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鸭瘟灭活疫苗效力试验和安全试验 总被引：2，自引：1，他引：1
将已建立的鸭瘟病毒(DPV)AV1221株基础种毒经鸭胚繁殖、收集胚液病毒、0.2%甲醛溶液灭活后,与矿物油佐剂乳化制备了3批鸭瘟灭活疫苗.成鸭的免疫攻毒测定,疫苗最小免疫剂量为0.12 mL,确定使用剂量为每羽份0.5 mL.单剂量、单剂量重复和超剂量安全试验结果显示,疫苗不引起产蛋鸭的全身不良反应和明显的局部反应.疫苗的免疫攻毒试验结果表明,疫苗在不同品种的成鸭中,使用不同的免疫途径,均能诱导产生80%以上保护;在雏鸭中,经二次免疫也能够诱导产生80%以上保护.疫苗一次免疫鸭后,不同时间诱导产生的中和抗体滴度(GMT)分别是,7 d为1:3.2、10 d为1:4.6、14 d为1:8,21 d、30 d和60 d均为1:7;免后10 d可以产生80%攻毒保护,14 d和21 d可产生完全保护.疫苗的免疫持续期试验结果表明,成鸭经1次免疫后150 d,雏鸭经二次免疫后60 d均可维持80%以上保护. 相似文献
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为建立稳定表达乙型脑炎病毒(JEV) NS1蛋白的真核细胞系,本研究将编码JEV NS1蛋白的人工合成基因克隆到真核表达载体pCAGG-TK-neo中,构建了重组质粒pCAGG-opti-NS1.重组质粒经脂质体转染RK-13细胞,以含G418的选择性培养基选择培养,经细胞克隆纯化,以间接免疫荧光试验(IEA)筛选表达目的基因的细胞.结果表明,转染的RK-13细胞经G418加压及IFA筛选后,获得表达JEV NS1蛋白的阳性RK-13细胞系.经RT-PCR、western blot和IFA鉴定,该细胞系在传代至第15代后仍然可以稳定表达NS1蛋白.本实验获得了能够稳定表达JEV NS1蛋白的细胞系,为进一步开展JEV相关的研究奠定了基础. 相似文献
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喹烯酮合成方法的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用邻硝基苯胺为起始原料,经次氯酸钠氧化后,再与乙酰丙酮、苯甲醛反应后得到喹烯酮.反应操作简单,且中间不需纯化,总收率为51.5%.产品经1H-NMR确认. 相似文献
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加入WTO后,随着我国农业产业结构的进一步调整,粮、经二元种植结构向着粮、经、草三元种植结构的转变,已经成为农村经济的必然选择.草产业中,苜蓿当为首选品种.礼县为退耕还林(草)的实施县之一,种植苜蓿当是农民脱贫增收的一个主要选择. 相似文献
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本研究建立了饲料中氢溴酸常山酮的UPLC-MS/MS分析方法.样品经乙腈提取,离心后经正己烷除脂净化,氮气吹干后,50％甲醇溶液复溶,UPLC-MS/MS分析.结果表明,氢溴酸常山酮在20.0～500.0 μg/L浓度范围内线性关系良好,r2=0.999 1.以浓缩饲料、配合饲料、预混料为添加基质,其回收率在60％～120％,检出限为25.0μg/kg,定量限为50.0μg/kg.结论显示,本方法灵敏度高,专属性好,操作简单,结果可靠,可满足饲料中氢溴酸常山酮的分析检测. 相似文献
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根据NCBI上已发表的序列自行设计引物,通过RT-PCR从北京鸭脾脏的总RNA中扩增得到鸭MHCⅡα基因,将其克隆至pMD18-T,经酶切分析及序列测定鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pET-28a.转化大肠杆菌BL21中诱导表达.电洗脱纯化蛋白,用于免疫昆明小鼠制备多克隆抗体.结果表明:克隆了鸭MHCⅡα基因,大小为633 bp,经核苷酸测序与已登录的基因序列同源性为99%;成功构建了原核表达载体,融合蛋白得到了高效表达且纯化后纯度可达90%,制备的鼠抗鸭MHCⅡα多克隆抗体经酶联免疫吸附试验(ELISA)与免疫印迹法(Western-blot)证实了抗体的效价高、特异性强,研究结果为研究鸭MHCⅡ分子奠定了基础. 相似文献
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UPLC-MS/MS快速测定鸡肉中金刚烷胺和氟喹诺酮类药物残留 总被引：3，自引：1，他引：2
建立了鸡肉中金刚烷胺和八种氟喹诺酮类药物的UPLC-MS/MS测定方法.鸡肉样品经QuEChERS萃取剂提取,QuEChERS净化剂净化后,经氮气流吹干浓缩后进行测定,稳定同位素内标法定量.结果表明,金刚烷胺的测定线性范围为0.2～10.0 μg/kg.在0.2、1.0、10.0 μg/kg三个浓度的回收率为80％～120％;氟喹诺酮类药物的测定线性范围为2～ 100 μg/kg,在2、10、100μg/kg三个浓度的回收率为80％～120％,批内、批间精密度小于20％.该方法简便、快速、灵敏,适用于鸡肉中金刚烷胺和氟喹诺酮类药物残留的大批量筛选和定量测定. 相似文献
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2008年12月中旬,在唐山市丰润区及周边县区的养猪户(场)中,发生了一种以猪咳嗽、呼吸困难、高热、急性死亡为特征的传染病,后经流行病学调查、病理剖检及实验室诊断,确诊为由放线杆菌引起的猪传染性胸膜肺炎,经治疗得到有效控制,现报告如下. 相似文献
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将牛病毒性腹泻病毒(BVDV)河北分离株HB-bd毒株E2基因去除跨膜区获得sE2基因,将sE2基因克隆入巴斯德毕赤酵母(P.Pastoris)分泌型表达载体pPIC9K中,筛选培养后提取阳性重组质粒,经酶切和PCR鉴定,命名为pPIC9K-sE2.重组质粒pPIC9K-sE2经Sal Ⅰ酶切线性化,电穿孔导入P.Pastoris GS115基因进行整合,使外源基因sE2稳定地整合到P.Pastoris染色体中,G418筛选得到阳性高拷贝转化子GS115-pPIC9K-sE2.经甲醇诱导表达后,sE2融合蛋白获得了表达,表达产物经SDS-PAGE、Western-blot和Dot-ELISA分析,确定其表达的sE2融合蛋白相对分子质量大小为37 000,且具有天然蛋白的抗原特异性.免疫原性研究证明P.Pastoris表达的sE2蛋白能刺激动物产生特异抗体. 相似文献
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曲霉菌病是养禽业中危害严重的一种真菌传染病,其病原为黄曲霉菌和烟曲霉菌.2008年6月份山东昌邑市养殖户钱某饲养的3 000只肉仔鸡约有500只发病,用阿莫西林、泰乐菌素饮水,土霉素拌料治疗2d,效果不明显.后经笔者诊断为曲霉菌病,用药后迅速控制了病情发展,取得较好的效果. 相似文献
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为建立从患有非典型新城疫的蛋鸡组织细胞中提取、纯化热休克蛋白HSP70抗原肽复合物的方法,采取三步蛋白纯化法从非典型新城疫蛋鸡肝脏组织中提取、纯化HSP70抗原肽复合物.经分级硫酸铵盐析后,依次用ConA-Sepharose亲和层析和DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化.所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting进行蛋白分子量及性质鉴定,Bradford法测定蛋白浓度.分离、纯化得到的蛋白经SDS-PAGE、银染鉴定为单一带,分子量为70ku;Western blotting结果证实为HSP70.每克新鲜肝脏细胞最终获得90～110 μg HSP70.使用本分离纯化方法可获得高纯度HSP70抗原肽复合物. 相似文献