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1.
为了评价抗爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)的特异性Ig Y的功能性蛋粉在黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)"红头病"预防及治疗中的应用效果,采用灭活的爱德华氏菌(菌种保藏号:CCTCCNO:M2012024)免疫蛋鸡,通过微包膜及高速离心喷雾干燥技术制备抗爱德华氏菌的特异性Ig Y的功能性蛋粉,采用泼洒和口服两种方式检测该功能性蛋粉对黄颡鱼的免疫保护率。结果显示,所制备的功能性蛋粉抗体效价达到1∶5120;以剂量为2 mg/L功能性蛋粉连续泼洒水体3 d或以饲料重量0.2%的剂量口服14 d后,再用浓度为2.0×107CFU/m L的致病性爱德华氏菌对健康黄颡鱼进行攻毒,泼洒和口服功能性蛋粉对黄颡鱼的免疫保护率分别为85.5%和70.0%;对人工感染爱德华氏菌后患病的黄颡鱼养殖水体连续泼洒5 d或投喂14 d功能性蛋粉,其对黄颡鱼的免疫保护率分别为67.2%和40.7%,表明制备的功能性蛋粉对黄颡鱼"红头病"有很好的预防和治疗效果。 相似文献
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养殖澳洲宝石鱼迟缓爱德华氏菌的分离鉴定及致病基因的检测 总被引：3，自引：1，他引：2
从患病澳洲宝石鱼体内分离到一株致病菌(编号Et4),对该菌的生化特性及致病基因进行检测,并进行了药敏和人工感染实验。结果显示:菌株Et4的生化鉴定结果与迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)标准菌株(AY77513)一致;其16S rRNA序列,经同源性比对与迟缓爱德华氏菌核苷酸相似度最高,达99%;根据迟缓爱德华氏菌的致病基因Ⅲ型分泌系统装置蛋白esaV基因序列设计引物,进行PCR扩增,得到708 bp序列,该序列与迟缓爱德华氏菌的esaV基因序列相似性达99.3%,说明菌株Et4具有esaV基因。菌株Et4对环丙沙星等较敏感,对其它药物中度或不敏感,具有较强的致病力(LD50=3.74×104CFU/mL),从病鱼中可以重新分离出此菌。综合形态学、生化特性、16S rDNA序列及致病基因序列鉴定其为迟缓爱德华氏菌。 相似文献
3.
采用鳗鲡源嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)外膜蛋白基因二联表达产物免疫日本鳗鲡(Anguilla japonica),检测其对日本鳗鲡免疫功能的影响及其攻毒免疫保护力。将150尾日本鳗鲡平均分为PBS、细菌免疫和外膜蛋白免疫3个组,3组鳗鲡分别以PBS(0.01 mol/L,p H7.4)、嗜水气单胞菌与迟缓爱德华氏菌二联灭活苗(5.0×108 CFU/m L)、嗜水气单胞菌与迟缓爱德华氏菌外膜蛋白二联表达产物(500μg/m L)腹腔注射0.2 m L。于免疫后14、21和28 d麻醉鳗鲡采血并分离抗凝血。测定3个时间点鳗鲡血浆中特异性抗体效价和同时期鳗鲡血浆、体表黏液、肝和肾组织匀浆液中的溶菌酶含量,同时检测3个时间点鳗鲡全血细胞的转化水平。免疫后28 d,嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌分别腹腔注射感染3组鳗鲡并测定其相对免疫保护率。结果表明,免疫后14 d和28 d,灭活菌和外膜蛋白免疫组的抗体水平均极显著高于PBS组(P0.01)。溶菌酶检测结果表明,不同处理组不同时间段血清、黏液和肝肾组织悬液的溶菌酶含量存在显著(P0.05)或极显著(P0.01)差异。免疫后14 d灭活菌组全血细胞转化水平显著高于PBS和外膜蛋白组(P0.05),而21 d两个免疫组则均显著低于PBS组(P0.05)。活菌感染结果表明,灭活菌和外膜蛋白免疫后28 d对两株病原菌的攻毒相对免疫保护率均比PBS组提高了50%(P0.05)。本研究结果表明鳗鲡源嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌外膜蛋白二联表达产物免疫日本鳗鲡后可提高鳗鲡的免疫功能及其对这两株菌的抵抗力,从而可能应用于鳗鲡基因工程疫苗的研发。 相似文献
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黄颡鱼鲇爱德华氏菌的分离鉴定及其致病性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从患头顶溃疡症的黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)内脏组织中分离出致病力强的菌株JZ086,对该菌进行了形态学、生理生化特性的测定,并进行了Biolog全自动微生物分析系统及16S rDNA序列鉴定。结果显示:人工感染实验证实该菌为黄颡鱼的病原菌,其半数致死量(LD50)为1.7×105CFU。Biolog全自动微生物分析系统鉴定结果显示该菌为鲇爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)。16S rDNA序列分析显示该菌与鲇爱德华氏菌的亲缘关系最近,同源性高达99%;系统进化树中与鲇爱德华氏菌(AB050826)自然聚为一支,二者遗传距离约为0.002。鉴定结果确认JZ086为鲇爱德华氏菌。药物敏感性试验结果显示,该菌对所测试的15种药物都敏感,其中对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、妥布霉素等尤其敏感。 相似文献
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2017年4月,浙江台州某海水养殖公司跑道式养殖池黑棘鲷大量发病,病鱼活力下降、食欲减退、体表溃疡,剖检可见肝脏、脾脏、肾脏肿大且有不同程度的白色结节,同时伴随大量腹水。用胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)从典型结节病濒死黑棘鲷器官分离到革兰阴性短杆菌。分离病原菌AS15对健康黑棘鲷的致病力结果显示,AS15腹腔注射可使健康黑棘鲷发病死亡,死亡黑棘鲷可出现自然发病症状,在(24±1)°C的条件下,(25±2) g黑棘鲷的半数致死浓度(LD_(50))为6.5×10~4 CFU/尾。经API 20E鉴定,分离菌株AS15生理生化特性与类杀鱼爱德华氏菌LADL05-105和迟缓爱德华氏菌典型菌ATCC15947相似度为86.2%,与杀鱼爱德华氏菌ET~T883的相似度为82.8%;AS15的16S rDNA与杀鱼爱德华氏菌ET~T883同源性达99%,gyrB与类杀鱼爱德华氏菌LADL05-105和杀鱼爱德华氏菌ETT883同源性分别为100%和98%;16S rDNA进化树显示,AS15与ETT883、LADL05-105聚为一簇,gyrB进化树与LADL05-105、NCIM2056聚为一簇;采用4种爱德华氏菌属种特异性引物对AS15进行PCR分析,结果显示,AS15可扩增出类杀鱼爱德华氏菌的种特异性片段,不能扩增出迟缓爱德华氏菌、鲇鱼爱德华氏菌、杀鱼爱德华氏菌的种特异性片段,表明AS15属类杀鱼爱德华氏菌成员。分析了AS15的菌毛基因、sodB等毒力基因,发现AS15具有fimA、fimB、fimC、fimD等4种菌毛基因和sodB、citC、esrB、mukF、katB等毒力基因。本实验首次从黑棘鲷上检出致病性类杀鱼爱德华氏菌,该菌对黑棘鲷的发病机制和毒力机理还需进一步研究。 相似文献
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养殖大菱鲆病原菌迟缓爱德华氏菌的分离鉴定及其疫苗研制 总被引：1，自引：0，他引：1
2006年9月山东胶南某养殖场大菱鲆(Scophthalmus maximus)发生病害,从患病大菱鲆脾脏分离出优势菌株WY28,人工感染试验证实WY28菌株对大菱鲆和斑马鱼(Danio rerio)有较强的致病性,其对大菱鲆和斑马鱼的半数致死剂量(LD50)分别为39cfu/g(Bw)(3.3×102cfu/ind)和2.1×104cfu/g(Bw)(6.4×103cfu/ind).综合该菌在形态与生理生化特征及16S rDNA同源性等方面的实验结果,确定WY28菌株为迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda).该菌对先锋霉素V、庆大霉素、氟哌酸、痢特灵等抗生素敏感.WY28菌株经福尔马林灭活制成灭活疫苗,对大菱鲆进行腹腔注射免疫,免疫后第4周测得免疫鱼血清中抗迟缓爱德华氏菌的抗体效价平均为1:1 280.免疫后第6周.免疫鱼血清中抗迟缓爱德华氏菌的抗体效价达到更高水平(平均值为1:3 289.6).攻毒试验表明,受免鱼的相对存活率明显高于对照组.由此可见,利用从病鱼体内分离的迟缓爱德华氏菌菌株制备的灭活疫苗能使大菱鲆较有效抵御迟缓爱德华氏菌强毒株的攻击. 相似文献
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2012年8月,福清市东瀚海区网箱养殖真鲷发生大量死亡事件.病鱼除刺激隐核虫病症状外,还出现脾、肾肿大,肝脏充血等.采用生理生化指标鉴定及16S rDNA系列同源性分析和系统发育树构建等方法,对从病鱼肝脏分离获得的优势菌株进行了鉴定,其生理生化指标符合迟钝爱德华氏菌特点,GenBank中同源序列比对结果显示,该菌与迟钝爱德华氏菌的16S rDNA序列同源性高达99％,系统进化树中与迟钝爱德华氏菌自然聚为一支.药敏实验结果表明,该菌对氟苯尼考等10种药物敏感,对链霉素等4种药物中等敏感. 相似文献
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罗氏沼虾气单胞菌MrM0602株的分离和致病性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从濒死的罗氏沼虾体内分离到菌株M rM0602,经形态学观察及API 20E鉴定系统鉴定为嗜水气单胞菌。人工感染健康罗氏沼虾,100%致死剂量为1.0×104cfu/m l,半致死剂量(LD50)为3.16×103cfu/m l。测定菌株M rM0602的胞外产物对小鼠和新西兰大白兔红细胞的溶血活性,表明胞外产物对小鼠红细胞有微弱的溶血活性,对新西兰兔红细胞无溶血活性。胞外蛋白酶活力测定显示,菌株M rM0602胞外产物具有很高的蛋白酶活力,且耐热性很强,65℃仍保持较高活性。常规药物敏感性试验表明,菌株M rM0602对环丙沙星和恩诺沙星高度敏感。 相似文献
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对患病中华鳖(Trionyn sinensis)进行病原分离、鉴定及药敏实验。从患病中华鳖肝、肾、脾及腹水分离纯化病原菌,经理化特性测定及16S rRNA序列分析对其进行鉴定,开展人工感染试验,并利用K-B进行药敏特性分析。结果显示分离菌株HD01为本次引发中华鳖病害的病原菌,其对中华鳖的LD50为4.48×106CFU/g。HD01株理化特性与粘质沙雷氏菌一致,16S rRNA序列与粘质沙雷氏菌同源性为99%,综合判定分离菌株为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)。HD01株对氟苯尼考、多西环素、庆大霉素及苯唑西林等14种抗生素高度敏感;对青霉素、头孢拉定、新霉素等7种抗生素耐药。分离菌株HD01是中华鳖病原菌,养殖时可选用氟苯尼考、庆大霉素及多西环素等药物进行防控。 相似文献
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从中华鳖病病鳖的肝脏分离得到菌株ｓ－１。用菌株Ｓ－１进行人工感染，１００％的鳖患病，从感染的病鳖的肝脏分离到菌株ｓ’－１，经生理生化反应测定，它与菌株ｓ－１特性一致。经鉴定，菌株ｓ－１是迟钝爱德华氏菌，野生型。爱德华氏菌感染会引起鳖的脏器发生变质性病变。主要症状呈肝脏型，肝局部坏死，有结节状肉芽肿。 相似文献
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采用Diff-Quik染色法对中华鳖的血涂片进行染色,用DP-71显微成像系统采集血片细胞显微图像,经Image-proExpress5.1测量和分析中华鳖各类血细胞大小、比例。结果表明：①Diff-Quik染色后中华鳖各类血细胞核质染色差别明显,核质界面明显,各类白细胞的颗粒明显、易分辨。②中华鳖红细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞大小分别为17.86μm×12.43μm、16.26μm×13.67μm、12.28μm×10.98μm、14.63μm×12.83μm。嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞占白细胞百分比分别为54.7、13.72、6.22和24.72,嗜碱性粒细胞仅为0.65。③比较Diff-Quik法、Giemsa法、Wright-Giemsa法对染色效果的影响,3种染色方法在细胞大小及白细胞分类比例上无明显差异。从核质界面、细胞颗粒特征性染色等来看,Diff-Quik法和Giemsa法优于Wright-Giemsa法。Diff-Quik法染色快捷、核质和颗粒染色清晰度更高,是一种适合大量标本快速染色的染色法,可适用于中华鳖的血细胞染色。 相似文献
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从亲鳖的选育、雌雄的配比、温度、湿度及水化因子进行人工控制,对鳖进行规模人工繁殖试验,获得每只雌鳖产卵45只以上,受精率90%以上,孵化率87%以上,稚鳖成活率99%以上的结果. 相似文献
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In-Seok Park Sung Hwoan Cho Jun Wook Hur Gyeng-Cheol Choi Sung-Yong Oh Dong Soo Kim Jae-Seong Lee 《Fisheries Science》2006,72(1):115-118
ABSTRACT: Attempts were made to understand how the different sizes (mean body weight of 4.1 ± 0.8 g for small and 182.6 ± 23.7 g for large) of the soft-shelled turtle Pelodiscus sinensis are affected by different temperature (25°C or 30°C), and different concentrations (700, 1000 and 1300 p.p.m.) of anesthetic lidocaine hydrochloride–sodium bicarbonate. The soft-shelled turtles were fed to satiation once daily. Three-way anova design (size × temperature × concentration of lidocaine hydrochloride) with duplicate was used. Twenty each of large and small soft-shelled turtles were distributed into six 30-L tanks. Exposure time of the soft-shelled turtle was affected by all factors (temperature, concentration and size). Exposure time of the soft-shelled turtle for anesthetizing decreased with increase in temperature and in concentration of lidocaine hydrochloride, and decrease in size. Recovery time for the soft-shelled turtle was also affected by all factors. Recovery time of the soft-shelled turtle increased with increase in temperature, concentration of lidocaine hydrochloride, and size. According to these results, lidocaine hydrochloride (1000 p.p.m.)–sodium bicarbonate seemed an effective anesthetic for sedating and handling the soft-shelled turtle. However, when an anesthetic is recommended for wide use, especially on commercially important edible organisms, the time organism takes to metabolize and excrete anesthetic chemicals from its body to a safe level must be given to allow fitness for human consumption. 相似文献
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Juvenile soft-shelled turtles (Pelodiscus sinensis) were fed diets containing 10 levels (0.8, 3.0, 5.0, 7.8, 9.0, 10.9, 20.4, 41.8, 78.6, 158 mg/kg diet) of copper (Cu) for 16 weeks. Turtles fed 5.0 mg Cu/kg achieved the best growth performance and the highest hematological values among all dietary groups. Growth was reduced significantly when dietary copper exceeded 20 mg/kg. Using the broken-line model with growth and hematological parameters as the dependent variables, the dietary Cu requirement of soft-shelled turtle was estimated to be 4.4–4.8 mg Cu/kg diet. Copper, iron, zinc and selenium concentrations in turtle liver were found to be influenced by dietary Cu level. Thiobarbituric acid-reactive substances in liver tissue of turtles fed diets containing 78.6–158 mg Cu/kg were higher (P < 0.05) than those fed diets containing less copper. Furthermore, diets containing more than 20 mg Cu/kg significantly impaired growth and hematology of soft-shelled turtles, indicating the dietary Cu tolerance above the requirement may be as low as 4 fold (20 vs. 5 mg/kg). Based on the results of this study, a dietary Cu level of 4–5 mg/kg is recommended for soft-shelled turtles. 相似文献
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为了比较饲料中添加鱼油、茶籽油、亚麻籽油以及碘酸钾对中华鳖（）稚鳖生长和脂类代谢的影响,本研究配制了4种油脂含量为10%的饲料,分别为鱼油料（FO,对照组）、鱼油+碘酸钾料（FO+PI,碘酸钾添加量为75 mg/kg）、茶籽油料（TO）和亚麻籽油料（LO）,饲喂初重为（5.06±0.05）g的中华鳖66 d。FO+PI组和LO组中华鳖稚鳖的存活率显著低于FO组（<0.05）。各组中华鳖稚鳖血浆中葡萄糖、总胆固醇和甘油三酯水平无显著差异（ACACA）的表达水平,上调了中华鳖-499的表达水平（-23b的表达水平（<0.05）。FO+PI组和TO组的稚鳖肝脏细胞内脂滴空泡较少,同时TO显著影响了肠道组织的黏膜褶。结论认为,相比于鱼油组,在饲料中添加10%茶籽油、亚麻籽油和添加75 mg/kg碘酸钾不会引起稚鳖生长差异,但是亚麻籽油和碘酸钾降低了稚鳖的存活率,茶籽油和碘酸钾影响肝脏的脂类代谢。 相似文献
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利用卵黄监测鳖群中病原菌感染 总被引：3，自引：0，他引：3
用从病鳖体内分离的四种病原菌制备诊断抗原, 采用微量凝集试验检测104 份卵黄样品中抗菌卵黄抗体。结果共检出86 份阳性样品, 其中以气单胞菌卵黄抗体阳性样品最多, 阳性检出率为50-96 % 且抗体水平较高, 可达1∶32 。变形杆菌卵黄抗体和不动杆菌卵黄抗体的阳性检出率分别为22-12 % 和9-62 % 。表明鳖场鳖群中有气单胞菌、变形杆菌和不动杆菌感染, 但以气单胞菌感染的范围及强度最高。 相似文献
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Soft-shelled turtles, Pelodiscus sinensis , with an average weight of 5.55 g, were fed diets supplemented with eight levels of ferrous sulphate for 8 weeks. The analysed iron content ranged from 50.8 to 482.9 mg kg−1 . Growth rate of turtles fed the control diet with no iron supplementation was the lowest among all dietary groups. Haematological parameters including red blood cell, haemoglobin, haematocrit, mean corpuscular volume, mean corpuscular haemoglobin and mean corpuscular haemoglobin concentration of the turtles fed the control diet were also significantly ( P < 0.05) lower relative to the other groups. Thus, dietary iron at 50.8 mg kg−1 (no supplemented iron) was deemed deficient for growth and ineffective at preventing anaemia in juvenile soft-shelled turtle. Whereas, a supplementation of 50 mg kg−1 ferrous sulphate (a total dietary iron of 91.8 mg kg−1 ) was enough to normalize the haematological values of soft-shelled turtles to the level similar to other iron supplement-fed groups. Within the tested dietary iron range, liver iron content curve-linearly ( r 2 = 0.99) increased with increasing dietary iron level. Furthermore, thiobarbituric acid-reactive substances in liver tissues of the turtles have also increased when liver iron content increased. The dietary iron requirement of soft-shelled turtle is 120–198 mg kg−1 when ferrous sulphate is used as the source of iron. 相似文献