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在利用农杆菌介导法进行亚麻抗除草剂草丁膦(Basta)目的基因(Bar)导入工作中;对选择培养基内加入500mg/l克拉维酸钾(timentin进口)+200mg/l头孢噻肟(claforan进口)的抗菌素来取代500mg/l头孢噻肟(Cefotaxime国产)不仅脱菌效果彻底,期效长,且不影响亚麻愈伤形成和芽的分化;同时对再生植株进行了盆栽Basta抗性筛选试验,获得不同抗性的植株和种子. 相似文献
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野生亚麻(Linum stelleroides Planch)是二年生植物,要通过有性繁殖留取种子的方式进行保存颇有难度。本项研究采用组织培养的方法对野生亚麻的茎段进行无性扩繁获得成功,一年内从2株无菌苗入手培养最终获得再生植株600多株,繁殖倍数达300倍,而且移栽成活的再生植株已开花结实。同时进行了低温保存不定芽的研究,结果显示,4℃条件下保存3个月对野生亚麻茎段分化率有一定的促进作用,初步确定MS(附加6-BA0.5mg/l,NAA0.05mg/l)培养基为茎段分化的适宜培养基,1/2MS(附加一定量的激素)培养基为不定芽保存培养基。 相似文献
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野生亚麻(Linum stelleroides Planch)是二年生植物,要通过有性繁殖留取种子的方式进行保存颇有难度.本项研究采用组织培养的方法对野生亚麻的茎段进行无性扩繁获得成功,一年内从2株无菌苗入手培养最终获得再生植株600多株,繁殖倍数达300倍,而且移栽成活的再生植株已开花结实.同时进行了低温保存不定芽的研究,结果显示,4℃条件下保存3个月对野生亚麻茎段分化率有一定的促进作用,初步确定MS(附加6-BA 0.5mg/l,NAA 0.05mg/l)培养基为茎段分化的适宜培养基,1/2MS(附加一定量的激素)培养基为不定芽保存培养基. 相似文献
4.
亚麻转基因植株的再生及生根培养的研究 总被引：17，自引：0，他引：17
本试验以亚麻幼苗的下胚轴为外植体,利用抗除草剂Basta的目的基因和GUS-INT基因,采用农杆菌介导法进行了亚麻转基因过程中植株再生及生根适宜培养基的筛选试验。经试验得出;在附加少量BA和NAA的Ms培养基上愈伤组织的再分化率可达31.8%-40.2%。经GUS基因检测在脱菌后3天亚麻下胚轴初步形成的愈伤组织的转化率可达72.2%;四周后的转化率为25%;再生植株的转化率为20%,在1/2Ms培养基中附加0.001mg/LNAA可使再生植株的生根率达到87.4%。通过试验初步建立起了根瘤农杆菌介导法亚麻转基因系统。 相似文献
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本试验以亚麻幼苗的下胚轴为外植体,利用抗除草剂Basta的目的基因和G USINT基因,采用农杆菌介导法进行了亚麻转基因过程中植株再生及生根适宜培养基的筛选试验.经试验得出:在附加少量BA和NAA的Ms培养基上愈伤组织的再分化率可达31.8%～40 .2%.经GUS基因检测在脱菌后3天亚麻下胚轴初步形成的愈伤组织的转化率可达72.2%;四周后的转化率为25%;再生植株的转化率为20%.在1/2Ms培养基中附加0.001mg/L NAA 可使再生植株的生根率达到87.4%.通过试验初步建立起了根瘤农杆菌介导法亚麻转基因系统. 相似文献
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亚麻转基因植株的再生及生根培养的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验以亚麻幼苗的下胚轴为外植体 ,利用抗除草剂 Basta的目的基因和 GUSINT基因 ,采用农杆菌介导法进行了亚麻转基因过程中植株再生及生根适宜培养基的筛选试验。经试验得出 :在附加少量 BA和 NAA的 Ms培养基上愈伤组织的再分化率可达31.8%～ 40 .2 %。经 GUS基因检测在脱菌后 3天亚麻下胚轴初步形成的愈伤组织的转化率可达 72 .2 %;四周后的转化率为 2 5 %;再生植株的转化率为 2 0 %。在 1/2 Ms培养基中附加 0 .0 0 1mg/L NAA可使再生植株的生根率达到 87.4%。通过试验初步建立起了根瘤农杆菌介导法亚麻转基因系统。 相似文献
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基因枪法转化籼稻有关因素的评价 总被引：10，自引：0，他引：10
利用基因枪轰击水稻未成熟胚及未成熟胚诱导来源的愈伤组织,对国内外16个籼稻品种进行了转化。设置不同的基因枪转化参数,并在培养基中添加各种植物激素、甘露醇以及2-N-吗啉-乙基磺酸(简称MES)来改善继代过程中籼稻愈伤组织的生长状态。基因枪转化的操作参数（包括金粉浓度和DNA含量、基因枪氦气压力、轰击受体的不同状态）对转化频率有重要影响;在继代培养基中添加MES（500 mg/L）作为缓冲剂,可以减少籼稻愈伤组织褐化现象的发生;在诱导和继代培养基中补加NAA(0.5 mg/L）,KT(0.2 mg/L)可改进愈伤组织质量,进而提高再生频率;在继代培养基中补加低浓度的 ABA(1 mg/L)和甘露醇（20 g/L）,能普遍改善愈伤组织生长状况,减少褐化现象的产生,得到较多结构致密的颗粒状抗性愈伤。获得了再生的转化植株,经检测表现出对Basta的抗性。 相似文献
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转抗除草剂基因小麦植株的筛选方法研究 总被引：2，自引：0，他引：2
为了降低小麦转bar基因时产生较高比例的假阳性植株,采用测定T0代转基因植株叶片释放NH4 浓度和对T1代植株喷施Basta除草剂等辅助筛选方法,建立了简便有效的转bar基因小麦筛选体系。研究结果表明,2叶期和5叶期叶片释放的NH4 浓度与bar基因PCR检测结果呈极显著相关,相关系数分别为0.86和0.75。对391株T0代再生植株进行叶片释放NH4 浓度测定,筛选到34株转基因植株,其中27株为bar基因的PCR检测所证实。用100 mg/L Basta除草剂对381株T0代植株的后代(3 800余株)进行喷施筛选,根据后代抗性分离筛选到13株T0代阳性植株,与PCR检测结果吻合度达到100%。这两种方法可用于以bar基因为选择标记基因的转基因植株的筛选。 相似文献
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亚麻种质对白粉病的抗性评价 总被引：1，自引：0，他引：1
对收集的53个亚麻种质进行了白粉病田间抗性评价,结果表明所调查的亚麻种质均无免疫(M)植株,仅西吉胡麻为抗(R)病品种,庆阳市抗白粉病亚麻资源材料较为匮乏. 相似文献
10.
不同基因型小麦对除草剂Basta敏感性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
为确定抗除草剂抟基因小麦研究中的筛选压，以4个小麦品种(系)的成熟种子为材料，设置5种除草剂Basta浓度进行抗性鉴定。结果表明，不同基因型小麦对Basta的敏感性差异明显。Basta对小麦发芽成苗无明显影响，对幼苗高度和根长度的影响差异极显著。随着Basta浓度的增加，小麦幼苗生长受到抑制，高度明显降低，黄化率显著增大。Basta浓度为9mg／L的处理适宜，播种后4～5d出现黄化苗，黄化率达60％～70％，且对小麦幼苗的生长影响相对较好。 相似文献
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为了培育高赖氨酸含量的小麦新材料,利用基因枪转化法将辣椒高赖氨酸蛋白Cflr基因导入到小麦品种扬麦16中,轰击了2 500枚小麦幼胚,获得抗除草剂Basta的再生植株176株(遗传转化采用的筛选标记基因为bar基因),经PCR鉴定Cflr基因阳性的转基因植株为23株.T1代幼苗喷洒130 mg·L-1的Basra溶液进行除草剂抗性鉴定,发现T1代幼苗的除草剂抗性出现了分离.PCR-Southern杂交进一步证明外源高赖氨酸蛋白基因Cflr基因已经整合到小麦的基因组中.通过种子赖氨酸含量和总蛋白质含量的测定,发现75.00％的转基因株系的赖氨酸含量高于受体扬麦16,77.78％的转基因株系的蛋白质含量高于受体扬麦16.本试验获得了一批赖氨酸含量提高的小麦转基因株系,这些高赖氨酸含量的转基因株系可进一步用于小麦高赖氨酸分子育种研究. 相似文献
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抗生素对巴西橡胶树花药愈伤组织生长与分化的影响 总被引：1，自引：1，他引：1
将巴西橡胶树花药胚性愈伤组织接种到添加不同浓度的羧苄青霉素、头孢霉素和特泯丁3种抑制农杆菌生长的抗生素培养基上,结果表明：除500mg/L特泯丁抑制胚性愈伤组织生长但促进体胚发生,其它抗生素均为促进愈伤组织生长但抑制体胚发生。潮霉素、卡那霉素和巴龙霉素3种筛选抗生素均抑制愈伤组织生长和体胚发生,三者抑制能力顺序为潮霉素〉卡那霉素〉巴龙霉素,但潮霉素完全抑制了体胚发生,而巴龙霉素则与对照相似即对体胚发生几乎没有抑制作用。故特泯丁可以作为农杆菌介导巴西橡胶树花药愈伤组织遗传转化的抑菌抗生素,500mg／L使用浓度效果较好,卡那霉素作为筛选抗生素,50mg／L使用浓度效果较好。 相似文献
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Plant regeneration from leaf tissues of four North Dakota genotypes of potato (Solanum tuberosum L.)
Y. D. Park D. H. Ronis A. A. Boe Z. M. Cheng 《American Journal of Potato Research》1995,72(6):329-338
An efficient plant regeneration system was developed fromin vitro leaf tissues of four North Dakota potato genotypes. The best medium for genotype ND860-2 was Murashige and Skoog medium with 20.0 μM IAA and 11.4 μM zeatin riboside. Two to three weeks of initial dark treatments had a significant effect in reducing the time for shoot regeneration and increasing the number of regenerated shoots. Four antibiotics commonly used inAgrobacterium- mediated transformation were tested for their effects on shoot regeneration. Shoot induction was completely inhibited by kanamycin at 15 mg/L and hygromycin at 4 mg/L or higher, but not by carbenicillin (except at 1000 mg/L) and cefotaxime. Hygromycin significantly stimulated shoot induction at 1 mg/L. 相似文献
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研究卡那霉素、潮霉素、头孢霉素和羧苄青霉素对剑麻愈伤组织生长、不定芽分化及生根的影响,并确定抑制农杆菌生长的头孢霉素、羧苄青霉素的质量浓度。结果表明：潮霉素明显抑制剑麻愈伤组织生长和不定芽分化,卡那霉素次之,头孢霉素和羧苄青霉素相对较小;4种抗生素均能抑制剑麻生根,其抑制效果依次为头孢霉素＞卡那霉素＞羧苄青霉素＞潮霉素。头孢霉素和羧苄青霉素的浓度大于200 mg/L时,农杆菌生长完全被抑制。在筛选剑麻转化体时,卡那霉素和潮霉素的使用浓度分别以100、50 mg/L为宜,羧苄青霉素和头孢霉素的使用浓度均为200 mg/L。 相似文献
15.
L. M. Kawchuk J. D. Holley D. R. Lynch R. M. Clear 《American Journal of Potato Research》1994,71(3):185-192
Resistance to both thiabendazole (TBZ) and thiophanate-methyl (TPM) was observed in Canadian isolates ofFusarium sambucinum andHelminthosporium solani recovered from diseased potato tubers. Resistance was not found in isolates ofFusarium avenaceum, Fusarium culmorum, Fusarium equiseti andFusarium solani. A high level of resistance to both TBZ (EC50 180 to ?500 mg/l) and TPM (EC50 ?500 mg/l) was observed forH. solani isolates, whereasF. sambucinum exhibited a relatively low level of resistance to TBZ (EC50 34 to 71 mg/l) and a high level of resistance to TPM (growth uninhibited by 2,500 mg/l). The incidence ofF. sambucinum resistant to the benzimidazoles was lower (60%) than that observed forH. solani (95%) 相似文献
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不同表面张力的杀虫单微乳剂药滴在水稻叶面的行为特性 总被引：20，自引：0，他引：20
研究了浓度为0、50、100、200、500和1000 mg/L的杀虫单微乳剂药液在水稻叶面上的表面张力特性及展布情况。结果表明50~1000 mg/L的杀虫单微乳剂药液的表面张力小于水稻叶的临界表面张力。将0.05 mL药液点滴在水稻叶上的瞬间,接触角均为135°左右,但随时间的推移而变小,最终,药液中表面活性剂达到临界胶束浓度的200、500和1000 mg/L的药滴在稻叶上完全展布。因表面张力大,稻叶上彼此靠近的0.05 mL水滴能聚合成大水珠,同样体积的杀虫单微乳剂500 mg/L的药滴,虽不能使它在点滴后立即展布,但能均匀地分布在水稻叶上。 相似文献
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基于农杆菌介导的合子胚转化方法是一种具有自主知识产权的转基因新方法。利用该方法转化玉米合子胚,可直接获得转化种子。以东北春玉米区玉米自交系8902、Pa91、丹340作为转化受体,通过合子转化法进行抗草丁膦除草剂基因Bar的转基因研究。在获得的3 560份材料中,通过对T_1代种子苗叶面喷施草丁膦除草剂Basta,共获得153株抗性植株,抗性频率为4.3%。PCR鉴定阳性植株为102株,转化频率为2.87%。对PCR检测出的阳性植株进行自交获得T_2代,对材料继续进行抗性筛选,对抗除草剂表型的分离比率进行抗性遗传分析。 相似文献
18.
抗生素对大豆未成熟子叶愈伤形成和体细胞胚胎发生的影响 总被引：5，自引：0，他引：5
用6个大豆品种进行了抗生素敏感性试验，结果表明：在培养基中加入50mg/L卡那毒素可显著地降低出愈率。大豆不同品种对卡那霉素的反应在出愈率上表现相似，而在体细胞胚胎发生率上存在差异，培养基中含有400mg/L头孢霉素时出愈率显著降低，而体细胞胚胎发生率因品种不同而不同，用农杆菌侵染大豆未成熟子叶后在含有头孢霉素的培养基中培养时，体细胞胚胎发生率大幅度下降，本试验初步确定了较适合于大豆未成熟子，叶抗性选择的卡那霉素浓度和头孢霉素的脱菌浓度。 相似文献