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1.
用于预防鸡马立克氏病（ＭＤ）的火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）Ｆｃ─１２６株细胞培养低代毒，经过一日龄ＳＰＦ雏鸡体连续回传五代，于最后一代回收病毒后，超声波裂解释放病毒，接种在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上，挑选蚀斑纯化的克隆株。经过三次克隆纯化后，最后挑选出２３个大蚀斑克隆株，３个中蚀斑克隆株和５个小蚀斑克隆株。对部分克隆株和其原始ＨＶＴＦｃ─１２６株在细胞中增殖速度和免疫原性进行了比较，初步筛选出大斑克隆株（３３０８０１）作为疫苗种毒的候选株。 相似文献
2.
ＨＶＴ Ｆｃ－１２６株及其克隆株免疫一日龄有母源抗体的雏鸡后，结果三个大斑克隆株产生的毒血症水平高于ＨＶＴＦｃ－１２６株和小斑克隆株。所有同群未免疫对照鸡均无毒血症产生。母源抗体在２１天时仍可测到，且明显影响毒血症的产生，并使毒血症的高峰期推迟。各克隆株接种后具有中和母源抗体的能力。用ＭＤ京－１株强毒攻击结果表明：抗攻毒保护力与鸡体内毒血症水平呈正相关，而与中和抗体水平似乎无关，母源抗体不能保护雏 相似文献
3.
ＨＶＴＦｃ－１２６株及其克隆株免疫一日龄有母源抗体的雏鸡后，结果三个大斑克隆株产生的毒血症水平高于ＨＶＴＦｃ－１２６株和小斑克隆株。所有同群未免疫对照鸡均无毒血症产生。母源抗体在２１天时仍可测到，且明显影响毒血症的产生，并使毒血症的高峰期推迟。各克隆株接种后具有中和母源抗体的能力。用ＭＤ京－１株强毒攻击结果表明：抗攻毒保护力与鸡体内毒血症水平呈正相关，而与中和抗体水平似乎无关，母源抗体不能保护雏鸡抵抗强毒的攻击。 相似文献
4.
在火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ ＦＣ－１２６株）克隆纯化及初步筛选的基础上，又将所得到的克隆株及原始毒种接种一日龄雏鸡（ＳＰＦ雏鸡及普通雏鸡），分别测定其接种后不同时间毒血症及中和抗体产生水平。结果表明，不同克隆株接种一日龄雏鸡均可产生毒血症及中和抗体。总体来看，大斑３３０８０１克隆株产生的毒血症水平高于其它毒株。 相似文献
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在火鸡疱疹病毒（ＨＶＴＦＣ－１２６株）克隆纯化及初步筛选的基础上，又将所得到的克隆株及原始毒种接种一日龄雏鸡（ＳＰＦ雏鸡及普通雏鸡），分别测定其接种后不同时间毒血症及中和抗体产生水平。结果表明，不同克隆株接种一日龄雏鸡均可产生毒血症及中和抗体。总体来看，大斑３３０８０１克隆株产生的毒血症水平高于其它毒株。 相似文献
7.
应用病毒蚀斑技术，将乙型脑炎病毒ＨＷ１株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）单层培养上连续挑斑纯化３次，对纯化后的克隆株进行血清学，免疫生物学鉴定及外源性污染检定。毒株对ＢＨＤ－２１细胞感染滴度≥１０＾６．１５ＴＣＩＤ５０；对８－９ｇ小鼠脑内感染的毒力≥１０＾７．１０ＬＤ５０／０．０４ｍＬ；与ＪＥＶＰ３株阳性参考血清的中和指数≥２０００；克隆株对猪有较好的的性，无外源性污染。 相似文献
8.
为了建立一种监测鸡群马立克氏病病毒（ＭＤＶ）早期感染的微量ＰＣＲ方法,根据血清Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ１）基因组ＢａｍＨＩ－Ｌ片段的核酸序列设计了１对寡核苷酸引物,用含０．３ＵＴａｑ酶的１０μＬ反应体系分别扩增了ＭＤＶ１型（京－１株、ＭＤ１１／７５ｃ株）、ＭＤＶ２型（ＳＢ－１株）和ＨＶＴ（ＦＣ－１２６株）的核酸,并用京－１株感染细胞ＤＮＡ作了敏感性试验。结果显示,该引物对ＭＤＶ１型病毒特异,京－１株和ＭＤ１１／７５ｃ株都扩增到４２５ｂｐ的核酸条带,而ＳＢ－１株、ＦＣ－１２６株和正常ＣＥＦ细胞的ＤＮＡ都没有得到任何条带;敏感性试验结果表明,微量ＰＣＲ能够检测到０．１ｐｇ的京－１株感染细胞ＤＮＡ;对京－１株感染鸡,在接种后第５天就能在血液细胞中检测到ＭＤＶＤＮＡ。微量ＰＣＲ可望成为监测鸡群ＭＤＶ早期感染的一种快速、有效的方法。 相似文献
9.
鸡马立克氏病活疫苗免疫效力比较试验 总被引：1，自引：0，他引：1
用ＨＶＴ冻干苗、ＨＶＴ细胞结合苗、ＣＶＩ９８８细胞结合苗、ＳＢ１＋ＦＣ１２６双价活疫苗、３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６双价活疫苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）疫苗免疫ＳＰＦ白来航鸡或普通伊莎鸡，用鸡马立克氏病病毒（ＭＤＶ）强毒ＧＡ株、京－１血毒以及鸡马立克氏病超强毒ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株分别攻击进行免疫效力比较试验。试验表明，ＭＤ单价苗的免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８、ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗，这３种ＭＤ单价苗均能给免疫鸡群提供有效的免疫保护力。ＳＢ１＋ＦＣ１２６、Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６等３种ＭＤ双价苗免疫效力显著高于ＭＤ单价苗，均能给免疫鸡群提供较强的免疫保护力，并能有效地抵抗ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株的致瘤作用。Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６ＭＤ双价苗免疫效力无显著差异 相似文献
10.
牛传染性鼻气管炎病毒TK基因缺失株的构建 总被引：8，自引：1，他引：7
将含有牛传染性鼻气管炎病毒（ Ｉ Ｂ Ｒ Ｖ） Ｔ Ｋ 基因的片段克隆于ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ｓ Ｋ 中, 再用 Ｂｇ１ Ⅱ和 Ｓａｃ Ｉ切去 Ｔ Ｋ 基因中３４７ｂｐ 的片段, 获得了含缺失 Ｔ Ｋ 基因的重组质粒, 然后插入 Ｌａｃ Ｚ 报告基因, 构建成转移载体。以脂质体转染法将此转移载体与 Ｉ Ｂ Ｒ Ｖ Ｂａｒｔｈａ 株在牛肾细胞（ Ｍ Ｄ Ｂ Ｋ） 上共转染, 经过蓝色蚀斑筛选和蚀斑克隆纯化, 获得了能稳定遗传的重组 Ｉ Ｂ Ｒ Ｖ。经 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 印迹杂交鉴定, 证实该重组病毒为 Ｔ Ｋ 基因缺失突变株。 相似文献
11.
伪狂犬病病毒Fa株gI和gp63基因缺失株的构建 总被引：7，自引：0，他引：7
用限制性核酸内切酶ＮｃｏＩ消化含有伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）Ｆａ侏ＢａｍＨＩ－７片段的质粒ＰＰＢ７，以低融点琼脂糖回收目的片段，经连接并转化Ｅ．ｃｏｌｉ ＤＨ５ｄ，获得缺失３ｇＩ和部分ｇｐ６３基因的重组质粒ＰＰＢ７－１。将ＰＲＶ Ｆａ与ＰＰＢ７－１ ＤＮＡ共同转染ＰＫ１５单层细胞，待出现５０％以上细胞病变时收获病毒，并以蚀斑法得到纯化重组病毒株，命名为ＰＦＤＩ／Ｄ６３。小鼠试验证实缺失株对小鼠具有一定 相似文献
12.
测定了猪生殖－－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）魁北克ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株基因组３我的ｃ－ＤＮＡ序列，并与欧洲（Ｌｅｌｙｓｔａｄ病毒ＬＶ）和美国（ＡＴＣＣＶＲ２３８５，ＭＮ－１６）参考株序列进行了比较，魁北克株与Ｌｅｌｙ－ｓｔａｄ病毒之间，包含ＯＲＦ３７序列（２８３４个核苷酸）出现广泛的基因组变异，迪是由于大量碱基置换和增删引起的。ＯＲＦ５、３和７似乎最不稳定，魁北克株与Ｌｅｌｙｓｔａｄ病毒的推测编 相似文献
13.
分别以血清型Ⅱ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ）疫苗株（Ｚ４、ＳＢ１）、血清Ⅲ型火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗株（ＦＣ１２６）及二价疫苗（Ｚ４＋ＦＣ１２６、ＳＢ１＋ＦＣ１２６）免疫鸡群，用琼脂扩散试验（ＡＧＰＴ）检查各鸡群ＭＤＶ强毒攻击后不同时期的羽囊抗原。结果，二价苗能使试验鸡羽毛囊强毒排出高峰推迟，排毒率显著下降。 相似文献
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免疫鸡羽毛根中火鸡疱疹病毒的分离与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）冻干苗经腹腔免疫１日龄非免疫鸡，于第３周采集羽毛根，分别采取直接法和间接法（即经过滤获取脱细胞的游离物）接种次代鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），以进行病毒的分离。结果显示，在免疫后第３、４、５、６周，２种方法都分离到病毒，第７周仅直接法分离到病毒，而第８周２种方法都没有分离到。根据分离到病毒的细胞病变（ＣＰＥ）特征，结合地高辛标记的Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ－１）核酸探针检测结果，表明ＨＶＴ免疫鸡羽毛根中含有可脱离细胞的、具有感染性的疫苗株ＨＶＴ粒子，且其可检出时间具有阶段性。 相似文献
15.
ＨＶＴ克隆株（大斑３３０８０１）大剂量（１０头剂）免疫１日龄有母源抗体的雏鸡，在１０周的观察期内未见任何不良反应和肉眼可见病变，半数保护量（ＰＤ５０）为６０ＰＦＵ。病毒的免疫剂量（ＰＦＵ数）与抗攻毒保护力及与雏鸡的增重呈正相关。 相似文献
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提高鸡马立克氏病活疫苗蚀斑计数准确性的几点体会 总被引：1，自引：0，他引：1
提高鸡马立克氏病活疫苗蚀斑计数准确性的几点体会张勇强，侯军（南京药械厂南京，２１００１２）鸡马立克氏病火鸡疤疹病毒活疫苗是利用火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上培养，产生细胞病变（ＣＰＥ）形成蚀斑单位）（ＰＦＵ）这一指标进行出厂羽份的... 相似文献
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对火鸡疱疹病毒Ｆｃ－１２６克隆的种子培养物进行了纯净和免疫原性及其１５代、２１代传代毒的免疫原性检测。结果表明种子无细菌、真菌、支原体和外源病毒污染；在鸡胚成纤维细胞上生成典型的细胞病变并在琼脂凝胶覆盖下形成火鸡疱疹病毒特有的蚀斑。这两种功能能为特异性抗血清所中和，克隆种子本身及其传代毒的免疫原性良好，各种检测数据说明克隆种子状态良好，２１代毒以前的各代次传代毒均可以用于制造疫苗。 相似文献
18.
某些传染性法氏囊病强毒株（ＨＶ－ＩＢＤＶ）通过鸡胚连续传代适应于鸡胚，鸡胚适应的ＨＶ－ＩＢＤＶ成功地在鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞上生长，表现致细胞病变作用，鸡胚－细胞适应株对实验感染雏鸡的致病性大大降低，无一只死亡，法氏囊病变与标准株的相似，交叉病毒中和试验表明，细胞培养适应与标准株的抗原性有差异，免疫学试验表明，适应株免疫鸡后，对ＨＶ－ＩＢＤＶ强毒感染有很好保护作用，特别是免疫接种后３天攻强毒，适 相似文献
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鸡新城疫CS2株病毒的筛选鉴定 总被引：1，自引：1，他引：0
对新城疫病毒Ｉ系株（Ｍｕｋｔｅｓｗａｒ）按其在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上的蚀斑大小进行筛选，经４次克隆之后，选出了小蚀斑株ＣＳ２作为目的株，此株ＭＤＴ／ＭＬＤ，ＩＣＰＩ和ＩＶＰＩ分别为５２．４小时，０．６４和０．２３，而其母株Ｉ系的分别为４８小时，１．７和０．３２５。此株比Ｉ系更为安全。 相似文献