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相似文献
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1.
IBD试纸条对中强毒力苗毒及分离野毒的检测研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以琼扩为对照,应用IBD试纸条分别检测了人工感染鸡、疫苗接种鸡、自然发病鸡3种不同类型的法氏囊样品以及不同的疫苗。毒株测定结果显示,IBD苗毒228E、MB、V877、NF8、QC试纸条均为阳性,琼扩对照均为阴性,分离强毒H4、He3、Y2试纸条及琼扩对照均为阳性。法氏囊样品测定结果显示,自然感染病例,H4、He3、Y2感染鸡,228E、MB、V877、NF8接种鸡两种方法测定均为阳性,QC则为阴性。对法氏囊样品的检测结果证明,IBD试纸条具有特异、敏感、快速的特点,其敏感性高于琼扩的敏感性,为IBD诊断提供了新方法。  相似文献   

2.
随着 IBDV变异株的出现 ,发病鸡常不产生法氏囊的肉眼病变 ,由于传染性和非传染性因素亦可引起淋巴细胞减少和法氏囊坏死 ,所以 ,采取组织病理学方法诊断 IBDV感染并不完全可靠。由于主动性抗体应答需要一定的时间及大多数雏鸡都带有母源抗体 ,因此血清学早期诊断也不完全可靠。该试验采用本所研究的 IBD快速试纸与经典的琼扩试验 ,在对 IBDV的检测效果上进行了详细的比较 ,介绍如下。1 材料与方法1 .1  IBD快速检测试纸 由河南省农业科学院生物技术研究所制备提供。1 .2 试验鸡  1日龄试验鸡 30 0只由河南农业大学试验鸡场提…  相似文献   

3.
试纸探针条检测鸡传染性法氏囊病疫苗中病毒含量的试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
试纸探针条可识别市售的国产或进口鸡传染性法氏囊病(IBD)代表性疫苗毒株及其鸡胚培养毒或细胞培养或其接种鸡的囊毒,并可检出经甲醛灭活的IBD标准强毒、田野囊毒、鸡胚培养毒或细胞培养毒。活的或灭活待检疫苗水溶液中IBDV的含量越高,试纸探针条上阳性线显现越快、颜色越深且明显;在30分钟的结果观察时间内,该条可检出每0.1mL样品中800ELD50或10^7.0TCID50的病毒含量,该条检测灭活IBDV的效价是AGP测定效价的32倍以上,试纸探针条为估价疫苗中IBDV的含量或疫苗质量提供了一条简便、快速、经济的新途径。  相似文献   

4.
胶体金快速诊断方法对鸡减蛋综合征病毒的检测   总被引:3,自引:0,他引:3  
选择15nm的胶体金颗粒作为标记物,制备了鸡减蛋综合征病毒(EDSV)胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1.35μg/mL的纯化EDSV,用该试纸条检测135份临床样本,并与HA方法相比较,结果显示,二者的阳性符合率为89.8%。特异性试验结果显示,与鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)无交叉反应。表明,该试纸条用于检测EDSV具有快速、操作简便、特异性强等优点,可用于大批量抗原样本的检测。  相似文献   

5.
不同方法对鸡胚和法氏囊中囊病病毒抗原含量的检测比较   总被引:5,自引:1,他引:4  
用单抗介导的抗原捕获-酶联免疫吸附试验(AC-ELISA),琼脂扩散试验(ACP)快速诊断试纸条(ISK)对感染同株强毒或弱毒囊病病毒(IBDV)的鸡胚和鸡法氏囊中的病毒抗原效价进行了检测比较,结果表明,上述3种方法测得法氏囊中温毒IBDV抗原效价分别为10^6.0(AC-ELISA),2^-3.0(AGP)t 10^-3.0,测得鸡胚中强毒IBDV抗原效价依次为10^-1.0,0和0。强毒株接种鸡胚后,只有第1代鸡胚组织可被AC-ELISA测到低效价的IBDV抗原,而第2代以后则未能测到病毒抗原,弱毒疫苗株IBDV感染鸡后,法氏囊中可测到低效价抗原,但感染鸡胚后则无可测性病毒抗原。  相似文献   

6.
SPA直接平板协同凝集试验诊断鸡传染性法氏囊病   总被引:9,自引:0,他引:9  
自葡萄球菌病鸡分离到的 8株金黄色葡萄球菌中 ,筛选出 1株富含 SPA的菌株 ,在此基础上 ,建立了诊断鸡传染性法氏囊病 (IBD)的 SPA直接平板协同凝集试验。经特异性检验、敏感性试验及临床应用表明 ,该法具有敏感性高、特异性强、重复性好等优点 ,与琼脂扩散试验及对流免疫电泳试验比较 ,3者间无明显差异 ,且操作方法简便、快速 ,节省材料 ,是一种 IBD早期病原诊断及流行病学调查的新技术。  相似文献   

7.
诊断鉴别鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)对该病的临床诊治具有重要意义。从IBDV弱毒疫苗中提取病毒RNA,采用二步RT-PCR方法,建立诊断和鉴别IBDV毒株性质的分子诊断方法。结果表明:针对IBDV VP2基因高变区的基础RT-PCR引物和巢式RT-PCR引物,分别能够扩增出目标大小的特异性片段;区分IBDV超强毒株和经典毒株的RT-PCR扩增结果与预期目标一致。该方法可用于鸡传染性法氏囊病毒病的快速分子诊断及鉴别。  相似文献   

8.
用免疫胶体金试纸膜快速检测IBDV的研究   总被引:9,自引:1,他引:8  
用免疫胶体金试纸膜分别检测了GX8/99株超强毒传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)不同传代毒、全国部分省市IBDV地方野毒、鸡胚传代毒、细胞传代毒、临床病料及其他病原材料,试验研究结果表明免疫胶体金试纸膜法与琼脂扩散试验(ACP)相比,具有特异、敏感、快速、简单等特点,不需要特殊的专业技能和其他试剂,能够识别不同的IBDV毒株,包括强毒和弱毒。为IBDV开辟了一条新的、快速的检测途径。  相似文献   

9.
为建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)对雏鸡的最佳感染模型,采用点眼滴鼻、肌肉注射、擦肛和泄殖腔内灌注等不同方法,对SPF鸡和普通鸡进行了攻毒致病试验。结果表明,以泄殖腔内灌注方法攻毒,可使雏鸡发生传染性法氏囊病(IBD)速度快,病死率高,临床症状和病理变化典型。该试验结果为制备鸡传染性法氏囊病感染模型,提供了精确、简单的技术支持。  相似文献   

10.
对100日龄的发病鸡,经临床诊断后,取法氏囊用IBDV抗原检测卡试剂盒进行检测,同时将法氏囊剪碎、研磨,进行RT-PCR试验。结果显示,IBDV抗原检测卡结果是阳性,获得序列的VP2基因高变区序列分析结果与IBDV的E-DEL毒株的同源性为94.9%,说明青年鸡感染了传染性法氏囊病(IBD)。  相似文献   

11.
A rapid diagnostic strip for chicken infectious bursal disease (IBD) was developed based on membrane chromatography using high-affinity monoclonal antibodies directed to chicken infectious bursal disease virus (IBDV). The diagnostic strip has high specificity for detection of chicken IBDV antigen and recognizes a variety of the virus isolates, including virulent and attenuated strains, with no cross-reactivity to other viruses, such as Newcastle disease virus, Marek's disease virus, infectious bronchitis virus, infectious laryngotracheitis virus, and egg-drop-syndrome virus. The results showed that its specificity was highly consistent with the agar-gel precipitation test (AGP). The diagnostic strip detected as low as 800 median egg lethal dose (ELD50) viruses in the IBDV BC6/85-infected sample, which was comparable with AC-ELISA (400 ELD50) and 32 times more sensitive than the AGP test (2.56 x 10(4) ELD50). In experimental infection, IBDV was detected in the bursa as early as 36 hr postinfection with the diagnostic strip before the clinical signs and gross lesions appeared. It takes only 1-2 min to do a strip test to detect chicken IBDV antigen after the specimen is grounded in a whirl pack with finger massage.  相似文献   

12.
应用双抗体夹心法ELISA检测IBDV的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
从抗IBDV高免蛋黄液中提取IgG,用作包被抗体和酶标记,建立了检测IBDV的双抗体夹心法ELISA。经抗原阻断,无关病毒对照、取代、验证等项试验,并与常规AGP法比较,对来源不同的100多个样品进行检测,结果表明:该法对患鸡腔上囊、脾脏的检出率均为100%,比AGP法敏感100倍以上,用肉眼观察阳性与阴性之间颜色差异显著,不存在非特异性反应。试验证明该法具有满意的待异性、敏感性、快速性和稳定性,是IBD早期病原学诊断和流行病学调查的有效手段。  相似文献   

13.
鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒引起的一种急性传染病。本研究从江苏某疑似发生传染性法氏囊病的鸡场采集病料,通过观察临床症状、病理变化、RT-PCR检测、基因测序、SPF鸡胚接种、琼脂扩散试验和雏鸡攻毒等试验,证实了该鸡群发生了传染性法氏囊病,且分离到一株传染性法氏囊病病毒(JSXY株),该病毒有较强的致病力,VP4基因比较分析发现其与变异株亲缘关系最近,序列同源性为95%。本研究为江苏地区传染性法氏囊病的防治提供了有益的参考。  相似文献   

14.
通过人工接种试验对滨白、海赛克斯、依莎、罗曼和AA各品种鸡对传染性法氏囊病病毒的敏感性进行了研究,结果表明,各品种试验鸡均表现传染性法氏囊病的临床症状和病理变化;法氏囊指数、胸腺指数和脾脏指数在各品种鸡间虽有差异,但无统计学明显差异;病理组织学上,法氏囊损伤程度各蛋鸡品种较AA肉鸡损伤明显(P<0.05),胸腺损伤程度各品种间无明显差异。  相似文献   

15.
The appearance of very virulent strains of infectious bursal disease (IBD) virus at the end of the 1980s made it necessary to develop more effective immunization procedures. To facilitate this, the immunogenicity and the immunosuppressive effect of a mild (G-87), an intermediate (LIBD) and an intermediate-plus (IBDV 2512) IBDV strain were tested after the in ovo inoculation of 18-day-old SPF and broiler chicken embryos. It was established that no noteworthy difference existed between the immunized and the control embryos in hatching rate and hatching weight. The higher the virulence of the vaccine virus strain, the more severe damage it caused to the lymphocytes of the bursa of Fabricius. In SPF chickens, the haemagglutination inhibition (HI) titres induced by a Newcastle disease (ND) vaccine administered at day old decreased in inverse ratio to the virulence of the IBD vaccine strain, while in broiler chickens this was not observed. Despite the decrease of the HI titre, the level of protection did not decline, or did so only after the use of the 'hot' strain. SPF chickens immunized in ovo with a complex vaccine prepared from strain IBDV 2512 and IBD antibody showed the same protection against Newcastle disease as the broilers. In broiler chicken embryos immunized in ovo, only strain IBDV 2512 induced antibody production, and such chickens were protected against IBD at 3 weeks of age. The complex vaccine administered in ovo has been used successfully at farm hatcheries as well.  相似文献   

16.
以纯化的禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)核蛋白作为捕捉抗原,金标兔抗鸡抗体作为金标二抗,建立检测禽流感血清抗体的胶体金免疫层析试纸条(immunochromatographic strip, ICS)。对标准阳性血清不同滴度进行检测,ICS试验的敏感性高于琼脂扩散试验(AGP)。特异性试验证实,禽流感的ICS试验与新城疫(ND)、传染性支气管炎(IBV)、鸡传染性法氏囊病(IBD)及减蛋综合症(EDS-76)均无交叉反应。同时,用ICS试验和HI试验检测105份鸡血清,两者具有较好的符合性。结果认为:禽流感ICS具有快速简便、特异、灵敏等优点。  相似文献   

17.
鸡传染性法氏囊病单抗快速诊断试剂盒的研制及初步应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
以感染传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)的鸡法氏囊组织制备免疫抗原 ,免疫 BALB/c系小鼠 ,取其脾细胞与 NS0浆细胞进行细胞融合 ;以 AC-ELISA筛选阳性细胞克隆 ,经 3次有限稀释克隆化及鉴定 ,获得 2株识别 IBDV不同抗原决定簇的高亲和力单克隆抗体株。以该 2株单克隆抗体制备快速诊断试剂 ,组装了鸡传染性法氏囊病快速诊断试剂盒。该试剂盒由若干 4 0孔酶标板 ,1号酶标液 ( HRP标记 IBDV单抗 )、2号洗涤液、3号显色液 ( TMD显色底物 )、4号显色液 (供氢体 )等反应液 ,0 .0 1 mol/L PBS( p H7.2 )阴性对照、IBDV阳性对照 (提取的 IBDV蛋白 )组成 ,并对试剂盒特异性、敏感性、重复性及稳定性等进行了鉴定。应用该快速诊断试剂盒对来源于不同地区的临床诊断疑似 IBD的法氏囊病料各 2 0份进行了检测 ,并与琼扩试验、常规ELISA检测结果作了比较 ,结果表明 ,该快速诊断试剂盒的检测结果与常规 ELISA的检测结果相似 ,操作程序简便 ,可在 1 0~ 1 5min内完成 ,适合于兽医临床推广应用  相似文献   

18.
采用RT-PCR技术从滨州分离株中扩增出传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP4基因,将VP4基因插入到pGEX-4T-1载体上构建pGEX-4T-1-VP4,诱导表达并用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)亲和层析柱纯化得到纯化的重组VP4蛋白。以兔抗鸡IgG为胶体金标记物,以重组IBDV VP4蛋白和羊抗兔IgG为硝酸纤维素膜检测线和质控线的包被物,制备一种能检测IBDV VP4蛋白抗体的胶体金试纸条。结果表明,该试纸条检测IBDV强毒(IBDV BC6/85)免疫的血清检测线显红色,为阳性反应;检测IBDV弱毒(IBDV NB)免疫的血清、新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)标准阳性血清、禽流感H5和H9标准阳性血清、传染性支气管炎标准阳性血清及0.85%生理盐水检测线不显红色,为阴性反应。该试纸条与建立的ELISA方法相比,敏感度低2个滴度;检测320份临床血清,试纸条与ELISA的符合率达99.38%。提示,该试纸条使用方便、操作简单,10 min内可以用肉眼判断结果,可为区分IBDV的强弱毒提供参考数据,具有较大的应用价值。  相似文献   

19.
The prevalence of infectious bursal disease virus (IBDV) was studied in chickens, which had not been vaccinated against IBD. Fifty sera and forty-six bursae of Fabricius from chickens showing impaired growth, collected from 7 IBD vaccination-free farms in Japan were used for virus neutralization (VN) tests and RT-PCR for detection of IBDV genome corresponding to the VP2 hypervariable region. Of the fifty sera, 39 sera (78%) from 6 farms were VN antibodies positive. Of the forty-six bursae, 37 bursae (80.4%) from 6 farms were positive in the RT-PCR assay. The sequences of all the RT-PCR products detected in this study were closely related or identical to those of the vaccine strains. These results show that vaccine-like IBDV is prevalent even in IBD vaccine-free chicken farms in Japan.  相似文献   

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