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根据苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了ｃｒｙⅠ基因５′端特异引物和３′端共同引物,利用ＰＣＲ扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物,通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型．本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的２０个菌株进行了ｃｒｙⅠＡ（ａ～ｃ）基因类型的ＰＣＲ鉴定．结果表明：４个菌株含有ｃｒｙⅠＡ（ａ）、ｃｒｙⅠＡ（ｂ）和ｃｒｙⅠＡ（ｃ）基因,２个菌株含有ｃｒｙⅠＡ（ａ）和ｃｒｙⅠＡ（ｃ）基因,其余菌株不含所鉴定的基因类型． 相似文献
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根据苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了ｃｒｙⅠ基因５‘端特异引物和３’端共同引物,利用ＰＣＲ扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物。通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型。本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的２０个菌株进行了ｃｒｙⅠＡ（ａ－ｃ）基因类型的ＰＣＲ鉴定。 相似文献
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苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体毒素对捻转血矛线虫第2期幼虫的毒力 总被引：1，自引：1，他引：1
苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体毒素对捻转血矛线虫第２期幼虫的毒力王祥，姚宝安（华中农业大学畜牧兽医学院，武汉４３００７０）关键词苏云金芽胞杆菌，伴胞晶体毒素，捻转血矛线虫，第二期幼虫ＴＨＥＴＯＸＩＣＩＴＹＯＦＢａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓＣＲＹ... 相似文献
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用电激转化法构建杀虫防病荧光假单胞菌 总被引：2，自引：0，他引：2
以广寄主范围质粒ＰＵＣＰ１８和ＰＵＣＰ１９为载体，用电激转化法，将苏云金杆菌杀虫蛋白基因ＣｒｙｌＡ（ｃ）片段导入了荧光假单胞菌Ｐ３０３菌株。Ｓｏｕｔｈｅｍ印迹分析和Ｗｅｓｔｅｍ印迹分析分别证实ＣｒｙｌＡ（ｃ）基因的导入和晶体蛋白在Ｐ３０３中的表达。 相似文献
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苏云金杆菌８０１０ｃｒｙＩＡ基因的克隆和表达ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｒｙＩＡＧｅｎｅｏｆＢａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ８０１０苏云金杆菌是目前世界上产量最大的微生物杀虫剂。应用生物工程技术进行遗传操纵，可以提高野生型... 相似文献
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根据能形成伴胞晶体的特征，芽胞杆菌CTC菌株被鉴定为苏云金芽胞杆菌幕虫亚种。但该菌株明显不同于典型的苏云金芽胞杆菌，因为其伴胞晶体蛋白并不是由杀虫晶体蛋白基因编码，而是编码细胞表面S-层蛋白基因的产物，且伴胞晶体蛋白没有检测到对昆虫的毒性。本研究基于对CTC菌株及参照菌的16S-23S rRNA间隔区、编码S-层蛋白的基因进行扩增并测序，从系统发育水平检测到CTC菌株明显与苏云金芽胞杆菌幕虫亚种典型菌株T02存在差异，表明芽胞杆菌CTC菌株更接近蜡状芽胞杆菌。 相似文献
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将ｐＥＳＩ经ＥｃｏＲＩ酶解后回收纯化的含有苏云金芽胞杆菌ｃｒｙＩ基因高保守区的ＥｃｏＲＩ－Ｆ片段重组到ｐＳＥＬＥＣＴ－１的ＥｃｏＲＩ位点，通过ＤＩＧ体外标记转录制备高灵敏度、背景清楚的ＲＮＡ探针，并利用该探针进行苏云金芽胞杆菌８０１０杀虫基因定位．结果表明，该菌株编码杀虫晶体蛋白的基因位于相对分子质量３７×１０６的质粒上 相似文献
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杨树冰核细菌溃疡病寄主树栖伴生细菌的研究 总被引：3，自引：2，他引：3
对感病寄生Ａ１００、Ａ１５和美×青杨树枝、干、根、叶上的细菌进行了分离、纯化和鉴定、结果表明伴生细菌有１０种。它们是：嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｉｏｇｕｋａ）、恶臭假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｉｄａ）、荧光假单胞菌（Ｐ．ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、丁香假单胞菌（Ｐ． ｓｙｒｉｎｇａｅ）、成团肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｂａｃｔｅｒ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）、短小芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）、栗褐芽孢杆菌（Ｂ． ｂａｄｉｕｓ）、巨大芽孢杆菌（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、腊状芽孢杆菌（Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ）地衣芽孢杆菌（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）。这些细菌在感病杨树不同部位出现的频率各异,在韧皮部细菌种群较多．在心材则较少。 相似文献
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利用人源化噬菌体抗体库筛选抗Bt Cry1B毒蛋白质的单链抗体(Single-chain antibodies,scFv)。将扩增后的噬菌体抗体库与固相化包被的Cry1B毒蛋白质特异性结合,经4轮"吸附-洗脱-扩增"后,富集特异性识别Cry1B毒蛋白质的噬菌体单链抗体。从最后一轮筛选中随机挑取单菌落进行单克隆ELISA鉴定,对阳性克隆进行PCR扩增、DNA电泳鉴定及测序,成功筛选获得8个阳性噬菌体scFvs,经鉴定均有完整外源基因片段插入。挑取阳性值最高的scFv(1E2)建立了基于单链抗体的Cry1B毒蛋白质间接竞争ELISA检测方法。结果表明,Cry1B毒蛋白质对噬菌体scFv(1E2)的抑制中浓度(IC50)为1.075μg/ml,最低检测限(IC10)为0.013 4μg/ml,线性检测范围在0.5μg/ml至4.0μg/ml之间。 相似文献
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一株高毒苏云金杆菌的晶体蛋白组成及RAPD分析 总被引：1，自引：1，他引：1
筛选得到一株对摇蚊幼虫高毒的苏云金芽孢杆菌以色列亚种菌株(命名为SZ6),利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和RAPD技术分析了其晶体蛋白和总DNA组成,结果表明:在晶体蛋白提纯中,固体培养基培养的菌株晶体蛋白比液体摇瓶培养的更易用双液相法提纯;晶体蛋白亚基在分子量上和标准菌株的晶体蛋白没有显著差异,都含有4条多肽(分子量分别为135、128、72和27KD),但RAPD分析结果显示,该毒株在DNA组成上,于多个位点处存在与标准菌株不同的结构。 相似文献
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采集四川雅安市周公山土壤样品320份,利用醋酸钠-抗生素筛选法分离出苏云金芽孢杆菌132株。通过光学显微镜镜检发现,这些菌株均呈典型的苏云金芽孢杆菌形态,其伴孢晶体主要形态有长菱形、短菱形、方形、球形、不定型等。根据GeneBank中公布的cry基因序列,设计了14对杀虫cry基因的通用引物,对这132株分离菌进行的PCR-RFLP分析鉴定表明:在86株菌中分布有除cry18、cry27/29、cry34/35外的11种cry基因型,其中以cry1型最多,其次为cry2型。另46株菌未检测出cry基因。对这132株苏云金芽孢杆菌进行SDS-PAGE蛋白分析,发现杀鳞翅目、鞘翅目和双翅目的约130、80、65、75 kDa的蛋白带最丰富。 相似文献
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Cloning of a lymphoid-specific cDNA encoding a protein binding the regulatory octamer DNA motif 总被引：67，自引：0，他引：67
L M Staudt R G Clerc H Singh J H LeBowitz P A Sharp D Baltimore 《Science (New York, N.Y.)》1988,241(4865):577-580
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从舞毒蛾(Lymantria dispar)3龄幼虫转录组文库中鉴定获得舞毒蛾谷胱甘肽S–转移酶基因全长c DNA,命名为Ld GSTe1。该基因全长651 bp,编码216个氨基酸。序列分析显示,Ld GSTe1蛋白氨基酸序列含有GST_C_Delta_Epsilon与GST_N_Delta_Epsilon 2个保守结构域,属于类硫氧还蛋白和谷胱甘肽S–转移酶2个超家族。系统进化树分析表明,舞毒蛾Ld GST蛋白属于GST Epsilon家族。蛋白结构显示,Ld GSTe1蛋白包含一个N端和一个C端结构,α–螺旋与β–折叠为主要结构元件。实时荧光定量PCR结果表明,在4.0、10.0 mg/L鱼藤酮药剂处理下,舞毒蛾3龄幼虫Ld GSTe1基因表达先下降后上升,推测该基因参与舞毒蛾解毒应答。 相似文献
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Mechanism of insect resistance to the microbial insecticide Bacillus thuringiensis 总被引：46，自引：0，他引：46
J Van Rie W H McGaughey D E Johnson B D Barnett H Van Mellaert 《Science (New York, N.Y.)》1990,247(4938):72-74
Receptor binding studies show that resistance of a laboratory-selected Plodia interpunctella strain to a Bacillus thuringiensis insecticidal crystal protein (ICP) is correlated with a 50-fold reduction in affinity of the membrane receptor for this protein. The strain is sensitive to a second type of ICP that apparently recognizes a different receptor. Understanding the mechanism of resistance will provide strategies to prevent or delay resistance and hence prolong the usefulness of B. thuringiensis ICPs as environmentally safe insecticides. 相似文献
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[目的]为了调查对鳞翅目害虫具有高毒力苏云金杆菌YN1-1菌株的生物学特性.[方法]分析YN1-1菌株晶体蛋白的SDS-PAGE电泳图谱,调查YN1-1菌株对几种鳞翅目害虫的室内药效及田间防效.[结果]YN1-1菌株的伴孢晶体具菱形结构;其原毒素蛋白分子量为136 kDa,经胰蛋白酶处理后水解为63 kDa的活性毒素蛋白.室内药效试验结果,用YN1-1菌株处理小菜蛾与菜青虫时,其药效比商品苏云金杆菌(WP)更好;在田间防效上,YN1-1菌株的虫口减退率也比商品苏云金杆菌(WP)更高.[结论] YN1-1菌株具有优良的开发潜力. 相似文献
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不同食料植物对舞毒蛾生长发育的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
该文在以北京主要乔灌木树种为食料、室内饲养舞毒蛾的条件下 ,分析了不同食料植物对舞毒蛾生长发育的影响 .1龄幼虫成活的试验表明 :受试各树种间存在显著差异 ,舞毒蛾 1龄幼虫在柿、杏、黄栌、毛泡桐、火炬树等树种饲养下死亡率较低 ,在核桃楸、国槐、刺槐、臭椿等树种饲养条件下死亡率较高 .4龄幼虫对食物的利用和转化的试验表明 :舞毒蛾对柿树、黄栌、杏树、加杨的营养效率较高 ,对华山松、国槐、刺槐、白蜡和抗虫杨的营养效率较低 . 相似文献