned by leaving c. 19,13 or 7 cm root from the root collar. Alternatively,coarse roots (>2 mm in diameter) were removed, leaving only the taproot and the fine roots (<2 mm)attached, or fine roots were removed from coarse rootsand taproot. Growth of shoots and roots after onegrowing season was compared to an unpruned controlunder standard nursery conditions. Seedlings rootpruned to 19, 13 or 7 cm were further tested undercompetition achieved by transplanting into a mixtureof clover and grass. Pruning of the root systemsignificantly reduced regrowth in terms of total plantDW in accordance with the severity of pruning, shootDW being more affected than root DW. Removal of coarseroots depressed final root DW whereas removal of fineroots reduced shoot DW and hence root:shoot ratioincreased. The study suggests that fine and coarseroots have different roles in root:shoot allocation.The competition test increased root:shoot ratioindicating that competition induced seedlings toallocate more of their resources into growth of theroot system. 相似文献
17.
18.
For the first time three different natural compounds, isolated from hairy roots of Astragalus membranaceus, cultivated in airlift bioreactor were tested for their cytotoxic potential and apoptosis induction in a panel of human tumor cell lines. Root cultures, cultivated in bioreactor gave 18.5 g l? 1 dry wt roots with the highest astragaloside production in vitro up to now — 1.64% (astragaloside I), 1.12% (astragaloside II) and 1.08% (astragaloside III). In this manner the production in airlift bioreactor can be used as means of reliable supply of cycloartane saponins to extend the research to human clinical studies. 相似文献