ST1肠毒素融合蛋白的纯化及部分特性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘兴汉  王莉林 《中国畜禽传染病》1998,20(1):23-26

用ＳＡｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０凝胶和ＥＤ－３２离子交换层析，从重组菌ＰＧＥＭＳＴ２株内分离，纯化ＳＴ１，肠毒素融合蛋白，回收的ＳＴ１肠毒素融合蛋白占细菌总蛋白的３１．５％。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳条件呈一条蛋白带。ＳＴ１肠毒素融合蛋白不溶于甲醇，乳鼠试验阴性。  相似文献   

表达大肠杆菌肠毒素ST1-LTB融合蛋白双价基因工程菌株的构建   总被引：4，自引：0，他引：4  

卫广森  许崇波 《中国兽药杂志》1999,33(2):1-5

重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后,其表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测,结果表明重组菌株可以高效表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１－ＬＴＢ 融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的３３．２１％ ,而且已失去天然ＳＴ１肠毒素生物毒性。用从ＩＰＴＧ 诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗１．５ＭＬＤ 的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ,ＳＴ＋ ,ＬＴ＋ ）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ＳＴ１肠毒素的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株  相似文献   

大肠杆菌肠毒素ST1-LTB融合基因的高效表达   总被引：13，自引：0，他引：13  

许崇波  卫广森  王卓  于凤芹  冯书章  王文成  马成国  李尚波  张万林 《畜牧兽医学报》1999,30(3):249-253

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１,回收０８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因,再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切,然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒,得到了理想重组质粒ｐＸＥＴＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后,其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测,结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的３３２１％,而且无天然ＳＴ１生物毒性。  相似文献   

ST1肠毒素基因的合成,克隆及其融合蛋白的高效表达     

刘兴汉  王莉林 《中国畜禽传染病》1998,20(4):221-222

用ＤＮＡ合成仪合成了编码ＳＴ１肠毒素第５８到７２位氨基酸残基的ＤＮＡ片段，并将其与表达融合蛋白的载体ＰＧＥＭＥＸ－１重组，转化受体菌ＪＭ１０９（ＤＥ－３）筛选出重组克隆经过１ＰＴＧ４小时诱导，ＳＴ１融合蛋白的产量超过细菌蛋白总量的４０％，最高达５９．９％。  相似文献   

ST_1肠毒素基因的合成、克隆及其融合蛋白的高效表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘兴汉  王莉林  张绍杰  初晓白 《中国预防兽医学报》1998,(4)

用ＤＮＡ合成仪合成了编码ＳＴ１肠毒素第５８到７２位氨基酸残基的ＤＮＡ片段,并将其与表达融合蛋白的载体ＰＧＥＭＥＸ－１重组,转化受体菌ＪＭ１０９（ＤＥ－３）。筛选出的重组克隆经过１ＰＴＧ４小时诱导,ＳＴ１融合蛋白的产量超过超过细菌蛋白总量的４０％,最高达５９．９％。  相似文献   

大肠杆菌肠毒素ST1—LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究   总被引：9，自引：1，他引：8  

许崇波  卫广森 《中国预防兽医学报》1999,21(1):43-45

已构建的能表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１ＬＴＢ融合蛋白的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原,免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗１５ＭＬＤ的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ,ＳＴ＋,ＬＴ＋）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ＳＴ１的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。  相似文献   

大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ融合基因的构建及其免疫原性研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

许崇波  卫广森  冯书章  刘子  刘晓明  黄培堂  岳军明 《畜牧兽医学报》1997,(4)

用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和Ｂｇ１Ⅱ双酶切质粒ｐＢＳＴ２－６，获得了大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ（ＳＴ１）基因，再将含ＬａｃＺ基因（编码β－半乳糖苷酶）的载体ｐＵＣ１８用ＢａｍＨＩ酶切、碱性磷酸酶处理，然后与ＳＴ１基因通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转化至受体菌ＤＨ５α中。通过菌落原位杂交筛选，共筛选出５３个ＳＴ１基因探针杂交阳性的重组子，对其中一个重组子ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）进行限制性核酸内切酶酶切分析和核苷酸序列分析，证明重组质粒ｐＸＳＴ１含有２个正向串连在一起的ＳＴ１基因，而且融合在ＬａｃＺ基因的上游，具有正确的阅读框架。又ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）菌株能在含Ｘ－Ｇａｌ的ＬＢ平板上长成蓝色菌落，而且ＥＬＩＳＡ也检测到ＳＴ１融合蛋白，这表明该菌株能表达具有β－半乳糖苷酶活性的大肠杆菌ＳＴ１—β－半乳糖苷酶融合蛋白。免疫实验结果表明，重组菌株ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）安全无毒，表达的ＳＴ１融合蛋白能够诱发ＢＡＬＢ／ｃ鼠产生抗体，该抗体具有中和天然ＳＴ１肠毒素的毒性作用，这表明ＤＨ５α（ｐＸＴ１）可以作为预防幼畜腹泻的菌苗候选株。  相似文献   

类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体B亚单位基因的表达与鉴定   总被引：8，自引：0，他引：8  

成大荣  徐建生 《中国预防兽医学报》1999,21(5):349-353

将由 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增并克隆在ｐ Ｕ Ｃ１８ 质粒载体中的ｓｌｔⅡｅ Ｂ基因切出,并按预定的阅读框架插入表达性质粒载体 ｐ Ｇ Ｅ Ｘ６ｐ１ 中的谷胱苷肽转移酶（ Ｇ Ｓ Ｔ）基因的下游。重组质粒 ｐｐｐｓｌｔⅡｅ Ｂ在大肠杆菌 Ｂ Ｌ２１ 中以融合蛋白的形式表达 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ蛋白（命名为 Ｇ Ｓ Ｔ Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ）,即 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ蛋白（７５６８ｋ Ｄ）与谷胱苷肽转移酶（２７３３５ｋ Ｄ）相连组成分子量为 ３４８８５ｋ Ｄ 的融合蛋白。通过对重组大肠杆菌 Ｐ Ｐ Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ的菌体裂解物的 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 电泳分析,以及根据抗原抗体结合反应的免疫学特性,通过 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 鉴定,重组大肠杆菌 Ｐ Ｐ Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ（含有重组质粒 ｐｐｓｌｔⅡｅ Ｂ的大肠杆菌 Ｂ Ｌ２１）可以大量表达融合蛋白形式的 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ。根据 Ｇ Ｓ Ｔ 可与其底物谷胱苷肽结合的特性,用谷胱苷肽结合的 Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ Ｂ制备的亲和凝胶纯化表达产物,纯化的表达产物经 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ,可以鉴定到分子量约为 ３５ｋ Ｄ 的蛋白条带,这与融合蛋白形式的 Ｓ Ｌ ＴⅡｅ Ｂ分子量（３４８８５ｋ Ｄ）相当。  相似文献   

大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ基因核苷酸序列分析与免疫原性研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

许崇波  冯书章  刘子  黄培堂  刘晓明 《中国兽医学报》1996,(4)

对构建的重组质粒ｐＸＳＴ１（含有耐热性肠毒素ＳＴ１和ＬａｃＺ基因）进行核苷酸序列分析的结果表明，该质粒中含有２个正向串联在一起的ＳＴ１基因，且融合在ＬａｃＺ基因的上游，具有正确的阅读框架。免疫学试验结果表明，构建的ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）重组菌株安全无毒。该重组菌株表达的ＳＴ１融合蛋白能够诱发ＢＡＬＢ／ｃ鼠产生抗体，且抗体能中和天然肠毒素ＳＴ１活性，具有较好的免疫保护作用。由此表明，ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）工程菌株可作为预防幼畜腹泻的菌苗候选株  相似文献   

表达CPB—ST融合蛋白工程菌株的免疫原性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

王玉炯  许崇波 《中国兽医科技》1998,28(12):20-22

已构建的能表达产气荚膜菌β－毒素和大肠埃希氏菌ＳＴ融合蛋白的基因工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３,ｐＥＣＢ－ＳＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌株中提取的包涵体和经甲醛灭活的工艺菌株全菌体制备抗原免疫小白鼠,攻毒试验结果表明,免疫小白鼠能分别抵抗１ＭＬＤ的Ｂ型产气荚膜梭菌强毒株和产ＳＴ的大肠埃希氏菌工程菌株ＨＢ１０１（ｐＳＬＭ００４）的攻击。  相似文献   

混合保护液和冻前处理方法对小鼠胚胎一步冷冻效果的影响     

孙新明  王光亚 《中国兽医学报》1996,16(1):86-90

选用Ａ￣Ｅ５种混合保护液：Ａ．二甲亚砜（ＤＭＳＯ）＋乙醇（ＥＧ），Ｂ．甘油（ＧＬ）＋丙二醇（ＰＧ），Ｃ．ＧＬ＋ＥＧ，Ｄ．ＧＬ＋ＤＭＳＯ，Ｅ．ＰＧ＋ＥＦ，以２种冻前处理方法，对小鼠桑椹胚和囊胚进行一步冷冻，冷冻混合保护液中各种保护剂浓度均为２５％。法的冻前平衡液为ＶＳ２的对倍稀释液；法的冻前平衡液中，前一种保护剂浓度为１０％，后一种保护剂浓度为２０％。胚胎于室温（２０℃）下在ＶＳ１中平衡５ｍｉｎ或Ｖ  相似文献   

猪生殖-呼吸道综合征病毒CH-1_株N基因的原核表达     

仇华吉  童光志  郭宝清  王柳  张绍杰  王玫  蔡雪晖  于力  刘宝全 《中国预防兽医学报》1999,(1)

将ＰＲＲＳＶＣＨ１ａ株Ｎ基因用ＥｃｏＲＩ和ＰｓｔＩ双酶切从重组质粒ｐＵＣ１８ＯＲＦ７切下后，插入到原核表达载体ｐＢＶ２２０的ＰＲ、ＰＬ启动子下游，得到重组表达质粒ｐＢＶ２２０ＯＲＦ７。转化了ｐＢＶ２２０ＯＲＦ７的大肠杆菌ＪＭ８３经诱导培养后，用ＳＤＳＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达产物。结果表明ＰＲＲＳＶＣＨ１ａ株的Ｎ基因在原核载体上得到高效表达，表达产物占菌体总蛋白的１５３％。表达蛋白可望成为有价值的ＰＲＲＳ诊断抗原。  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的高效表达   总被引：8，自引：1，他引：7  

宋延华  刘福安 《中国兽医学报》1999,19(5):421-424

将鸡传染性支气管炎病毒（ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｓ１ 基因 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆至含有起始密码 Ａ Ｔ Ｇ 的转移载体 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４,构建成重组转移质粒 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４ Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ,再与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ Ｓ Ｖ Ｉ－ Ｇ Ｄ Ｎ Ａ（ Ｏ Ｃ Ｃ－ , ｇａｌ＋ ）共转染 草地夜蛾（ Ｓｆ９） 细胞, 经空斑纯化得 到已插入 Ｓ１ 基 因并能形成多角体 的重组病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 。以重组毒株感染 Ｔｎ５ Ｂ１ 细胞,在不同时间收取感染了病毒的细胞进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 与 Ｗ ｅｓｔｅｒｎ 印迹检测。 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 在感染的细胞中高效表达了 Ｓ１ 基因,表达产物为约 １００ ０００ 的融合蛋白,与预计的表达修饰后的产物大小相符,推测此蛋白已糖基化。 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ凝胶薄层色谱分析结果显示,感染病毒后 ４８、７２、９６ ｈ, Ｓ１ 蛋白分别占细胞内总蛋白量的 ２８７％ 、３５８％ 、３７１％ 。  相似文献   

抗伪狂犬病病毒单克隆抗体的特性鉴定     

阎高峰  李健强 《青海畜牧兽医杂志》1999,29(4):20-22

通过ＳＤＳＰＡＧＥ、免疫印迹和相加ＥＬＩＳＡ分析了五株抗伪狂犬病病毒杂交瘤细胞系所分泌的单抗５Ｈ２、２Ｅ６、２Ｇ１１、３Ｄ１０和１Ｂ５（均为ＩｇＧ１）各自所识别的病毒多肽。结果证明：单抗５Ｈ２、２Ｅ６、２Ｇ１１和３Ｄ１０识别伪狂犬病病毒９７ＫＤ多肽，单抗１Ｂ５识别５４ＫＤ多肽。相加ＥＬＩＳＡ证实单抗５Ｈ２、２Ｅ６、２Ｇ１１和３Ｄ１０识别同一多肽的重叠表位或邻近表位。  相似文献   

猪生殖-呼吸道综合征国内分离毒株的病毒纯化及其结构蛋白分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

蔡雪晖  刘文兴  郭宝清  李成  谷守林  柴文君  徐哮 《中国预防兽医学报》1999,(4)

本研究主要对猪生殖呼吸道综合征（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ） 国内分离毒株（ Ｃ Ｈ Ｉａ） 进行了病毒纯化及其结构蛋白的分析。选用聚乙二醇（ Ｐ Ｅ Ｇ６０００） 沉淀和差速离心法粗提了经 Ｍａｒｃ１４５ 细胞系增殖的猪生殖呼吸道综合征病毒（ Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ） 。并采用非线性蔗糖密度梯度离心法纯化了 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ, 经免疫电镜观察纯化病毒, 发现有较多的胶体金颗粒吸附在直径为４２ ～７８ｎｍ 的病毒粒子周围。经 Ｄｏｔ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 测定纯化病毒的滴度可达１ １６００ 以上, 并利用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 和 Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 两种方法对国内分离毒株（ Ｃ Ｈ Ｉａ） 与欧洲型（ Ｌｅｌｙｓｔａｄ） 、美洲型（ Ｖ Ｒ２３３２） 等参考毒株的病毒结构蛋白组成和部分抗原特性进行了初步的研究。测得国内分离毒株主要结构蛋白的分子量为１４５ Ｋ Ｄ,１９２ Ｋ Ｄ 和２６３ Ｋ Ｄ, 并均能被 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 的高免血清识别, 这与国外的同类报道很相似。  相似文献   

bcl-2在鸡马立氏克氏病肿瘤中的表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

张书霞  陈万芳 《动物医学进展》1999,(3)

用来克亨 Ｓ Ｐ Ｆ鸡复制马立克氏病（ Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ， Ｍ Ｄ）肿瘤模型，取肿瘤和相应正常组织，液氮保存。 Ａ Ｇ Ｐ Ｃ（ Ａｃｉｄ Ｇｕａｎｉｄｉｎｉｕｍ Ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ Ｐｈｅｎｏｌ Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ）法提取组织总 Ｒ Ｎ Ａ（ Ｔ Ｒ Ｎ Ａ），紫外测定其浓度，甲醛变性胶电泳观察其纯度。将一个含鸡 ｂｃｌ２ １．２ ｋｂ 片段的质粒（ Ｐ Ｔ Ｔ Ｂ Ｃ１），经转化扩增，提取质粒 Ｄ Ｎ Ａ，限制性内切酶（ Ｒ Ｅ）消化，回收纯化ｂｃｌ２片段，放射性 α３２ Ｐ标记，制成探针。通过 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 分子交杂检测 Ｍ Ｄ 肿瘤组织中ｂｃｌ２ 的表达，并与相应的正常组织比较。结果：①鸡 Ｍ Ｄ 肿瘤组织和相应正常组织中均有 ｂｃｌ２ 的表达；② Ｍ Ｄ 肿瘤组织中ｂｃｌ２ 的表达显著高于相应的正常组织。结合已进行的凋亡研究表明，ｂｃｌ２ 表达产物通过阻遏细胞凋亡促进 Ｍ Ｄ 淋巴瘤的形成。  相似文献   

鸡减蛋综合征病毒DNA结合蛋白的基因结构及同源分析     

曾力宇  金奇 《中国兽医学报》1997,17(5):423-426

从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）ＡＡ－２株，经常规方法提取其病毒核酸后，构建了限制性内切酶ＰｓｔⅠ及ＨｉｎｄⅢ水解片段的基因文库。对其中ＨｉｎｄⅢ－Ｆ片段（５２．９～５８．９ｍｕ）的正反２条链的序列测定发现，其反链存在１个编码容量为３８７个氨基酸（ａａ）的开放读码框架（ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ，ＯＲＦ），经Ｇｅｎｅｂａｎｋ／ＥＭＢＬ同源搜寻后证实其编码产物为ＥＤＳＶ的ＤＮＡ结合蛋白（ＤＢＰ）。与其他腺病毒ＤＢＰ的氨基酸序列进行同源比较，其Ｎ端同源性在１９．０％～４６．２％之间，Ｃ端同源性在２７．７％～６０．４％之间。腺病毒ＤＢＰ的３个保守序列ＣＲ１，ＣＲ２，ＣＲ３在ＥＤＳＶＤＢＰ中有较大变化，但ＥＤＳＶＤＢＰ的锌指框架（Ｚｎ２＋ｆｉｎｇｅｒｍｏｔｉｆ）却保留了对其功能必需的残基。  相似文献   

禽病原性大肠杆菌6种血清型分离株外膜蛋白型的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

赵香汝  杨汉春 《中国兽医杂志》1999,25(9):3-5

从病鸡中分离的６ 种血清型（ Ｏ２、 Ｏ４６、 Ｏ１８、 Ｏ１２１、 Ｏ７６、 Ｏ１３１）及５ 种标准血清型（ Ｏ１、 Ｏ１５、 Ｏ３５、 Ｏ３６、 Ｏ７８）大肠杆菌中提取外膜蛋白（ Ｏｕｔｅｒ ｍ ｅｍ ｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ），经 Ｓ Ｄ Ｓ－ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 分析表明，分离株 Ｏ７６、 Ｏ１３１及标准株 Ｏ１、 Ｏ３５的外膜蛋白型由２ 条带组成，为 Ｏ Ｍ Ｐ－ １ 型；分离株 Ｏ２、 Ｏ４６、 Ｏ１８、 Ｏ１２１和标准株 Ｏ１５、 Ｏ３６、 Ｏ７８的外膜蛋白型由３ 条带组成，为 Ｏ Ｍ Ｐ－ ２ 型，结果表明，不同血清型菌株之间有相同的 Ｏ Ｍ Ｐ型。  相似文献   

超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟和体外受精的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

成国祥  王玉阁 《中国兽医学报》1997,17(1):57-60

以ＴＣＭ１９９＋１０ｍｍｏｌ／ＬＨＥＰＥＳ＋青霉素（６ｍｇ／Ｌ）＋链霉素（５ｍｇ／Ｌ）为基础培养液（ＢＭ），再分别加入不同成分，配成５种卵母细胞成熟液：（Ａ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ；（Ｂ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ（２．５ｍｇ／Ｌ）；（Ｃ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２（１ｍｇ／Ｌ）；（Ｄ）ＢＭ＋１０％ＦＣＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２；（Ｅ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２＋颗粒细胞（１．５×１０６～３．０×１０６个／ｍＬ）。在３８．５℃、５％ＣＯ２下培养２６ｈ，排卵后第１天卵巢卵母细胞体外成熟率分别为６７．６７％（２０／３０），６０．４２％（２９／４８），８３．６７％（４１／４９）和８０．８２％（５９／７３），排卵后第５天卵巢卵母细胞，在培液Ｄ中体外成熟率为７１．４３％（４５／６３）。排卵后第１天的９８枚卵巢卵母细胞，体外成熟体外受精卵裂率为２１．４３％，２１枚２细胞胚移植５头受体获２头羔羊。研究表明，超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟卵母细胞，并可通过体外受精获得试管山羊  相似文献   

禽源大肠杆菌O2,O78分离株外膜蛋白型的研究   总被引：10，自引：0，他引：10  

高菘  刘秀梵 《中国兽医学报》1996,16(3):239-243

从１７个禽大肠杆菌病病例的Ｏ２、Ｏ７８分离株提取的主要外膜蛋白（ＯＭＦ），在ＳＤＳ－ｐＡＧＥ中出现了２个ＯＭＰ型。其中，９个Ｏ２分离株属２个ＯＭＰ型，８个Ｏ７８分离株均属其中的１个ＯＭＰ型。结果表明，分离到的Ｏ２、Ｏ７８大肠杆菌具有多样性的ＯＭＰ型，而且两者存在着共同的ＯＭＰ型。  相似文献