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肉制品中鸡源性成分重组酶介导等温扩增检测方法的建立及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
为了快速准确检测出肉制品中的鸡源性成分,本研究基于鸡线粒体细胞色素B基因(CytB),设计特异性引物和exo探针,建立了实时荧光重组酶介导等温扩增(RAA)方法,进行特异性、灵敏性和稳定性分析,并通过检测市售肉制品对所建立RAA方法的准确性和适用性进行分析。结果表明,该方法可以快速实现对高山鸡肉、乌鸡肉、芦花鸡肉、白羽鸡肉和野鸡肉基因组DNA的特异性扩增,而对猪肉、牛肉、羊肉等的DNA均没有扩增,可稳定检出的鸡源性成分最低质量分数为0.1%。在9份标识有鸡肉成分的市售样品中,7份检出鸡源性成分,有2份样品的鸡源性成分检测结果为阴性。本研究建立的实时荧光RAA方法操作简单,反应迅速,特异性强,灵敏度高,为肉制品中鸡源性成分的检测提供了技术保障。 相似文献
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本研究利用牛、羊、猪、鸡线粒体mtDNA中保守序列16s rRNA,设计一对动物的通用引物,检测了含有动物源性成分的样品,同时设计了针对牛、羊、猪、鸡mtDNA中的保守序列,选择4对特异性引物,扩增得到目的片段大小分别为271 bp、274 bp、212 bp和266 bp。利用通用引物,优化了PCR反应体系及其反应条件,建立了从未知样品中快速获取动物源性成分检测的PCR方法;利用牛、羊、猪、鸡特异性引物,建立了PCR方法快速鉴定牛、羊、猪、鸡这4种动物源性成分的方法。 相似文献
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饲料中牛、羊、猪、鸡源性成分的PCR检测方法及其应用 总被引：10，自引：1，他引：10
【目的】建立鉴定饲料中牛、羊、猪、鸡源性成分的PCR方法,进一步完善现有的动物源性饲料检测方法。【方法】根据牛、羊、猪、鸡、鱼以及马的mtDNA的16S rRNA基因序列选用了一对通用引物,初步检测出含有动物源性成分的样品;然后针对牛、羊、猪、鸡4种动物线粒体mtDNA中的保守序列,分别选用了4对特异性引物对检测出的样品进行PCR扩增,扩增的目的片段大小分别为271、274、149和266 bp。【结果】通过利用通用引物、优化PCR反应体系及其条件,建立了从未知样品中简便而快速的检测出是否含有动物源性成分的PCR方法;利用所选的针对不同动物的特异性引物,建立了鉴定牛、羊、猪、鸡这4种动物源性成分的方法,此方法最低检测限可达0.1%。【结论】建立的检测饲料中动物源性成分的方法操作简便,价格低廉,结果准确,可靠,可作为饲料中动物源性成分的鉴定方法之一。 相似文献
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为建立肉制品中牛、羊、猪、鸡动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用4对牛、羊、猪和鸡源特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组)对多重PCR反应条件进行优化,并确定该检测方法的检出限。结果表明:四重PCR方法最佳反应条件为牛、羊、猪、鸡源特异性引物浓度分别为0.16μmol∕L、0.40μmol∕L、0.16μmol∕L、0.16μmol∕L,退火温度58℃,退火时间45 s,循环次数40。在最佳反应条件下,所建立的牛、羊、猪和鸡4种动物源性成分四重PCR的g DNA检出限为25 pg。应用优化后的四重PCR方法对20份市售肉制品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性,结果与现行标准的检测结果一致,掺假率达45%。本试验为该4种动物源性成分的快速检测提供了技术支撑。 相似文献
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《吉林农业大学学报》2018,(6)
为建立基于样品DNA快速制备、PCR-LFB的羊源性成分检测技术,为动物源性成分的检测提供新思路。进行动物源性成分DNA快速提取,针对绵羊线粒体基因组序列设计基因特异性引物及探针进行PCR扩增,制备LFB对羊源性成分核酸扩增物进行检测。结果表明:样品DNA快速制备技术操作简单、耗时少;PCR-LFB对羊基因组DNA检测灵敏度为常规琼脂糖凝胶电泳的10倍,特异性为100%,对9种商业化羊肉样品均可检出。建立的羊源性成分PCR-LFB检测技术,具有简单、快速、准确的特点。 相似文献
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为了研发具有自主知识产权的猪源性成分检测的引物和探针,比对猪、牛、羊、马、鸡、鸭、兔、鹅等8种动物的线粒体基因组,筛选并设计猪特异性的引物和探针组合进行荧光定量PCR。研究结果表明,所研发的猪源性成分检测的引物和探针仅对猪相关DNA模板有典型扩增曲线,对其他动物来源的DNA模板无扩增,具有高度的猪源性特异性。灵敏度实验表明,利用此引物和探针的检测方法具有高度的灵敏度,可达1 pg级。肉制品中猪源性定量检测实验说明此方法具有较好的定量检测能力。此引物和探针组合适用于猪源性食品和农畜产品的检验检测。 相似文献
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【目的】建立一种快速、准确的肉中猪源性成分定量检测方法。【方法】首先从GenBank数据库中筛选猪特异性的微卫星DNA,根据微卫星DNA核酸序列设计引物,对常见10种动物基因组DNA进行PCR扩增,通过有无扩增产物判断筛选的微卫星DNA对猪源性成分的特异性。然后根据微卫星DNA核酸序列,设计特异性引物和探针,建立猪源性成分Real-time PCR检测方法,采用双标准曲线分别对猪源性成分和总动物源性成分进行定量,计算猪源性成分的百分含量。【结果】筛选到猪特异性微卫星DNA（Accession EF172428）,根据其序列设计的引物SEQ-sus2-F/R只能从猪基因组DNA中扩增出目的条带,其他动物的基因组均无目的条带扩增。建立的Real-time PCR检测方法灵敏度为0.02 ng/25 μL反应体系。该方法能够准确检测出混合DNA样品中猪源性成分和混合肉样品中猪源性成分,百分误差分别约为1.32%和1.06%—7.12%。【结论】本研究利用Real-time PCR技术建立的定量猪源性成分的检测方法可以用来检测猪源性成分在混合样品中的百分含量。 相似文献
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采用血凝抑制(HI)试验测定了3个品种的鸡、樱桃谷肉鸭和2个品种的鹅新城疫母源抗体。结果表明：各品系的新城疫母源抗体均呈下降趋势。快大型AA肉鸡、快羽黄鸡、樱桃谷肉鸭和快羽鹅在3～5日龄形成一个高峰后，呈先快后慢的下降趋势；慢羽黄鸡和慢羽鹅则呈完全下山峰状，基本呈先快后慢的下降趋势；快羽下降速度要比慢羽快。尽管供试禽母源抗体变化规律有相似之处，但同一禽种不同品系之间可能存在差异。 相似文献
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以畜禽养殖业为调查对象,主要调查、统计了肉鸡、蛋鸡、猪、羊以及其他小型家畜的存栏量,分析了滨州畜禽养殖业的特点,对畜禽养殖业污染物的排放量进行了测算,提出了污染防治对策. 相似文献
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家禽免疫抑制病的防治 总被引：2，自引：0，他引：2
家禽免疫抑制病可导致疫苗免疫失败、机体抗病力下降,从而引发多种病毒病及细菌的继发感染甚至死亡。防治免疫抑制性疾病,提高自身的免疫力成为防治家禽疾病的1条有效途径。鸡脾转移因子主要成分为低分子肽-核酸复合物,能有效增强机体免疫系统的发育,改善受损的免疫器官,提高机体的免疫力和抗病力。 相似文献
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对从长春地区某一肉鸡屠宰加工厂扦取的１５２个东鸡肉样品进行的单核细胞增生李斯特氏菌分析,对分离菌株用ＡＰＩ Ｌｉｓｔｅｒｉａ试剂盒及其他方法进行了鉴定。经检验,１５２个样品中有１６个样品（１０．５％）为单核细胞增生李斯特氏菌阳性,另有８７个（５７．２％）为Ｌ．ｉｎｏｃｕａ,Ｌ．ｗｅｌｓｃｈｉｍｅｒｉ和Ｌ．ｇｒａｙ阳性。为了比较ＯＸＡ和ＰＡＬＣＡＭ这２种选择培养基的单核细胞增生李斯特氏菌的分离效果, 相似文献
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《东北农业大学学报(英文版)》2016,(4):82-92
There has been a steady growth in demand for convenience and ready-cooked food has influenced the interest of poultry processors in developing value-added chicken products that meet consumers' demand/choice. A conjoint analysis was done in this study on the survey of 975 chicken consumers in the Niger Delta Region of Nigeria, between March and September, 2014 to valuate consumers, preferences and willingness to pay (WTP) for various chicken attributed parts, production method, processing method, storage method, the presence of flavor and cooking method. The estimates of consumers, WTP premium prices for various mixtures of value-added characteristics were ascertained. The consumers preferred chicken products refrigerated, from chicken produced under free-range management, chicken breast, chicken product that was addictive and flavor free, which could be oven-heated or pan heated. One half of the entire respondents were willing to pay about 25% more for value-added chicken product over the price for conventional products. On the whole, a premium for value-added chicken products was more likely to be paid for by young consumers, consumers who patronized farmers' markets and preferred free-range or organic chicken products. WTP by consumers was negatively affected by price of products. The poultry industry could utilize combined knowledge of consumers' WTP for value-added chicken product price as a guide of develop innovative value-added chicken products. 相似文献
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羚牛(Budorcas taxicolor)是国家一级重点保护动物,被世界自然保护联盟(International Union for Conservation of Nature, IUCN)列为易危物种,但其被盗猎的行为时有发生。为了在打击盗猎时能够提供快速准确的鉴定证据,基于实时荧光定量PCR技术,通过筛选特异的荧光定量PCR引物,以期准确区分羚牛与鸡、牛、羊、猪等家禽家畜的组织样品。结果表明,引物tk-p3和tk-p5在羚牛肌肉组织中的表达水平显著高于鸡、牛、羊、猪,表明其可以在mRNA水平有效区分羚牛与家禽家畜的肌肉组织。但鉴于组织中mRNA容易降解的特性,进一步在基因组DNA水平进行定量检测,结果表明,引物tk-p3和tk-p5同样在羚牛中的表达水平显著高于鸡、牛、羊、猪。因此,筛选到的两对特异性荧光定量PCR引物tk-p3和tk-p5可用于快速准确地鉴定羚牛组织,为打击羚牛盗猎行为提供有效的技术支撑。 相似文献