对甜菜夜蛾高毒力苏云金杆菌的分离及生物测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

金大勇  柳镛万 《延边大学农学学报》2010,32(4):238-242

从山野和田间土壤样品中分离得到苏云金杆菌62株.经镜检发现,这些菌株的伴孢晶体多数呈菱形(79.0%).初步的生物测定结果表明,62株菌株中对小菜蛾、斜纹夜蛾和甜菜夜蛾的致死率超过90%以上的菌株分别有44株、8株和6株.其中CAB109、CAB110、CAB116和CAB162这4株菌株对上述3种害虫都表现出高活性.将其稀释成1.0×107cfu/mL后进一步生物测定的结果,CAB109菌株对甜菜夜蛾的毒性最高,死亡率达100%,比已经商品化的NT0423农药高15%.血清型鉴定发现,CAB109菌株的血清型为H7,属aizawai亚种,而其余3种血清型全部为H3abc,属kurstaki亚种.对害虫的毒性和血清型都表明,CAB109菌株是防治甜菜夜蛾非常有潜力的优良菌株.  相似文献   

甜菜夜蛾核型多角体病毒对芦笋园甜菜夜蛾的田间防效     

章金明  刘敏  陈永全  林文彩  潘秋波  李建群  吕要斌 《浙江农业科学》2019,60(6):940-941

以芦笋园甜菜夜蛾幼虫为对象,开展甜菜夜蛾核型多角体病毒田间杀虫活性、持效性以及与氯虫苯甲酰胺的协同增效作用试验。结果表明,15亿PIB·mL^-1甜菜夜蛾核型多角体病毒水剂对甜菜夜蛾幼虫具有优良的杀虫活性,1 800 mL·hm^-2处理药后5 d防效达94.5%,药后10 d防效依然有75.7%,持效性较好。甜菜夜蛾核型多角体病毒与氯虫苯甲酰胺混合使用药后3和5 d的防效显著高于甜菜夜蛾核型多角体病毒或氯虫苯甲酰胺单用的防效,显著提高了速效性和综合防效。15亿PIB·mL^-1甜菜夜蛾核型多角体病毒水剂是一种新型生物农药,无毒无残留,对人畜及其他生物安全,可在生产上推广应用。  相似文献   

高毒力苏云金杆菌YN1-1的蛋白质特性及田间防效     

李真  金大勇 《农业科学与技术》2017,18(5)

[目的]为了调查对鳞翅目害虫具有高毒力苏云金杆菌YN1-1菌株的生物学特性.[方法]分析YN1-1菌株晶体蛋白的SDS-PAGE电泳图谱,调查YN1-1菌株对几种鳞翅目害虫的室内药效及田间防效.[结果]YN1-1菌株的伴孢晶体具菱形结构;其原毒素蛋白分子量为136 kDa,经胰蛋白酶处理后水解为63 kDa的活性毒素蛋白.室内药效试验结果,用YN1-1菌株处理小菜蛾与菜青虫时,其药效比商品苏云金杆菌(WP)更好;在田间防效上,YN1-1菌株的虫口减退率也比商品苏云金杆菌(WP)更高.[结论] YN1-1菌株具有优良的开发潜力.  相似文献   

高毒力苏云金杆菌YN1-1的蛋白质特性及田间防效（英文）     

《农业科学与技术》2017,(5)

[目的]为了调查对鳞翅目害虫具有高毒力苏云金杆菌YN1-1菌株的生物学特性。[方法]分析YN1-1菌株晶体蛋白的SDS-PAGE电泳图谱,调查YN1-1菌株对几种鳞翅目害虫的室内药效及田间防效。[结果]YN1-1菌株的伴孢晶体具菱形结构;其原毒素蛋白分子量为136 kDa,经胰蛋白酶处理后水解为63 kDa的活性毒素蛋白。室内药效试验结果,用YN1-1菌株处理小菜蛾与菜青虫时,其药效比商品苏云金杆菌(WP)更好;在田间防效上,YN1-1菌株的虫口减退率也比商品苏云金杆菌(WP)更高。[结论]YN1-1菌株具有优良的开发潜力。  相似文献   

5种杀虫剂对甜菜夜蛾的室内毒力与田间应用效果评价     

岑彩霞  肖彤斌  岳建军  秦双  吉训聪 《广东农业科学》2012,39(13):110-111,113

通过室内毒力测定和田间药效试验,测定当前5种杀虫剂对甜菜夜蛾的防治效果。结果表明,10%溴虫腈EC对甜菜夜蛾具有优良的防效,药后7 d防效为92.11%,可作为防治甜菜夜蛾的首选药剂;2.5%多杀菌素SC的效果次之,防效为85.49%;2%阿维菌素EC、4.5%高效氯氰菊酯EC和48%乐斯本EC防效稍差,在生产上应慎用。  相似文献   

10%多杀霉素.甲维盐WG防治甘蓝甜菜夜蛾药效试验     

《农家参谋》2017,(14)

10%多杀霉素·甲维盐WG对甘蓝甜菜夜蛾具有较好的防治效果,在一般发生年份,10%多杀霉素·甲维盐WG防治甘蓝甜菜夜蛾,应掌握在甘蓝甜菜夜蛾卵孵高峰期用药,其有效地推荐使用剂量为9g.a.i./ha。甘蓝甜菜夜蛾卵孵高峰期用药一次,防效达90%以上,持效期达7天以上,防效和对照药剂5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐WDG接近。且对作物环境安全性较好。  相似文献   

0.2%高渗甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂防治甘蓝甜菜夜蛾田间药效试验     

陈贤清  蒋志强  张仕友  龚群辉 《湖南农业科学》2006,(5):77-78

对0.2％高渗甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂防治甘蓝甜菜夜蛾进行了田间药效试验。结果表明：0．2％高渗甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂40ml／667m^2的剂量,对甘蓝甜菜夜蛾具有良好的防效,药后7d杀虫效果达97％以上。  相似文献   

毒死蜱·高氯混剂对不同蔬菜甜菜夜蛾的控制作用研究     

龙丽萍  唐文伟凌炎 《勤云标准版测试》2005,(9)

田间小区试验结果表明,20%毒死蜱·高氯乳油对豇豆和白菜地的甜菜夜蛾均有较好的防治效果。在豇豆地甜菜夜蛾卵孵化期施药,1000￣600倍液,药后3d的防效最高,达74.06%￣91.84%,药后7d的防效已下降;在白菜地甜菜夜蛾低龄高峰期施药,药后3d的防效最高,为67.58%￣92.97%。该产品对斜纹夜蛾和菜青虫均有较好的兼治作用,同时对豇豆和白菜安全,可以作为防治甜菜夜蛾的有效药剂推广使用,推荐使用浓度为600￣800倍。  相似文献   

甲氨阿维·虫酰肼混剂对不同蔬菜甜菜夜蛾的控制作用研究     

龙丽萍  蔡健和  唐文伟  凌炎  覃建林 《勤云标准版测试》2005,(8)

田间小区试验结果表明,5.1%甲氨阿维·虫酰肼可湿性粉剂对番茄和白菜地的甜菜夜蛾均有较好的防治效果。在番茄地甜菜夜蛾卵孵化期施药,850~2000倍液,药后3d的防效最高,达74.92%~94.96%,药后7d已有新的幼虫孵化,防效开始下降;在白菜地甜菜夜蛾不同虫龄混发期施药,药后5d的防效最高,为83.85%~95.52%。对菜青虫有很好的兼治作用,而且对番茄和白菜安全。可以作为防治甜菜夜蛾的有效药剂推广使用,推荐使用浓度为850~1200倍。  相似文献   

甲氨阿维.高氯混剂对甜菜夜蛾的控制作用研究     

龙丽萍  蔡健和  唐文伟  凌炎 《勤云标准版测试》2005,(11)

田间小区试验结果表明,2％甲氨阿维．高氯乳油在甜菜夜蛾卵孵化高峰期施药,对白菜地的甜菜夜蛾有较好的防治效果。1200-800倍液,药后1d的防效为66．72％-86．26％,药后3d的防效为65．43％-88．43％,药后7d已有新的幼虫孵化,防效开始下降。该药剂对斜纹夜蛾亦有较好的兼治作用,而且对白菜安全,可以作为防治甜菜夜蛾的有效药剂推广使用,推荐使用浓度为800-1000倍液。  相似文献   

一株对蚊子幼虫高效的Bt新菌株的特性研究     

郭丽伟  苏俊平  宋萍  张冬冬  王勤英 《河北农业大学学报》2011,34(5):69-72,77

苏云金芽胞杆菌WFS-97菌株是从土壤中筛选出的对蚊子幼虫具有特异杀虫活性的新菌株,本研究通过对该菌株的形态特征、培养特性及杀虫基因型的研究,了解其作为杀蚊制剂的开发应用潜力.在光学显微镜下,观察该菌株产生球形伴胞晶体,SDS-PAGE检测显示主要表达27 kDa主要蛋白条带,此外,还有131、79、43和31 kDa...  相似文献   

苏云金芽胞杆菌cry2Ac4基因在 大肠杆菌中的表达     

黄天培  陈文  潘洁茹  黄志鹏  关雄 《勤云标准版测试》2008,(9)

在大肠杆菌中表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)cry2Ac4基因;笔者以含有BtWB9菌株cry2Ac4基因的质粒pMD2Ac为模板,利用cry2Ac4基因的特异引物对(ET-F/ET-R)扩增获得该基因,进而将cry2Ac4基因与pET-29a原核表达载体连接;成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌JM109,从阳性转化子中提取重组表达质粒pET-29a-cry2Ac4,再转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPFG诱导后,对诱导表达产物进行了SDS-PAGE检测;cry2Ac4基因编码的约70kDa蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达.  相似文献   

苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的检测与杀虫活性测定   总被引：5，自引：0，他引：5  

郝会海  朱美秋  宋萍  陆秀君  杜克久 《河北农业大学学报》2006,29(6):72-75

为获取高活性的野生Bt菌株,对从土壤中分离的99株Bt菌株进行了营养期杀虫蛋白的分子鉴定和生物活性测定。根据已知的vip3 A基因序列设计1对特异性引物,进行PCR鉴定,55株扩增得到1.2 kb的目的片段。对31株阳性菌株的营养期杀虫蛋白活性进行了初步测定,结果显示,Bt LS1和LS8菌株毒力最高,2菌株对2龄甜菜夜蛾的体重抑制率分别为91.14%和93.59%。选取Bt LS1和LS8菌株进行胞内外营养期蛋白杀虫活性测定,发现Bt LS1和LS8菌株对初孵甜菜夜蛾体重抑制率分别为45.1%和43.2%,对初孵棉铃虫的校正死亡率分别为(22.1±1.4)%和(55.3±3.7)%,对2龄棉铃虫的体重抑制率分别为(78.7±6.6)%和(50.4±2.4)%。  相似文献   

甜菜夜蛾围食膜几丁质结合蛋白SeCBP66在不同体系中的表达     

刘彬  李瑞军  郭巍  孙伟明  赵丹  单鸣  徐大庆 《河北农业大学学报》2012,(4):80-84

分析甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)围食膜几丁质结合蛋白SeCBP66氨基酸序列,利用PCR技术扩增获得缺失信号肽编码区围食膜几丁质结合蛋白的基因△(s)-secbp66。将△(s)-secbp66克隆到表达载体pET28a和pPIC9K,分别转化大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115进行原核及真核表达;将△(s)-secbp66克隆到质粒pFastBacTM,转化大肠杆菌DH10Bac构建重组Bacmid,转染昆虫细胞系Sf9及BTI-TN-5B1-4(HighFive)从而在昆虫细胞系中进行表达。结果表明:SeCBP66在原核细胞中未见表达,在酵母细胞中表达产物呈弥散状,而在昆虫细胞系中则能稳定的表达116kDa的特异蛋白。  相似文献   

Cloning of Bt cry Genes by Rapid Screening of DNA Libraries with PCR-RFLP     

CHEN Zhong-yi  WU Xian  ZHANG Jie  SONG Fu-ping  GUAN Yu  HUANG Da-fang 《中国农业科学(英文版)》2003,2(2)

Bacillus thuringiensis (Bt) strain C002 contains crylAa, cry2Ab, cry1Ca insecticidal crystal genes and an unkown gene cryX, among which crylCa is located in a 6 -9 kb EcoR Ⅰ fragment of the chromosomal DNA. The total DNA and the plasmids DNA libraries of C002 were constructed in Bt-E. coli shuttle plasmid pHT315 by inserting 6 - 9 kb chromosomal and plasmid DNA fragments prepared respectively with EcoR Ⅰ complete and Sau3A Ⅰ partial digestion. On the basis of every 50 transformants pooled together from 5 - 10 tubes, the pools containing about 2 000 transformants from the plasmids DNA library and 400 transformants from the total DNA library were rapidly screened by PCR-RFLP. Clones containing crylAa, cryX, crylCa, and cry2Ab were isolated and named as pHT-1Aa, pHT-X, pHT-1Ca and pHT-2Ab respectively. Restriction analysis indicated that pHT-1Aa, pHT-1Ca and pHT-2Ab had the typical physical map of the homologous cry genes. Furthermore, each plasmid was transferred into Bt acrystalliferous strain cryB- by eletroporation. SDS-PAGE result showed that transformant of pHT-1Ca expressed 130 kDa protein and bioassay result proved its high toxicity against Spodotera exigua 1st instar larvae with 100% corrected motality.  相似文献   

苏云金芽孢杆菌新菌株GGD-4杀虫晶体蛋白基因分析     

刘旭光  张广杰  郑霞 《勤云标准版测试》2005,(10)

利用稀释平板培养法从连云港地区的土壤中分离了一株苏云金芽孢杆菌新菌株GGD-4,通过PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE方法分析了此菌株中cry基因类型和表达蛋白。结果表明:该菌株中含有cry1Aa基因型,同时表达130~140kD的蛋白;但EcoRⅠ和PstⅠ酶切结果不同于正常的cry1Aa基因,实验中利用生物信息学方法设计的cry1Aa基因特异引物对扩增后也证明含有cry1Aa基因。室内生测结果显示,该菌株对重要的农业害虫甜菜夜蛾、菜青虫等均有较高的杀虫毒力。  相似文献   

Differentiation Between Bacillus thuringiensis and Bacillus cereus by 16S rDNA-PCR and ERIC-PCR   总被引：1，自引：0，他引：1  

LI Haitao  LIU Dongming  GAO Jiguo 《东北农业大学学报(英文版)》2011,18(3):12-15

16S rDNA and ERIC （Enterobacteia Repetitive Intergenic Consensus Sequences） based on PCR method were tested for the effectiveness of the differentiation of B. thuringiensis and B. cereus. 16S rDNA-PCR primers were designed based on the sequence difference in variable regions of B. cereus 16S rDNA and B. thuringiensis 16S rDNA, 16S rDNA-PCR showed no obvious difference between B. cereus and B. thuringiensis. The only difference was that one 1600-bp amplificon could be obtained from all the three B. Cereus strains, and none amplificon from any B. thuringiensis strains. ERIC was optimized based on previous reports. The genonlic DNA was used for the template of ER1C-PCR, and the following DNA fingerprints were analyzed by the agarose gel electrophoresis. The results showed that DNA fingerprint of three B. thuringiensis strains had a unique amplicon less than 100-bp, while DNA fingerprint of three B. cereus＂ strains had none. Moreover, DNA fingerprint of B. cereus showed a 700-bp amplicon, but didn＇t have any DNA fingerprints ofB. thuringiensis genome. Therefore, ERIC-PCR technique should be able to be used for the differentiation of B. thuringiensis and B. cereus.  相似文献   

苏云金芽孢杆菌cry1Ac15基因的克隆及原核表达     

许禔森 《安徽农业科学》2008,36(14):5788-5789

[目的]为了分析苏云金芽孢杆菌cry1Ac15基因序列。[方法]以全长基因PCR产物的黏端定向克隆的方法,设计1对特异引物,分别引入SalⅠ和BamHⅠ酶切位点。以Ly30质粒DNA为模板扩增cry1Ac全长基因,与表达载体pUCM-T相应的酶切产物连接,转化大肠杆菌,获得含有cry1Ac基因的重组质粒pUCLy1Ac。[结果]cry1Ac基因编码区为3 564 bp,编码蛋白分子量为134 kD,含1 184个氨基酸,与cry1Ac3同源性最高,该基因经诱导获得高效表达,SDS-PAGE电泳检测到明显的134 kD蛋白带。[结论]诱导表达的cry1Ac蛋白对棉铃虫、甜菜夜蛾等鳞翅目害虫幼虫均有较高的杀虫活性。  相似文献