家蝇免疫血淋巴的性质研究   总被引：13，自引：0，他引：13  

饶军华  郑青 《昆虫天敌》1999,21(3):121-125

带菌针刺诱导３６－４８ｈ后家蝇三龄幼虫免疫血淋巴的抑菌活性最高。其中抗菌成分为一种弱碱性物质,具有热稳定性耐低温的特性。毛细管区带电泳证实：针针刺诱导后家蝇免疫血淋巴的吸收峰与对照组大致相同,这表明家蝇抗菌物质的产生可能受结构基因调控。  相似文献   

南芥菜花叶病毒RT-PCR扩增产物胶体金层析和酶联检测方法的建立     

曹成  魏梅生  张永江  李桂芬  吴兴泉 《植物检疫》2011,(5)

南芥菜花叶病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为建立快速灵敏的检疫检测方法,本研究用生物素标记一条引物,用荧光素(或地高辛)标记另一条引物,经RT-PCR扩增产生双标记的扩增产物,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测和ELISA检测方法。胶体金层析检测方法在15min即可获得检测结果,ELISA方法需20h,后者检测的灵敏度可比前者分别提高100倍和5000倍。所建立的2种方法都免去了普通PCR检测的溴化乙锭染色和电泳的过程。  相似文献   

进境美国小麦中小麦线条花叶病毒检疫鉴定     

胡佳续  郭京泽  张莹  林宇  张瑞峰  张永江 《中国植保导刊》2017,(11):70-74

小麦线条花叶病毒(WSMV)是我国进境植物检疫性有害生物。2016年11月天津出入境检验检疫局通过反转录PCR(RT-PCR)和双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)方法,从美国小麦中检出WSMV。利用实时荧光PCR(Realtime RT-PCR)、免疫捕获RT-PCR(IC-RT-PCR)和序列比对分析等方法进行了验证。这是我国在进境小麦中截获WSMV的首次报道。  相似文献   

实时荧光RT-PCR一步法检测番茄环斑病毒   总被引：16，自引：1，他引：16  

朱建裕  朱水芳  廖晓兰  高必达 《植物病理学报》2003,33(4):338-341

 根据番茄环斑病毒(ToRSV)各株系RNA1聚合酶基因的保守序列,设计并合成1对引物和1条TaqMan荧光探针,建立了对ToRSV的实时荧光RT-PCR检测方法。该方法利用TaqMan荧光探针实时监测目的基因的扩增,实现RT-PCR扩增与探针检测同时进行,不需PCR后处理,消除了PCR产物的污染,不需电泳和EB染色,减少了检测步骤,节省了时间。这个方法具有"灵敏、准确、简便、快速"的特点适合于种传病害的快速诊断和口岸检验检疫运用。  相似文献   

胶体金免疫电镜技术用于烟草花叶病毒的检测   总被引：4，自引：0，他引：4  

傅仓生  秦臻 《植物病理学报》1994,24(4):353-355

 本文报道了以改良的鞣酸法制备颗粒大小适于植物病毒标记的胶体金方法,以及以胶体金免疫电镜技术检测、鉴定植物病毒的方法,并以此法检测了烟草花叶病毒TMV。  相似文献   

实时荧光RT-PCR一步法检测苹果茎沟病毒   总被引：13，自引：0，他引：13  

郭立新  向本春  陈红运  段维军  陈洪俊  朱水芳 《植物病理学报》2006,36(1):57-61

 根据苹果茎沟病毒(ASGV)各分离物外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建屯了对ASGV的实时荧光RT-PCR检测方法。TaqMan-MGB探针3'端具有小沟结合分子(Minor groove binder,MGB),提高了探针的Tm值,缩短了探针长度,解决了病毒各分离物之间基因组变异较大、难以找到较长一致的序列来设计探针的困难。该方法的检测灵敏度比常规RT-PCR电泳检测高约10倍,对于ASGV等在果树体内含量较低的病毒尤为适用。此方法快速、灵敏,整个检测过程完全闭管,无需PCR后处理。  相似文献   

两种免疫胶体金快速诊断技术简介   总被引：3，自引：2，他引：3  

魏梅生 《植物检疫》2001,15(2):125-127

植物病毒的血清学检测 ,以酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)最为普遍和有效 ,它在方法学上比较完善 ,是一种经典的方法。通常ＥＬＩＳＡ反应是在聚苯乙烯反应板上进行的 ,当固相载体变成硝酸纤维素膜时 ,则出现了免疫酶斑点试验 (ＩｍｍｕｎｏｅｎｚｙｍｅＳｐｏｔＡｓｓａｙ ,ＩＥＳＡ)。若将此处的标记物由酶标记改为金标记时 ,因不需要酶促反应的底物 ,缩短了整个检测的时间 ,随着技术的不断进步 ,出现了两种免疫胶体金快速诊断技术即 :斑点免疫金渗滤试验和胶体金免疫层析试验。现分别予以介绍。1　斑点免疫金渗滤试验 (ＤｏｔＩｍｍｕｎ…  相似文献   

进口大豆上菜豆荚斑驳病毒的免疫捕获巢式RT-PCR检测   总被引：4，自引：0，他引：4  

于翠  杨翠云  宋绍祎  洪健 《植物检疫》2006,20(4):201-204

利用DAS-ELISA对进口大豆上BPMV进行检测发现,从美国进口的部分大豆样品对BPMV的多抗血清呈阳性反应;利用免疫吸附电镜观察发现,ELISA检测阳性的大豆种皮病汁液中存在直径约30nm的球状病毒粒子.根据BPMV外壳蛋白（CP）基因的保守序列设计了2对嵌合引物,建立了BPMV的高灵敏的免疫捕获巢式RT-PCR（IC-nested RT-PCR）检测方法.该方法经免疫捕获、反转录和2轮PCR扩增,能从带毒大豆种子中扩增到预期大小的DNA条带.序列测定与分析表明此条带的序列为BPMV部分CP基因,在系统关系树上与BPMV的其它分离物形成一簇亲缘关系很近.实验表明从进境大豆上检测到了BPMV.  相似文献   

利用GICA-PCR快速检测瓜类果斑病菌     

董明明  张甜甜  魏梅生  刘爱新  朱水芳  赵文军 《植物检疫》2011,(1)

瓜类果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)是瓜类作物上重要的病原细菌,为我国进境植物检疫性有害生物。胶体金免疫层析试纸条方便快捷,应用广泛。该方法使用不当会出现假阳性问题,仅适用于病原菌的初筛检测。本研究将Aac胶体金免疫层析方法(GICA)与PCR技术相结合,建立了GICA-PCR检测方法。检测结果表明,该方法在蛋白与核酸2个层面上从发病西瓜叶片上检测到瓜类果斑病菌,有效解决了试纸条检测的假阳性问题,提高了瓜类果斑病菌检测的准确性,值得推广应用。  相似文献   

基于PCR技术的植物病原真菌检测技术研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

段维军  郭立新 《植物检疫》2008,22(6)

植物病原真菌是可以在植物上引起病害的一类重要病原物,对该类病原的快速检测是对其进行植物检疫、监测预报及病害防治必不可少的基础工作.近年来,以PCR为基础的分子检测技术的日益发展使得植物病原真菌的检测更加快速、灵敏和可靠.本文对近年来基于PCR技术的植物病原真菌检测方法进行了介绍与评述,这些方法包括ITS-PCR、巢式PCR、多重PCR、PCR ELISA和实时荧光定量PCR技术.  相似文献