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温汤处理诱导桑蚕孤雌生殖适宜条件的探讨 总被引：7，自引：1，他引：6
采用不同浸卵温度和浸卵时间，对三个现行品种及二个弧雌生殖系进行了孤雌生殖诱导试验，结果表明温度变化对弧雌生殖发生率的影响显著超过浸渍时间变化对孤雌生殖发生率的影响。现行蚕品种适宜的孤雌生殖诱导条件为浸卵温度４４－４６℃、浸卵时间１４－１８分。 相似文献
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家蚕孤雌生殖系在家蚕性别控制、基因纯化及杂种优势产生机制研究等方面有着特殊的应用价值。为了筛选适合云南蚕区饲养的家蚕孤雌生殖系育种材料,以云南省保存的20个家蚕品种(品系)为材料,以温汤处理法处理蚕卵,调查不同品种(品系)的孤雌生殖发生率。供试家蚕品种(品系)中,B黄2的孤雌生殖发生率达77.3%,极显著高于其它品种,而夏芳B的孤雌生殖发生率仅为3.1%,品种间孤雌生殖发生率最大相差74.2个百分点;孤雌生殖发生率40%以上的品种多数为日系品种,且多数日系品种的孤雌生殖发生率在60%以上,中系品种除B黄2外其余品种的孤雌生殖发生率均低于37.0%。相关性分析表明,温汤处理诱导的家蚕孤雌生殖发生率与品种所属地理系统及总卵数都有一定相关性,总体上表现为日系品种较中系品种更易诱导发生孤雌生殖,总卵数高的品种孤雌生殖发生率也较高。 相似文献
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通过检测家蚕未受精卵细胞中参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的几个关键基因的转录水平,分析热激诱导家蚕未受精卵发生孤雌生殖发育的分子机制。首先基于家蚕未受精卵RNA-seq数据分析表明,在家蚕孤雌生殖系和有性生殖系间,无论是经过热激诱导处理(46℃水浴18 min)或未热激处理的未受精卵,MAPK途径都存在差异表达的基因。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测分析MAPK途径的mos、mek、erk和p38mapk基因在热激诱导前家蚕孤雌生殖系及有性生殖系未受精卵之间的转录水平差异:位于MAPK通路中上游的2个基因mos和mek,无论中系品系还是日系品系中,均表现为在孤雌生殖系表达极显著下调(P0.01);而位于MAPK通路下游的基因erk和p38mapk,其转录水平在中系品系的孤雌生殖系与有性生殖系间无显著性差异,但在日系品系中则表现为在孤雌生殖系中极显著下调(P0.01)。qRT-PCR检测分析家蚕孤雌生殖系未受精卵的4个基因在热激诱导孤雌生殖发育过程中的转录水平变化也表现出差异性:热激处理后mos和mek的转录水平极显著下调(P0.01),并维持在低水平;p38mapk则在热激处理前后保持稳定;而热激处理后erk基因的转录先显著升高(P0.05),而后逐步下降,并维持在热激处理前的水平。研究结果提示,MAPK途径可能参与了热激诱导家蚕孤雌生殖发育过程。 相似文献
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家禽孤雌生殖的研究早在本世纪初就开始了。后来查明了这种现象的遗传制约性,在火鸡、来航鸡以及深考尼什鸡中按该特征进行了成功的选育,还证明,用各种病毒能激发该特征,并得到孤雌生殖的成年公火鸡和公鸡(Olsen M.W.等1961;1967;1968;1969)。本研究的任务是,在苏联本国的鸡品种中寻找有孤雌生殖倾向的特征,并查明以现有的Rous肿瘤(VSR)菌系激发孤雌生殖的可能性。方法试验选用黑考尼什、“C”系来航 相似文献
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U0126是激酶MEK1/2的特异性抑制剂,可阻止下游MAPK激酶磷酸化,导致减数分裂阻滞机构失活,卵细胞恢复分裂。本实验以抑制剂U0126注射羽化前2天的雌蛹,羽化后孤雌生殖诱导未受精卵,并调查蚕卵的发育情况。结果表明:对孤雌生殖发生率不高的Nastari品系,U0126可极显著提高孤雌生殖发生率;对孤雌生殖发生率高的品系无14,U0126可部分提高孤雌生殖发生率,暗示ERK途径参与蚕卵孤雌激活。 相似文献
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家蚕孤雌生殖差异蛋白——热休克相关蛋白的生物信息学分析 总被引：1，自引：1，他引：0
应用双向凝胶电泳(2-DE)技术研究家蚕孤雌生殖蚁蚕和正常蚁蚕的总蛋白质的差异,得到与孤雌生殖相关的差异蛋白点,并对这些蛋白点进行基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF MS)分析,获得了相关差异蛋白的序列特征。将这些序列与已构建的家蚕cDNA文库及蛋白质数据库进行比对,得到3个差异蛋白为热休克相关蛋白。通过5-′RACE的方法克隆到3个差异蛋白的全基因序列,并对它们进行结构和特征分析,有助于进一步研究其与孤雌生殖的关系。 相似文献
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采用RT—PCR技术首次从孤雌生殖长角血蜱四川株克隆到P27／30基因,扩增序列全长670bp,包含完整的开放阅读框,编码201个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为23．38ku。同源性分析表明孤雌生殖长角血蜱中国株与日本株P27／30基因同源性高达99．85％。经RT—PCR检测分析,该基因在孤雌生殖长角血蜱的卵、幼蜱、若蜱、饥饿成蜱和饱血成蜱这几个阶段均有表达。将该基因亚克隆后连接到pET32a（＋）原核表达载体,转化BL21（DEa）宿主菌,经IPTG诱导可成功进行表达。表达的目的蛋白大小为24ku左右,与预期大小一致;Western-blot显示兔抗长角血蜱全虫抗体能够识别该重组表达蛋白。 相似文献
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长角血蜱是我国常见的一种硬蜱,在自然界存在孤雌生殖和两性生殖的种群。本研究通过对分离的长角血蜱孤雌生殖上海株、安徽株和山东株的线粒体细胞氧化酶I（COI）基因部分序列进行了测定,并与国内其他单位所测定的两性或孤雌生殖的多株长角血蜱COI基因序列进行了比对分析。结果发现,长角血蜱孤雌生殖种群与两性生殖种群的COI基因序列存在特征性差异;COI基因序列可应用于长角血蜱的孤雌生殖种群和两性生殖种群的快速鉴定。 相似文献
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豆科牧草种子硬实特性及其破除方法 总被引：1，自引：0，他引：1
为了解豆科牧草种子的硬实特性及其破除方法,以30份豆科牧草种子为材料,研究硬实特性及划破种皮、浓硫酸处理、热水浸泡3种处理方法对种子硬实率、发芽率和发芽指数的影响。结果表明,30份豆科牧草种子的硬实率为0.00%~96.67%,平均为50.18%,不同豆科牧草种子间的硬实率存在较大差异,且与发芽率呈显著负相关关系(P0.05)。对于大部分豆科牧草种子,浓硫酸和热水的最佳处理时间与硬实率呈正相关关系,当硬实率大于70%时,浓硫酸和热水的最佳处理时间分别为15~30和7~15 min,而当硬实率小于30%时,浓硫酸和热水的最佳处理时间分别为5~10和1~3 min;浓硫酸处理和划破种皮对种子硬实的破除效果较好,热水处理效果较差,但经热水处理后的乳豆(Galactia elliptifoliola)和猪屎豆(Crotalaria pallida)种子发芽率要高于浓硫酸处理。因此,对于不同物种的种子,要选择不同的处理方法,并根据其硬实率大小预测不同处理时间。 相似文献
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为探讨细胞松弛素B（cytochalasin B,CB）对猪孤雌胚胎和克隆胚胎发育能力的影响,本研究通过在猪体外胚胎培养基中添加不同浓度CB以及不同孵育时间的处理,筛选出CB对猪早期胚胎发育的最适浓度和最佳孵育时间,同时通过Hoechst33342染色检测猪体外囊胚孵化期的细胞数差异,进一步研究CB对孤雌胚胎和克隆胚胎发育的影响。结果显示,培养基中添加CB浓度为7.5 μg/mL时孤雌胚胎和克隆胚胎的卵裂率分别为85.00%和90.23%,囊胚率为35.68%和42.58%,均显著高于其他各组（P < 0.05）;采用7.5 μg/mL CB处理电激活后的孤雌胚胎和克隆胚胎,孤雌胚胎孵育4 h组的卵裂率（83.80%）和囊胚率最高（35.39%）,与其他各组差异显著（P < 0.05）,而克隆胚胎孵育6 h组的卵裂率（83.98%）和囊胚率最高（55.62%）,与其他各组差异显著（P < 0.05）。此外,Hoechst33342染色结果显示,未添加CB处理的孤雌胚胎在囊胚孵化期的细胞平均数为28个,CB处理组的孤雌胚胎和克隆胚胎细胞平均数分别为36和52个,处理组和未处理组细胞数差异显著（P < 0.05）。结果表明,猪体外孤雌胚胎用7.5 μg/mL CB 处理4 h可获得较高的卵裂率和囊胚率;体外克隆胚胎用7.5 μg/mL CB 处理6 h卵裂率及囊胚率最高,且囊胚期内细胞团细胞总数最多。CB处理有利于体外胚胎早期发育,提高克隆胚胎移植受孕率。 相似文献
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J Petr E Chmelíková T Krejčová D Řehák B Novotná F Jílek 《Reproduction in domestic animals》2010,45(3):493-499
The nitric oxide donor (+)–S‐nitroso‐N‐acetylpenicillamine (SNAP) is capable of inducing parthenogenetic activation in pig oocytes matured in vitro. However, quite a long exposure to the nitric oxide donor, exceeding 10 h, is necessary for successful oocyte activation. Repeated short‐term treatment with 2 mm SNAP significantly increased the activation rates despite the fact that the overall exposure time to the nitric oxide donor did not exceed 4 h. With regard to the activation rate, 12 repeated treatments lasting 10 min each were found to be the most efficient regimen (63.3%). The continuous exposure to the nitric oxide donor for the same overall time induced parthenogenetic activation in 12.5% oocytes (2‐h continuous treatment with 2 mm SNAP). The development of parthenogenetic embryos increased after repeated short‐term treatment with SNAP. After continuous treatment with 2 mm SNAP for 10 h, only 6.7% of the oocytes cleaved, and none developed beyond the 4‐cell stage. Thirty‐minute treatment repeated four times with 2 mm SNAP induced cleavage in 37.5% of the oocytes, 18.3% developed to the morula stage, and 6.7% reached the blastocyst stage. Based on the results, it is concluded that pulsatile treatment can significantly improve parthenogenetic activation rate when compared with the continuous treatment using nitric oxide donors. 相似文献
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家蚕染色体工程及其应用研究——Ⅲ.家蚕雄核发育的诱导 总被引：2，自引：0，他引：2
采用适当剂量的丫-射线辐照羽化前2—3日的雌蛹,羽化后与未辐照雄蛾(具有隐性标志基因)进行单杂交或多品种雄蛾混精杂交,产下卵经一定温度热处理,获得并饲养近两万头雄核发育蚕,并将部分雄核发育蚕继代成功。所有雄核发育蚕都为雄性,且只表现父本性状,不表现母本性状。因而推测可能是卵核经Y-射线照射后失活,而进入卵内的精子经一定高温刺激后互相融合发育的结果。调查了经辐射处理后的杂交后代在不同条件热处理以及不同蚕品种在同样条件热处理下的雄核发育情况,证明产下卵须经一定高温处理,两个入卵精子才能融合而发育。 相似文献
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L R Soma L Laster F Oppenlander V Barr-Alderfer 《American journal of veterinary research》1985,46(4):763-768
In 3 groups of horses with exercise-induced pulmonary hemorrhage (EIPH), comparisons of racing times and finishing positions were made between the 5 races before the horses were given furosemide and 5 races after furosemide administration. The horses were grouped according to 3 methods used to diagnose EIPH: group 1, observation of hemorrhage at the nostrils within 1 hour after a workout or race; group 2, observation of pulmonary hemorrhage only by endoscopic examination after a race or workout; and group 3, observation of hemorrhage at the nostrils during a race or immediately after a race. Group 4 horses were randomly selected horses running during the study period and were not given furosemide. The statistical method was analysis of covariance and the dependent variable was horses' time per distance. The study compared the 4 groups of horses, using the estimated value of the horses (less than or equal to +10,000 or greater than +10,000), and the horses' interaction in races 1 through 5 before and races 6 through 10 after furosemide treatment. The horses' times were adjusted by the relevant covariates, distance, track variant, and winning time per distance. Significant changes in horses' time per distance were not noticed when comparing values from races 1 through 5 with those in races 6 through 10 in group 1 horses.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS) 相似文献
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为探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)的添加浓度及脱卵丘细胞时间对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响.试验通过在体外成熟液中添加不同浓度(0、10、15、20、30、40 ng/mL)的EGF来研究其对培养44 h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响;在培养开始后的不同时间(18、24、38、44 h)进行脱卵丘细胞处理来研究不同时间脱卵丘处理对培养44 h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响.结果表明,成熟培养基中添加10 ng/mL EGF能显著提高卵母细胞的卵裂率和囊胚率(P <0.05).共培组和独培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞成熟率均低于44 h,但差异不显著(P >0.05);共培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞的卵裂率和囊胚率显著高于培养44 h(P <0.05);独培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞的卵裂率与44 h无显著差异(P >0.05),但囊胚率显著高于培养44 h后脱卵丘细胞(P <0.05).添加10 ng/mL EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育较好;卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞可提高孤雌胚胎早期发育能力. 相似文献
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曲古抑菌素A（Trichostatin A,TSA）是一种组蛋白去乙酰化抑制剂,用TSA处理鼠核移植胚胎可显著提高胚胎的囊胚率。检验TSA对猪卵母细胞体外成熟以及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟液及胚胎培养液中添加TSA,比较不同浓度TSA对卵母细胞成熟的影响,不同浓度TSA对孤雌胚胎发育能力的影响以及TSA处理不同时间对孤雌胚胎发育能力的影响。结果发现：（1）5nmol／LTSA处理对卵母细胞体外核成熟无显著影响,却显著提高了卵母细胞孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率（P〈0．05）;（2）50nmol／LTSA处理显著提高了孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率（P〈0．05）;（3）50nmol／LTSA处理24h能显著提高胚胎的卵裂率及囊胚率（P〈0．05,82．1％±2．6％和37．4％±3．1％）。结果表明TSA对猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎发育具有显著的促进作用。5nmol／L的添加量对卵母细胞的体外胞质成熟具有促进作用;胚胎培养基中添加50nmol／LTSA处理24h能提高孤雌胚胎的发育能力。 相似文献