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1.
以３０％ ～６０％ 硫酸铵饱和度分级沉淀、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００、Ｐｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－４Ｂ 和羟基磷灰石层析纯化了小麦５－氨基酮戊酸脱水酶（ＡＬＡＤ）,其在ｐＨ ８．５ 时比活为３１ Ｕ·ｍ ｇ－ １蛋白;酶纯化了９１ 倍,得率５％ ,酶亚基分子质量约５２ ｋｕ,全酶分子质量约３３０ ｋｕ,表明酶由６ 个亚基组成;酶的等电点为４．８,在４００ ｎｍ有吸收峰,最适反应温度４５℃,Ｍｇ２＋ 激活酶,Ｚｎ２＋ 和磷酸吡哆醛抑制酶。纯化的ＡＬＡＤ浓缩后,－ ２０℃下在０．１ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １,ｐＨ ８．５ 的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ,内含５０％ 的甘油,５ ｍ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １的巯基乙醇和ＭｇＣｌ２ 中黑暗贮藏３０ ｄ 酶活不损失 相似文献
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幼胚和花药培养诱导荔枝胚性愈伤组织 总被引：17，自引：1，他引：17
以福建荔枝主栽品种元红的幼胚为外植体，优化了离体培养诱导胚性愈伤组织（ＥＣ）的培养基。对ＥＣ的诱导，较高质量浓度的蔗糖（５０ｇ·Ｌ＾－１）和２，４－Ｄ（２￣４ｍｇ·Ｌ＾－１）优于较低质量浓度的蔗糖（３０ｇ·Ｌ＾－１）和２，４－Ｄ（０．５￣１．０ｍｇ·Ｌ＾－１）。ＢＡ和活性炭（ＡＣ）对ＥＣ的诱导有抑制作用。适当的硫代硫酸银（ＳＴＳ）（２９．４μｍｏｌ·Ｌ＾－１）可以抵消ＢＡ的抑制作用。在ＭＳ附加质量 相似文献
3.
经反应红１２０亲和层析纯化的小麦胆色素原脱氨酶（Ｐｏｒｐｈｏｂｉｌｉｎｏｇｅｎ ｄｅａｍｉｎａｓｅ,ＰＢＧＤ,ＥＣ．４,３,１,８）,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ－ＰＡＧＥ上均显示一条带,表明已ＰＢＧＤ纯化至均一,它的亚基分子量３６ＫＤ,ｐＩ为４．８。酶活性染色呈一条带,表明无同工酶存在。ＰＡＧＥ显示两条带,证明小麦幼苗中存在酶与底物结合的中间物。脲梯度电泳呈现之字形,在４ｍｏｌ／Ｌ的脲浓度下可使酶 相似文献
4.
幼胚和花药培养诱导荔枝胚性愈伤组织 总被引：3，自引：0，他引：3
以福建荔枝主栽品种元红的幼胚为外植体，优化了离体培养诱导胚性愈伤组织（ＥＣ）的培养基．对ＥＣ的诱导，较高质量浓度的蔗糖（５０ｇＬ－１）和２，４－Ｄ（２～４ｍｇＬ－１）优于较低质量浓度的蔗糖（３０ｇＬ－１）和２，４－Ｄ（０．５～１．０ｍｇＬ－１）．ＢＡ和活性炭（ＡＣ）对ＥＣ的诱导有抑制作用．适当的硫代硫酸银（ＳＴＳ）（２９．４μｍｏｌＬ－１）可以抵消ＢＡ的抑制作用．在ＭＳ附加质量浓度为５０ｇＬ－１的蔗糖和２ｍｇＬ－１的２，４－Ｄ培养基上，下番枝、乌叶、元红和陈紫幼胚诱导ＥＣ的频率分别为２２％、１４．５％、１７．２％和１６．８％．在上述培养基中，元红花药产生ＥＣ的频率为０．１％～０．６％，而加入ＳＴＳ（２９．４μｍｏｌＬ－１）可提高至１．２％～５．６％．对影响ＥＣ的诱导因素和它们的相互关系进行了讨论 相似文献
5.
等电聚焦分析兔出血症病毒多肽 总被引：1，自引：1，他引：0
人工感染ＮＪ株ＲＨＤＶ病毒死兔肝经低温反复冻融,氯仿处理,ＰＥＧ沉淀、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ柱层析得纯化病毒。纯化病毒经尿素－聚丙烯酰胺圆盘等电聚聚焦,考马斯亮蓝染色紫外扫描显示８条多肽,其等电点及相对百分含量分别为Ａ：６．３,１８,５１％;Ｂ＝６．７,１１．２２％;Ｃ：７．４％;Ｄ：７．７,８．５３％;Ｅ：８．１,７,２７％Ｆ：８．７,１２．４４％Ｇ：９．０。１６,１８％,Ｈ：９．５,２２．２ 相似文献
6.
用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ，Ｍ４１）作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ筛选，获得了４株能分泌特异性抗ＩＢＶ单克隆抗体的细胞系，分别命名为４ＡＣ１、４ＡＦ１、６ＤＨ８及２ＤＨ１０。４株单抗的亚类都属于ＩｇＧ２ｂ，在Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验中，４ＡＦ１、６ＤＨ８２株单抗特异性地识别ＩＢＶ的核衣壳蛋白（Ｎ）；经ＥＬＩＳＡ测定，各株单抗４０ｈ培养上清效价达１０－２～１０－４，第７天腹水效价达１０－５～１０－６，４ＡＦ１、６ＤＨ８与所试７个ＩＢＶ标准株及２个ＩＢＶ分离株都发生反应 相似文献
7.
建立健康鸵鸟（Ｓｔｒｕｔｈｉｏｃａｍｅｌｕｓ）的血清全套生化参数,采用日本岛津ＣＬ ７２００型全自动生化分析仪,对３０只１～６月龄健康鸵鸟３８项血清生化参数进行测定．结果如下：（１）血清蛋白参数／ｇ·Ｌ－１：ＴＰ３１．８２,ＡＬＢ１５．４１,ＧＬＯ１６．１８（ＡＬＢ／ＧＬＯ０．９５）,Ａｐｏ Ａ１０．１２,Ａｐｏ Ｂ０．１４（Ａｐｏ Ａ１／Ａｐｏ Ｂ０．８０）;（２）血清酶参数／ｕ·Ｌ－１：ＡＬＴ１４．３,ＡＳＴ４５６．８（ＡＬＴ／ＡＳＴ０．３８）,ＧＧＴ３．４,ＬＤＨ１６０３．１,ＣＫ３９３６．８,ＣＫ ＭＢ１４３０．８,ＡＭＹ３４１５．１,ＡＫＰ５７１．７,ＨＢＤＨ３７３．３;（３）血清糖、蛋白质、脂类及其代谢产物参数／ｍｍｏｌ·Ｌ－１：ＧＬＵ９．４１,ＴＲＩ１．９７,ＢＵＮ０．９４,ＬＤＬ２．１９,ＨＤＬ１．５４,ＣＨＯ３．５８（ＨＤＬ／ＣＨＯ０．４１）;ＣＲＥ１２．６５μｍｏｌ·Ｌ－１（ＢＵＮ／ＣＲＥ０．０６３）,ＵＡ５０５．２４μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＡ３７．１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＩＬ５．３２μｍｏｌ·Ｌ－１,ＤＢＩＬ３．２１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＩＢＩＬ２．０８μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＴＴ４．１２ｕ;（? 相似文献
8.
高压液相色谱对奶粉中维生素A,D3,E,K1同时测定方法的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本实验建立了用反相高压液相色谱（ＨＰＬＣ）同时测定强化奶粉中维生素Ａ，Ｄ３，Ｅ，Ｋ１的方法。采用部分纯化的脂肪酶水解样品，在０．０５ｍｏｌ·Ｌ＾－１，ｐＨ７．６的磷酸缓冲液中，３６°±１℃反应４ｈ，加１０ｍｏｌ·Ｌ＾－１氢氧化钠终止酶反应后用已烷提取。选用μ－Ｂｏｎｄａｐａｋ Ｃ１８为色谱柱，９８％的甲醇为流动相，紫外２６５ｎｍ，荧光ＥＸ３２５ｎｍ，ＥＭ４８０ｎｍ双通道检测。保留时间分别为４．８７ 相似文献
9.
研究５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ与铁（Ⅲ）的显色反应，在ｐＨ９．０￣９．４范围内，当有１０％ＳＤＳ存在时，铁（Ⅲ）与５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ形成１：４的稳定配合物。λｍａｘ为５３４ｎｍ，ε为５．１３×１０＾４Ｌ·ｍｏｌ＾－１·ｃｍ＾－１，铁（Ⅲ）浓度在０￣１２．５×１０＾－４ｇ／Ｌ范围内符合Ｂｅｅｒ定律，用双峰双波长法测定茶叶中痕量铁（Ⅲ），结果满意。 相似文献
10.
高脂饮食对大鼠动脉血管张力的影响 总被引：7，自引：0，他引：7
目的：观察高脂饮食大鼠动脉血管张力的改变及内源性ＮＯ、ＰＧＩ２的作用。方法：ＳＤ大鼠１６只分为高脂饮食组和对照组,喂养５周后测定血清血脂浓度和胸主动脉环对云甲肾上腺素（ＮＥ,１０＾－８￣１０＾－４ｍｍｏｌ／Ｌ）、乙酰胆碱（ＡＣｈ,１０＾－８￣１０＾－４ｍｍｏｌ／Ｌ）的反应。结果：与对照组比较,高脂饮食组ＴＣ、ＬＤＬ明显升高（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）;胸主动脉环对ＮＥ或ＡＣｈ的反应明显减弱（Ｐ〈 相似文献
11.
猪卵母细胞的体外成熟 总被引：5，自引：0，他引：5
取自猪卵巢含卵丘细胞且胞质均匀的，胞质不均匀和不含卵丘细胞质均匀３类卵母细胞，台盘蓝染色的存活率分别为１００％，１０％和４０％，３差异极显。Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ４种培养液养的成熟率分别为１６．２％，６１．５％，５５．２％，４１．５％，差异极显。Ｅ，ＣＦ３种培养液培养的成熟率分别为３５．５％，４７．８％，５２．６％，在Ｅ培养液中加入ＰＭＳＧ和Ｅ２能显地提高成熟率。Ｃ液与卵泡液（加入２×１０＾－＾６ 相似文献
12.
家蚕核多角体病毒Lef—1和DA26基因的克隆及部分序列分析 总被引：2，自引：1，他引：2
ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因分别位于ｅｇｔ基因的上游和下游．从ｐＵＡｃ－ｅｇｔ中分离出ＥｃｏＲＩ－ＸｂａＩ１．１ｋｂ的ｅｇｔ基因片段，进行缺口平移标记，获得探针。与ＢｍＮＰＶＤＮＡ经ＨｉｎｄⅢ酶切、电泳、转移至ＮＣ膜的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交，发现ＢｍＮＰＶＤＮＡ的ＨｉｎｄⅢＤ片段呈阳性。从ＢｍＮＰＶ基因组中分离出１０．４ｋｂ的ＨｉｎｄⅢＤ片段，用ＥｃｏＲＩ酶切得到ＨｉｎｄⅢ－ＥｃｏＲＩ２．２ｋｂ、ＥｃｏＲＩ１．４ｋｂ和ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ６．８ｋｂ３个片段，分别克隆于ｐＵＣ１９中，命名为ｐＵＨＥ２．２、ｐＵＥ１．４和ｐＵＥＨ６．８。经双链测序并与ＡｃＮＰＶ相关基因序列进行比较，发现ｌｅｆ－１基因被克隆于ｐＵＨＥ２．２中，ＤＡ２６基因克隆于ｐＵＥＨ６．８中。从所测定的ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因的启动子及５＇端部分序列来看，它们在ＡｃＮＰＶ和ＢｍＮＰＶ之间有极高的同源性。 相似文献
13.
以大白菜成青２号为材料,从萌发５天的无菌苗下胚轴分离原生质体,然后以附加８．２％葡萄糖,０．４ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．４ｍｇ／ＬＮＡＡ和０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的改良ＫＭ８ｐ液体培养基进行浅层培养．培养１３天后,用含５．２％葡萄糖的ＫＭ８ｐ培养基以１∶１进行稀释．４～６周后,再生细胞分裂并形成愈伤组织,直径约０．４～０．５ｍｍ的愈伤组织经ＭＳ培养基（附加２％蔗糖,０．８％的琼脂,１．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ,０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ和０．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ）诱导植株分化．５９％的愈伤组织可分化形成芽,分化的芽经诱导生根发育成完整的植株．０．８ｍｇ／ＬＩＢＡ和４００ｍｇ／Ｌ的羧苄青霉素对分化再生有促进作用． 相似文献
14.
辣根过氧化物酶的分离制备和纯化 总被引：4，自引：0，他引：4
从辣根块茎分离和纯化了辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）,纯化程度包括匀浆、加热、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和ＣＭ－２３阴离子交换层析。纯化的ＨＲＰ的Ｋ４值为２．５×１０＾５,ＲＺ值值３．００,酶的比活４０６Ｕ／ｍｇ蛋白。它的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示一条带,酶亚基分子量为４０ＫＤ,等电聚焦电泳呈现三条带,酶不舔生染色呈现多条带,表明有同工酶存在。对酶的分离纯化作了一些改进,如加氨水保持ＰＨ值,加入５ｍｍｏｌ／ 相似文献
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枯草杆菌AS1.398制备中性蛋白酶的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
本文研究了枯草杆菌ＡＳ１．３９８发酵培养制备中性蛋白酶。对发酵培养基配比，培养条件，金属离子的影响等进行了摇瓶试验。制备的ＡＳ１．３９８中性蛋白酶有如下性质：最适ｐＨ７．２－７．４，在ｐＨ６．５－８．０稳定。最适温度４２￣４４℃，３５℃下处理２小时能保持约８５％酶活力６０℃下１０分钟酶完全失活，此酶被ＥＤＴＡ和Ｃｕ＾２＋所抑制。 相似文献
16.
以大白菜成青２号为材料,从萌发５天的无菌苗下胚轴分离原生质体,然后以附加８．２％葡萄糖,０．４ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,０．４ｍｇ／ＬＮＡＡ和０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的改良的ＫＭ８ｐ液体培养基进行浅层培养,培养１３天后,用含５．８％葡萄糖的ＫＭ８ｐ培养基以１：１进行稀释,４～６周后,再生细胞分裂并形成愈伤组织,直径约０．４～０．５ｍｍ的愈伤组织经ＭＳ培养基（附加２％蔗糖,０．８％的琼脂,１．５ｍｇ／Ｌ６－ 相似文献
17.
用浓度为１０＾８ｃｆｕ／ｍｌ，Ｘ．ｃ．ｐｖ．ｃｉｔｒｉ全胞活菌免疫家兔，得以效价为１／２５６０～１／１０２４０的抗血清，应用斑点酶联法（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测Ｘ．ｃ．ｐｖ．ｃｉｔｒｉ表明，抗血清经交叉吸收后特异性高，适宜稀释倍数为１：１０＾４～１０＾６，检测灵敏度度要达１０＾４ｃｕｆ／ｍｌ。加有０．５％Ｔｗｅｅｎ２０或０．５％Ｔｗｅｅｎ８０或０．１％ｔｒｉｔｏｎＸ－１００的ＴＢＳ液为适宜封闭液， 相似文献
18.
影响草莓花药培养效率的若干因素 总被引：12，自引：0，他引：12
本试验结果表明，基本培养基的愈伤组织诱导率，Ｂ５明显地高于ＭＳ、Ｎ６、Ｅ１。〔ＮＯ３＾－〕／〔ＮＨ４＾＋〕值大，有利于愈伤组织的诱导。乳糖作为碳源，其诱导愈伤组织的效果明显优于蔗糖。花药愈伤组织诱导率的高低与基因型和培养基有关。ＭＳ＋ＢＡ２．０ｍｇ·Ｌ＾－１＋ＩＡＡ４．０ｍｇ·Ｌ＾－１＋ＺＴ２．０ｍｇ·Ｌ＾－１适于作不定芽的分化培养基，其分化率达４０．００％。 相似文献
19.
异戊烯基腺嘌呤核苷（iPA）的间接酶联免疫吸附测定法 总被引：5，自引：0，他引：5
以ｉＰＡ－ＢＳＡ为免疫抗原制备了兔抗血清,与其它ｉＰＡ类似物的交叉反应率均低于５％,抗体－抗原亲和常数为６．２６＊１０＾６Ｌ．ｍｏｌ＾－１。利用此抗体与生物素－亲和素标记系统建立了ｉＰＡ的间接酶联免疫吸附测定法,检测线性范围为０．８－１０００ｎｇ．ｍＬ＾－１。 相似文献
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纤维素酶制备工艺的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
将绿色木霉变异菌株４１３１的发酵液通过（ＮＨ４）２ＳＯ４盐析等一系列工艺步骤制得纤维粗酶,其比活力为０．２８ｕ／ｍｇ。粗酶经过Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５柱层析纯化,纯化后酶比活力为１．３６ｕ／ｍｇ,回收率为４１．６％。将上述纯化的纤维素酶再经过ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５柱层析分离,得到了纤维素酶纯化组合组分,其比活力为７．２８ｕ／ｍｇ,回收率为３２．８％。 相似文献