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《中国畜牧兽医文摘》2012,(11)
为摸清不同种禽红细胞对禽流感血清抗体检测结果的影响,本试验通过对经20%鸡红细胞吸附处理后和不进行任何处理的鸡、鸭和鹅的禽流感阳性血清,分别用1%的鸡红细胞、鸭红细胞和鹅红细胞进行血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)。结果发现,用鸡红细胞检测水禽血清会出现非特异性的凝集,经20%鸡红细胞吸附处理后能去除水禽血清中部分的非特异性凝集因子,而选用相应的禽红细胞进行禽流感抗体检测则不存在非特异性的影响。因此,进行禽流感血清抗体检测时应选用各自对应的禽红细胞。 相似文献
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为探讨不同种家禽红细胞对禽流感血清抗体效价的影响,对鸭、鹅的禽流感免疫血清分别经不同方法处理后,做了一系列对比试验。结果发现,受体破坏酶(RDE)可以完全去除水禽血清中的非特异性凝集抑制因子,但RDE处理血清的成本较高,在临床中不易广泛使用。用5%或20%鸡红细胞吸附处理,可减少水禽血清中非特异性凝集因子对检测的影响,但吸附不完全,且耗时。因此,做HI试验时最好用同种禽类的红细胞来检测血清的禽流感抗体效价,即鸭禽流感血清用鸭红细胞悬液,鹅禽流感血清用鹅红细胞悬液,这样几乎可完全排除非特异性凝集和非特异性凝集抑制因子对水禽禽流感抗体检测的影响。如果没有鸭、鹅的红细胞也可以使用鸡红细胞代替检测鸭、鹅血清,但鸭、鹅血清必须进行试验前的处理。 相似文献
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禽流感微量红细胞凝集抑制试验(HI检测),因为其微量、快速、可靠,能够处理大量样品,并能在短时间内报告禽类血样的禽流感抗体滴度水平,因此成为出入境检验检疫部门基层实验室常用的方法。禽流感HI检测结果准确与否,对于出入境检验检疫部门及时掌握禽群的禽流感抗体水平,提高对辖区内注册活禽养殖场的禽流感疫病的监控,保证供港澳活禽顺利出口至关重要。笔者长期从事禽流感HI检测,积累了一些经验,与大家进行交流探讨:1不同效价工作抗原的影响由于禽流感微量红细胞凝集抑制试验的结果判定是以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI… 相似文献
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水禽禽流感HI抗体检测方法的探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
2003年国家质量监督检验检疫总局出台了<高致病性禽流感诊断技术>(GB/T18936-2003)[1],标准中要求采用鸡红细胞作为血凝与血凝抑制试验的指示细胞监测禽流感抗体,这对于免疫鸡血清中的相应抗体水平监测比较合理[2-4],但对鸭、鹅及其他免疫禽类进行HI抗体水平监测时,常出现非特异性凝集现象[2-3],对检测结果的判定影响较大.有鉴于此,本试验拟对禽流感疫苗免疫后的水禽血清HI抗体检测方法进行探讨,研究适合免疫水禽禽流感HI抗体检测的方法. 相似文献
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目前禽流感抗体水平监测采用GBT18936-2003的方法,此方法中要求采用1%鸡红细胞来进行血凝和血凝抑制试验,以测定禽流感的抗体水平,此方法较适用于免疫鸡相应抗体水平的测定[1-3],用于鹅抗体检测时常出现非特异凝集现象,试验结果很难判定。鉴于此,在利用血凝抑制试验进行血清抗体检测之前,有必要对血清中非特异性血凝抑制因子与非特异性凝集因子(非病毒性凝集因子)加以祛除。本试验对免疫后的鹅血清HI抗体检测方法进行探讨,寻求适合鹅血清HI抗体检测的方法。 相似文献
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血凝及血凝抑制试验方法可用于禽流感免疫监测,或通过前后抗体滴度变化用于疾病发生的推测性诊断。然而,在近年实验中发现相当多水禽血清样品用该方法进行禽流感免疫监测时出现非特异现象,导致无法得出实验结果。经查资料,禽血清中都有低的或无法检测到的非特异因子,特别是水禽血清对鸡红细胞可能产生非特异性的凝集。在本实验室中出现非特异现象的检验对象包括鸭、鹅、鹌鹑等。为了消除非特异现象,曾用各种方法处理血清,如56℃30m in灭活加上鸡红细胞吸附、胰酶处理、过碘酸钾处理,但效果均不佳,后来用公番鸭红细胞替代1%鸡红细胞,部分血清… 相似文献
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禽流感自1878年在意大利首次发生以来,该病不断蔓延。近年来,在许多国家和地区出现暴发和流行,成为严重危害养禽业健康发展的一种主要家禽传染病。加强禽流感的监测是预防和控制禽流感的重要措施。目前,基层单位大都采用微量红细胞血凝抑制试验(简称HI试验)来检测家禽禽流感血清抗体。但在检测过程中,笔者发现依照国标的要求采用鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象。本试验用鸭红细胞悬液替代鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清HI抗体,探讨是否能消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响,现报道如下。1… 相似文献
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不同家禽的红细胞悬液对禽流感病毒血凝抑制试验的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
目前,血凝抑制试验(HI)被广泛用于检测各种家禽的禽流感抗体及禽流感病毒的鉴定,而多数实验室都是用鸡红细胞悬液来进行该试验。为了探讨不同家禽红细胞悬液对不同家禽血清抗体HI试验中非特异性凝集作用的影响,我们进行了本试验,现总结如下:一、材料与方法1.试验材料(1)待检血清:采取进行过禽流感H5亚型灭活油乳剂疫苗免疫的鸡、鸭鹅、鸽血各10份,分离血清备用。(2)抗原:禽流感H5诊断抗原,哈尔滨兽医研究所生产〔哈研生药中试字(2000)8818号,批号:20021225〕。(3)红细胞悬液:采取不具有特异性禽流感H5抗体的鸡、鸭、鹅、鸽的血按农业部标… 相似文献
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豚鼠醛化红细胞的制备及其在新城疫和禽流感HA/HI试验中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
程劲松 《上海畜牧兽医通讯》2007,(1):26-27
目前,在新城疫(ND)和高致病性禽流感(HPAI)的疫情免疫监测中,血凝/血凝抑制试验(HA/HI)依然是基层畜牧兽医部分最主要的检测方法,β-微量法以其操作简便、迅速、易判定、能准确表达结果等优点被广泛应用。在HA/HI试验中,需要使用1%鸡新鲜红细胞作指示剂。但鸡新鲜红细胞存在着以下几个缺点:一是健康非免疫公鸡较难获得,尤其是不同鸡或同一羽鸡不同时期采的红细胞,用于实验可能存在较大的差异;二是新鲜鸡红细胞质脆易碎,保存期短,需临用时现采现配;三是新鲜鸡红细胞易吸附免疫球蛋白等物质,洗涤不彻底易影响实验结果。由此导致了血凝/… 相似文献
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为了提高禽流感HA-HI试验的准确性,笔者分析了可能影响禽流感HA和HI试验结果的9个因素:阿氏液和PBS液的配制、血凝板、待检血清、1%鸡红细胞悬液、冻融标准抗原和阳性血清、正确使用多道移液器、平行对照、抗原返滴和结果判定,以期为禽流感HA-HI试验研究提供参考。 相似文献
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鸭是禽流感传播链中的一个重要环节,能否有效防控鸭禽流感的关键之一是使用科学的检测方法.目前,是参照禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验标准(GB/T18936-2003)[1],但是,鸭体内含有非特异性抑制因子,血清中的唾液酸残基会模拟红细胞受体,同红细胞受体竞争与流感病毒血凝素的结合,因而会导致非特异性抑制结果(假阳性)的出现,用鸡红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象,出现前带和后带现象,有时能严重影响结果的判定.为此,本文采用不同种家禽的红细胞悬液做重复试验,探讨水禽血清的处理方法及不同种的家禽红细胞悬液对水禽禽流感血清抗体检测的影响, 在临床应用中,可为鸭禽流感免疫技术提供参考依据. 相似文献
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随着青海高原地区禽类及其产品市场流通日益频繁,鸡病发生及危害不断增加,为随时掌握鸡病疫情动态和观察鸡病免疫效果,全面防控疫病,我们从2000年至2004年对该地区鸡流行病进行了连续几年的血清学检测和分析。1方法与材料1.1方法:禽流感、鸡传染性法氏囊病、鸡白痢、用琼脂扩散免疫试验,检测血清中特异性抗体。鸡新城疫用血凝抑制试验,即微量血凝试验(HI),按常规微量法检测血清中HI抗体效价。禽白血病用酶联免疫吸附试验(ELISA)。1.2材料:禽流感、鸡白痢、鸡传染性法氏囊病琼脂扩散试剂,标准抗原、阳性血清、阴性血清由哈尔滨兽医研究所… 相似文献
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禽流感血凝抑制试验（HI试验）的原理是禽流感病毒在适宜的条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,利用这种特性检测血清中禽流感抗体的试验就叫禽流感血凝抑制试验。禽流感血凝抑制试验的方法是将受检血清与标定好的抗原发生充分反应,再加入红细胞作用,因为其快捷、成本较低、便于操作、能够处理大量的样品,所以成为基层动物疫病实验室对禽流感诊断及免疫状态监测的重要手段,但禽流感血凝抑制试验能否成功,影响因素很多,如果不加强质量控制,极易造成试验结果偏差,甚至误判,给禽流感的防止工作带来不便。笔者在长期的实验室检测中积累了一些经验,愿与大家分享探讨。
1试验器材的质量控制 相似文献
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使用U型微量滴定板、0.025ml定量滴管和稀释棒、PBS稀释液、白陶土处理被检血清、8单位或4单位抗原及0.4％鸡红细胞做HI试验诊断猪细小病毒病是比较适宜的条件。用此法对七种猪传染病抗血清进行检查,均不产生非特异性血清学反应。对同一份被检血清重复测定,HI价基本一致。用滤纸吸附被检猪血液(简称血纸)与分离血清做HI比较试验,两者的HI价无大差异。 相似文献
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制备50%的红细胞悬液,将H9N2禽流感病毒尿囊液(HA≤29)采用鸡红细胞吸附释放法进行纯化,然后分别将纯化的病毒液及弃去的上清进行血凝试验测定。结果表明,使用50%的鸡红细胞悬液基本能将病毒吸附完全,HA效价提高23倍。因此鸡红细胞吸附释放法是一种经济实用、操作简便,并有较高纯化效率的方法。 相似文献
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除鸡外,有多种禽类的血清中含有非特异性抑制物,它们能影响HI试验的特异性。除了血凝的非特异性抑制物以外,其他禽类的血清也能引起HI试验中使用的鸡红细胞凝集,可掩饰低水平的HI活性。以微量血凝抑制法检测鸡以外的家禽和野生禽鸟的禽流感免疫抗体,应对血清进行处理,除去其非特异性抑制物和血凝活性。 相似文献
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间接ELISA检测禽流感抗体方法的建立 总被引：2，自引：0，他引：2
应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的禽流感病毒 (AIV) ,经 triton X-1 0 0处理并反复冻融制备禽流感 EL ISA抗原。应用抗鸡 Ig轻链单抗 1 B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测禽流感抗体水平的 EL ISA方法。确立了将鸡血清 1 0 0倍稀释监测 EL ISA效价(ET)的回归方程 y=0 .77452 x 0 .8793 5(r=0 .9466) ,可用于定量测定。血凝抑制 (HI)抗体与 EL ISA方法的比较试验表明 ,EL ISA法比血凝抑制试验敏感 1 .5倍以上 相似文献