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两种甜瓜病毒寿光分离物的分子检测与鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus,MNSV)及瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)近年来在瓜类种植区均大面积发生,危害较为严重,已成为制约甜瓜生产的重要因素。本研究广泛收集疑似感染MNSV及CCYV的甜瓜病叶,从中提取植物总RNA进行RT-PCR扩增,将产物分别连接到pEASYT1Simple克隆载体上,对含有目的片段的重组子进行测序及比对分析。结果显示得到了与预期结果一致的DNA序列,其扩增产物大小分别为673bp(MNSV)和877bp(CCYV)。同源性分析结果表明,MNSV和CCYV寿光分离物的核苷酸序列与中国其他地区或一些国家已报道的分离物同源性达99%~100%。 相似文献
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在广东发现了可能被番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒侵染的西瓜,采用ELISA和RT-PCR法对该西瓜病样进行了检测,西瓜病叶粗汁液不与番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)和西瓜银斑驳病毒(Watermelon silver mottle virus,WSMoV)的血清发生反应;利用引物J13/UHP通过RT-PCR可以扩增出约1400 bp的基因片段,该片段包括一个840 bp的核衣壳蛋白ORF,其推导的氨基酸序列与已报道的Melon yellow spot virus(MYSV)NP基因氨基酸序列的同源率都为99%,进化树分析表明侵染广东西瓜的病毒(命名为MYSV-GZ)属于Tospovirus的MYSV血清组。 相似文献
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正甜瓜坏死斑点病由甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus,MNSV)引起,最早报道于日本(Kishi,1966),中国于2008年首次在江苏省海门市的甜瓜上发现,随后在山东省寿光、泰安等市陆续被报道,严重影响瓜类的品质与质量。吴会杰和古勤生(2017)分析了MNSV-HM和MNSV-Shangdong甜瓜分离物基因组,进化分析结果显示二者亲缘关系较近,可能具有相同来源。近年来,广西壮族自治区甜瓜生产发展较快,病毒病发生有逐年加重之势,因此本研究 相似文献
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甜瓜黄斑病毒三亚分离物S RNA的分子特征 总被引：1，自引：1，他引：0
甜瓜黄斑病毒（Melon yellow spot virus, MYSV）首次发生于日本,造成甜瓜和黄瓜的严重损失,Kato等系统地研究了病毒的传播方式、寄主范围、超微结构和基因组特征,认为MYSV应为番茄斑萎病毒属（Tospovirus）的1个新种［1,2］。2006年以来,台湾的西瓜［3］和黄瓜［4］上相继发现MYSV。2009年春季,古勤生在海南三亚的保护地甜瓜上发现一种新发生的病毒病,发病率30%~100%,病株出现系统性黄化坏死斑点,为MYSV侵染的典型症状,结合分子检测结果判定病原为MYSV。 相似文献
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《植物病理学报》2017,(2)
甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus,MNSV)是我国甜瓜病毒新纪录种,主要靠种子和土壤真菌传播。本文以MNSV山东分离物(MNSV-Shandong)为材料,利用RT-PCR和RACE技术获得了MNSV山东分离物基因组,并分析了其基因组成和进化关系。MNSV-Shandong基因组为4 267 nt,编码5个ORF,参与复制的p29和p89基因分别编码29 kDa和89 kDa蛋白质;p42基因编码的外壳蛋白为42 kDa;p7A和p7B基因编码的移动蛋白均为7 kDa。系统进化树表明MNSV-Shandong与海门分离物(MNSV-HM)聚在一起,与欧洲、部分亚洲及北美洲在一个分支上,与日本分离物距离较远。本文为国内首次报道MNSV山东分离物基因组。 相似文献
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应用特异性引物MYSV-L-F和MYSV-L-R对海南5个市县采集的150份疑似感染病毒病的黄瓜样品进行RT-PCR检测,在三亚、乐东和东方等3个市县的18份样品中检测到甜瓜黄斑病毒(Melon yellow spot virus, MYSV)。选取采自三亚的分离物C29(MYSV-Hainan)进行MYSV全基因组克隆及序列分析,结果表明:该分离物的L RNA、M RNA和S RNA基因组全长分别为8 918 nt、4 815 nt和3 257 nt,与已知MYSV分离物的核苷酸相似性分别为97.4%~97.7%、96.2%~97.9%和94.8%~99.8%,系统进化关系分析与相似性分析一致,序列相似值越高,系统进化关系越近。 相似文献
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应用特异性引物MYSV-L-F和MYSV-L-R对海南5个市县采集的150份疑似感染病毒病的黄瓜样品进行RT-PCR检测,在三亚、乐东和东方等3个市县的18份样品中检测到甜瓜黄斑病毒(Melon yellow spot virus, MYSV)。选取采自三亚的分离物C29(MYSV-Hainan)进行MYSV全基因组克隆及序列分析,结果表明:该分离物的L RNA、M RNA和S RNA基因组全长分别为8 918 nt、4 815 nt和3 257 nt,与已知MYSV分离物的核苷酸相似性分别为97.4%~97.7%、96.2%~97.9%和94.8%~99.8%,系统进化关系分析与相似性分析一致,序列相似值越高,系统进化关系越近。 相似文献
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侵染云南烟草的番茄环纹斑点病毒N基因的分子变异分析 总被引：1，自引：0，他引：1
应用电镜观察和ELISA检测从云南11个县（市）烟草种植区采集的烟草上检测到番茄环纹斑点病毒（Tomato zonate spot virus, TZSV）。根据TZSV N基因设计引物扩增得到了31个TZSV分离物N基因全序列。测序分析表明,31个TZSV N基因核苷酸序列与GenBank中报道的序列相似性在94.9%~98%之间,其推导的氨基酸序列同源性为98.2%~99.3%。构建系统进化树发现云南不同地区的TZSV分离物存在一定差异。氨基酸序列比较发现,文山分离物和西畴分离物具有2个该地区独有的氨基酸位点。 相似文献
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Shigeharu Takeuchi Yoshifumi Shimomoto Koichi Ishikawa 《Journal of General Plant Pathology》2009,75(2):154-156
A new disease causing necrotic spots and yellowing on leaves of balsam pear (Momordica charantia) was found in Kochi Prefecture, Japan. In this study, we identified the causal pathogen as Melon yellow spot virus (MYSV)
based on morphology of virus particles, serology, and the nucleotide sequence of the nucleocapsid protein gene. This is the
first report of natural infection of balsam pear by MYSV. We propose the name spotted wilt for this new disease of balsam
pear. 相似文献
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We report a new strain of Melon necrotic spot virus (MNSV) that is unable to systemically infect Cucumis melo. A spherical virus (W-isolate), about 30 nm in diameter like a carmovirus, was isolated from watermelons with necrotic symptoms. The W-isolate had little serological similarity to MNSV, and it did not cause any symptoms in six melon cultivars susceptible to MNSV; however, the host range of the W-isolate was limited exclusively to cucurbitaceous plants, and transmission by O. bornovanus was confirmed. Its genomic structure was identical to that of MNSV, and its p89 protein and coat protein (CP) showed 81.6 to 83.2% and 74.1 to 75.1% identity to those of MNSV, respectively. Analysis of protoplast showed that the W-isolate replicated in melons at the single-cell level. Furthermore, chimeric clones carrying the CP of MNSV induced necrotic spots in melons. These results suggested that the absence of symptoms in melons was due to a lack of ability of the W-isolate to move from cell to cell. In view of these findings, we propose that the new isolate should be classified as a novel MNSV watermelon strain. 相似文献
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From October 2017 to April 2019, a total of 290 suspected virus-infected watermelon leaf samples were collected in 7 urban areas (Wenchang, Wanning, Lingshui, Sanya, Ledong, Dongfang, Changjiang) in Hainan island. Nine viruses were detected including MYSV, WSMoV, CCYV, CMV, TMV, CGMMV, ZYMV, WMV and PRSV by small RNA deep sequencing and RT-PCR. The detection rates of MYSV, CCYV, CGMMV, ZYMV, CMV, WSMoV, PRSV, TMV and WMV were 66.90%, 25.86%, 22.07%, 17.59%, 10.00%, 7.59%, 5.52%, 2.76% and 1.03% respectively. The co-infection rate of virus was 56.56% and 14 types of mixed infections were detected. The results of this study clarify the identification and distribution of waterme-lon-infecting viruses in Hainan. 相似文献