葛渣水解残渣为拜氏梭菌ART25吸附载体发酵生产丁醇的研究     

黄小倩  金婷婷  周智友  经玉洁  彭帅英  李汉广 《江西农业大学学报》2022,(3):706-713

【目的】探究固定化吸附环境对以葛渣水解液为原料进行丙酮丁醇发酵的影响。【方法】以经预处理的葛渣水解残渣为固定化吸附载体，研究不同载体添加量对以葛渣水解液为原料发酵生产丁醇的影响，同时从吸附环境下细胞活性、氧化还原电位及丁醇代谢途径关键酶活等角度探究添加固定化吸附载体（葛渣水解残渣）提高溶剂产量的内在机理。【结果】当载体添加量为10.0 g/L时，丁醇和总溶剂的产量最高，具体分别达到（9.92±0.05）g/L和（15.79±0.12）g/L，与对照组相比分别提高了13.29%和25.96%。在探究吸附环境影响丁醇合成的生理机制时发现，最佳吸附环境下的乙酸激酶、丁酸激酶、乙醇脱氢酶和丁醇脱氢酶的活性与对照组相比分别提高了33.90%、27.40%、14.53%和38.53%，表明吸附环境可提高丁醇代谢途径中关键酶酶活，从而提高溶剂产量。【结论】葛渣水解残渣可作为丁醇发酵过程固定化吸附载体，吸附环境可为细胞提供适宜生长环境及增强丁醇代谢途径中关键酶酶活，从而提高溶剂产量。  相似文献   

菜豆多胺氧化酶的分离提纯及催化性质研究     

王明祖  何生根  杨暹 《仲恺农业技术学院学报》2007,20(1):9-12

依次经粗提、丙酮沉淀和Sepharose Cl-4B柱层析等步骤对菜豆(Phaseolus vulgarisL.)多胺氧化酶进行了分离提纯.结果表明,纯化倍数为115.9,产率达43.90%.进一步分析该酶的部分催化性质表明,其最适底物为腐胺(Put),其次是尸胺(Cad);另外该酶对亚精胺(Spd)和精胺(Spm)也有一定的催化作用;该酶以Put和Cad为底物时的最适pH值均为7.0,以Spd和Spm为底物时的最适pH值为6.7.  相似文献   

银杏叶苯丙氨酸解氨酶分离纯化条件的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

刘卫红  王燕  杜何为  程水源 《湖北农学院学报》2004,24(3):196-198

对银杏(Ginkgobiloba)叶中苯丙氨酸解氨酶(PAL)的分离纯化条件进行了研究。离子交换条件优化的研究结果是最适洗脱缓冲液的pH8 9,最佳洗脱离子浓度(NaCl)为0 3mol·L-1。经过一系列的分离纯化,蛋白质得率为0 35%,酶的得率为1 17%,纯化倍数为3 32。  相似文献   

羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)典型酶学性质的研究     

张颖  梁海晶  马广鹏  姜昭  王志刚  南超  王溪  葛世杰 《东北农业大学学报》2013,(5):18-23

采用Ni-NTA亲和层析法对基因重组菌中的羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)进行分离纯化,并对该酶的典型酶学性质进行研究。纯化处理后,AtzB的纯度提高15倍,酶活回收率高达15.2%。酶学性质研究表明,AtzB的最适反应温度为40℃;最适反应pH为9.0。在最适反应条件下,AtzB对底物最大反应速率Vmax为3.17μmol.L-1.min-1,米氏常数Km为0.45 mmol.L-1。反应缓冲液中Cu(Ⅱ)对酶活力有相对较强的抑制作用(P<0.05),Zn(Ⅱ)对酶活力影响相对较小(P<0.05),而Co(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Ca(Ⅱ)和Ni(Ⅱ)则对酶活力基本没有影响。盐度对AtzB活力影响较大,当缓冲液中NaCl浓度达到1 mol.L-1时,AtzB完全失活。  相似文献   

多粘芽孢杆菌中2,3-丁二醇脱氢酶的克隆和表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

周荣华  饶犇  刘芳  陈伟  廖先清  胡蔻孜  杨自文 《湖北农业科学》2016,(16):4172-4175

将来自于多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)中的2,3-丁二醇脱氢酶基因pla C在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中进行了诱导表达,并对其酶学性质进行研究。结果表明,该基因的表达产物主要是生成内消旋型2,3-丁二醇,其氧化2,3-丁二醇的最适温度是50℃,最适pH为10,而还原乙偶姻的最适温度为60℃,最适pH为6。  相似文献   

薄荷幼叶蔗糖酶的分离纯化与部分性质     

郭小路  张万秋  阙瑞琦  邱慧  唐云明 《西南大学学报》2008,30(2)

经10 KD的膜超滤, DEAE-Sepharose离子交换柱层析, Sephacryl S-200凝胶过滤纯化, 从薄荷(Mentha haplocalyx Briq)幼叶中分离纯化出电泳纯的转化酶, 该酶提纯倍数为186.3倍, 比活力为67.06 U/mg. 酶学性质和动力学性质研究表明: 该酶不可逆催化蔗糖生成果糖和葡萄糖, 最适pH值为5.0, 最适温度为55 ℃, 米氏常数Km值为12.25 mmol/L.  相似文献   

羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)典型酶学性质的研究     

张颖  梁海晶  马广鹏  姜昭  王志刚  南超  王溪  葛世杰 《东北农业大学学报》2013,44(5)

采用Ni-NTA亲和层析法对基因重组菌中的羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)进行分离纯化,并对该酶的典型酶学性质进行研究.纯化处理后,AtzB的纯度提高15倍,酶活回收率高达15.2％.酶学性质研究表明,AtzB的最适反应温度为40℃;最适反应pH为9.0.在最适反应条件下,AtzB对底物最大反应速率Vmax为3.17μmol·L-1·min-1,米氏常数Km为0.45 mmol·L-1.反应缓冲液中Cu(Ⅱ)对酶活力有相对较强的抑制作用(P＜0.05),Zn(Ⅱ)对酶活力影响相对较小(P＜0.05),而Co(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Ca(Ⅱ)和Ni(Ⅱ)则对酶活力基本没有影响.盐度对AtzB活力影响较大,当缓冲液中NaCl浓度达到1 mol·L-1时,AtzB完全失活.  相似文献   

莲藕过氧化物酶的分离纯化及性质研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

阙瑞琦  张丽丽  郭小路  唐云明 《西南大学学报》2007,29(12)

经40%～85%硫酸铵分级沉淀、 DEAE-Sepharose离子交换层析、 Sephacryl S-200凝胶过滤层析纯化, 得到莲藕过氧化物酶(POD)电泳纯制品. 该酶纯化倍数为39.77 倍, 回收率为11.76%. 酶学性质和动力学性质研究表明, 该酶最适pH为5.0; 最适温度为35 ℃; 以不同浓度的过氧化氢与莲藕POD在25 ℃、 pH5的条件下反应, 测得其Km值为9 mmol/L. CuSO4和ZnSO4对莲藕POD活性有激活作用; BaCl2、 MgCl2及SDS对其活性影响不大; Na2SO4、 Li2SO4、 KCl和NaCl对POD活性有一定的抑制作用; MnSO4和FeSO4对POD活性有较强的抑制作用; ASA能完全抑制POD的活性.  相似文献   

枯草芽孢杆菌WHNB 02植酸酶的酶学性质研究     

胡勇  王红宁  吴琦  邹立扣  于新芬  赵海霞 《西南大学学报》2005,27(6)

从118份样品中分离到1株产植酸酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WHNB 02),其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为31.5倍,回收率为13.0%.该酶为单体酶,SDS-PAGE测得的分子量约为43 KD,以植酸钠为底物的Km值为0.5 mmol/L,酶反应的最适温度为60℃,80℃作用10 min酶活保存61%,最适pH为7.0,在pH 6.0～10.0范围内稳定,酶活性及稳定性都需Ca2+存在.ED-TA,Mn2+,Ba2+(5 mmol/L)对酶活具有很大的抑制作用.  相似文献   

黑曲霉单宁酶提纯及其性质的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

王征  谢达平  谭周进  李立恒  刘如石 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2001,27(1):60-62

为探明单宁酶应用于生产的条件 ,从黑曲霉发酵液中分离提纯了单宁酶 ,经过 (NH4) 2 SO4分步沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和 Sephadex G- 15 0凝胶层析等 3步纯化 ,得到电泳纯的单宁酶 .用 SDS- PAGE法测得该酶有 2种亚基 ,相对分子质量分别为 7.5 9× 10 4,6 .0 3× 10 4.该酶为糖蛋白 ,蛋白质含量为 72 .5 % ,糖含量为12 .3% .该酶的最适 p H为 5 ,最适温度为 40℃ .  相似文献