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从1985年以来,世界各国先后应用不同外源基因导入虹鳟鱼、鲤鱼、鲶鱼等有经济价值的养殖鱼类。但受精卵发育到何时注基因源射外获得高的成活率(孵化率)和整合率一直是研究人员所关心的问题。法国的Chourout等在1986年就做了虹鳟鱼受精卵不同发育时期注射外源基因与孵化率关系实验。美国的Thoms.T.then等人也做了鲤鱼等受精卵在不同发育时期注射外源基因对其成活率、整合率影响的研究。由于外源基因对受体鱼的整合机理比较复杂,不仅这方面的研究不多,而且各实验室之间的研究结果也很不一致,因此至今对某种鱼类的受精印发育到何时是注射外源基因的最佳时期还没有形成一致的意见。本研究以鲤鱼受精卵为材料,通过显微注射技术,在受精卵的不同发育时期把鲤鱼MT启动因子基因,大麻哈鱼CH基因的融合基因导入受精卵中,按孵出的鱼苗数分别计算成活率,再通过斑点杂交和Southern Blot杂交检查整合情况,计算整合率,以探索外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期。 相似文献
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外源基因导入鲤受精卵最佳时期的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
本研究以鲤鱼受精卵为材料，通过显微注射技术，在受精卵的不同发育时期把鲤鱼ＭＴ启动子基因和大麻哈鱼ＧＨ基因导入受精卵中，按孵出的鱼苗数分别计算成活率，再通过斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ杂交检测整合情况，计算整合率，孵化率最高的为单细胞中期（９０．８３％），整合率最高的为单细胞后期和囊胚期（４０％）。综合研究结果外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期应选在单细胞后期。 相似文献
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用显微注射技术导入外源DNA对鲤鱼和虹鳟鱼受精卵孵化率的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
本报道了利用显微注射技术导入外源基因分别对鲤鱼和虹鳟鱼授精卵孵化率影响的研究。从1993年－1996年4年中，我们用显微注射方法，将全鱼生长激素基因导入虹鳟鱼授精卵（包括囊胚期卵）5，676粒，孵出鱼苗364尾，孵化率为6.4%(4年平均，虹鳟鱼正常孵化率为80％）；而用这种方法，将全鱼生长激素基因导入鲤鱼授精卵12，196粒，孵出鱼苗4，290，孵化率为34．0％（4年平均，鲤鱼正常孵化率为70％左右）。实验结果：显微注射技术在虹鳟鱼和鲤鱼两种受精卵上的效果明显不同，斑点杂交和SouthernBlot杂交结果相近。 相似文献
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约10000余尾注射牛和羊生长激素基因的鲤鱼已被生产出来，并从中筛选出生长速度快且整合了外源基因的个体143尾，也证明外源基因可传递给子代同时子代也具有快速生长的特征。建立了把外源基因直接注入受精卵的方法，确定了注入外源基因的最佳时期。 相似文献
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牛生长激素基因向“缩骨鲫”受精卵转移的初步研究 总被引：4，自引：0，他引：4
用显微注射方法,将带有小鼠重金属结合蛋白基因启动子的牛生长激素基因导入“缩骨鲫”受精卵。分析了外源基因在受体胚胎发育过程中的行为及在仔鱼体内的整合。初步结果显示了外源基因对受体的加速生长效应。 相似文献
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通过体外重组，将绿色荧光蛋白基因编码序列克隆到鲤鱼肌动蛋白基因启动子下游，构建成能在鱼体内表达绿色荧光蛋白的重组分子。用限制性内切酶PvuI酶切线性化后，通过显微注射法导入金鱼受精卵内，在转化后48h，可观察到绿色荧光，经PCR初步筛选后，对显阳性个体进行Southern杂交检测，结果表明，转化个体表现出较强的杂交信号。这说明绿色荧光蛋白基因能在金鱼体内整合、表达。 相似文献
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外源DNA对鲮鱼脑乙酰胆碱酯酶活力的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本文分析和比较了对照鲮鱼和在受精卵时期显微注射了鲤鱼总ＤＮＡ的鲮鱼以及鲤鱼在不同温度下的脑乙酰胆碱酯酶活力，发现实验鲮鱼的酶活力介于对照鲮鱼和鲤鱼之间，也即外源ＤＮＡ对鲮鱼的脑乙酰胆碱酯酶活力有一定的影响。对外源ＤＮＡ的作用本文作了进一步的讨论。 相似文献