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相似文献
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1.
本实验以苹果二倍体品种富士(Malus pumila cv.Fuji,2n)、三倍体品种乔纳金(Malus pumila cv.Jonagold,3n)和四倍体品种小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang,4n)为试材,对不同倍性苹果花芽分化过程花芽中核酸的含量进行了比较。结果表明:多倍体与二倍体花芽中DNA、RNA和总核酸含量及DNA/RNA值的动态变化趋势基本相同;同一分化期,多倍体花芽中DNA、RNA和总核酸的含量比二倍体明显增加;但对花芽中RNA/DNA值的研究表明,与二倍体相比,三倍体花芽的RNA/DNA值增高,但增高幅度不大,四倍体花芽的RNA/DNA值却明显降低。  相似文献   

2.
聂洪丽  宋先强  邓科君  杨足君 《安徽农业科学》2007,35(30):9474-9474,9479
以鼠尾草属植物为原料,采用CTAB法提取DNA,并在TSB法及氯化锂沉淀法的基础上改进并建立了一种高效高质量提取RNA的方法。用核酸测定仪测浓度和琼脂糖凝胶电泳检测质量,均获得了高浓度和高质量的DNA及RNA,为RT-PCR、分子克隆等分子生物学实验提供了很好的模板。  相似文献   

3.
以野生型和转几丁质酶烟草株系叶片为材料,采用改进的CTAB法对其DNA和总RNA进行同步提取和DNA中RNA的消化以及总RNA中DNA的消化,并分别进行了电泳检测、含量测定和相应的PCR和RT-PCR检测.结果表明:用该法提取的DNA条带清晰、无降解,所提取的DNA浓度在109.20~245.46 μg/mL,OD26...  相似文献   

4.
核糖核酸(RNA)及脱氧核糖核酸(DNA)是一切生物细胞的重要组成成分之一,具有决定生物体的蛋白质合成,代谢类型及遗传特征等功能。为了从本质上探讨家畜针刺抗炎的机理,我们试图把马白细胞的RNA及DNA的含量作为健康马剖腹术后电针抗感染机理的一项观察指标;但是,迄今尚未见有马白细胞RNA及DNA的定量测定报道。我们参考国内外有关RNA及DNA的一些定量测定资料,通  相似文献   

5.
RNA是由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成的长链状分子。RNA与DNA、蛋白质、多糖等物质普遍存在于细胞中。常用的总RNA提取的方法是Trizol法,该方法可同时分离一个样品的RNA、DNA和蛋白质,但由于植物材料中多糖多酚的存在及操作环境的影响,RNA产量偏低。QIAGEN RNeasy Plant Mini试剂盒法(胍盐法)是通过裂解液(不含苯酚、氯仿)裂解细胞,使RNA和DNA同时通过柱子,再将其分离的总RNA提取法。该方法既克服了Trizol在多糖多酚存在的情况下不能成功分离RNA与DNA的弊端,又保证在提取过程中不使用苯酚氯仿等有毒试剂,并且能在一定程度上提高RNA的产量和纯度。  相似文献   

6.
为了确立一种适合于芸芥柱头总RNA的提取方法,以芸芥柱头为材料,在常规异硫氰酸胍法的基础上提取和纯化总RNA.结果表明.采用常规异硫氰酸胍法提取的芸芥柱头总RNA,28 S RNA和18S RNA条带的亮度之比接近于1:1,而不是所要求的2:1,产生了明显的降解.改进异硫氰酸胍法提取的芸芥柱头总RNA,28S RNA和18S RNA条带的亮度之比接近于2:1,提取的RNA完整性好,但存在痕量DNA污染.用DNase降解痕量DNA,发现DNA去除较干净,且RNA没有发生降解,可作为反转录底物进行第一链cDNA合成.确立了一种适合于芸芥柱头总RNA的提取与纯化方法,为芸芥自交亲和基因的克隆及功能分析奠定了基础.  相似文献   

7.
研究牙鲆变态期间核酸、总蛋白及其比值的变化,并确定其与生长的关系。结果显示,DNA浓度在22~32日龄保持相对稳定,在32~34日龄急剧升高,在36日龄达到最高。RNA浓度在24日龄升至峰值,在32日龄降至最低,之后呈先升高再下降的趋势。总蛋白浓度在22~29日龄呈升高趋势,之后先降低再上升。DNA、RNA含量及总蛋白含量在变态期间均保持先升高后降低再升高的趋势,在32~36日龄快速增长。RNA/DNA比值在22~24日龄呈上升趋势,然后下降直至32日龄,之后先上升后下降,并在36日龄达到最低值(2.27)。Protein/DNA比值在29日龄达到最高值(61.97),之后先下降后上升。RNA、DNA浓度及总蛋白浓度与体长和体重有明显的线性关系。结果表明,牙鲆变态高峰期前的生长以细胞增大为主,变态后的生长以细胞增殖为主,RNA、DNA及其比值可以从微观细胞水平上指示仔稚鱼的生长。  相似文献   

8.
不同方法提取吴茱萸叶片基因组DNA和RNA的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
分别研究对比了3种不同方法提取吴茱萸叶片基因组DNA和RNA的质量,以确定适合吴茱萸叶片基因组DNA和RNA的提取方法。采用紫外分光光度法和普通电泳检测法比较了常规CTAB法、SDS法和改良CTAB法提取吴茱萸叶片基因组DNA的效果;采用紫外分光光度法和非变性电泳检测法比较了酚-SDS法、Trizol法和改良异硫氰酸胍法提取吴茱萸叶片RNA的效果。结果表明,分别采用不同方法提取的吴茱萸叶片基因组DNA和RNA的质量差异较大。常规CTAB法和SDS法无法提取出高质量的吴茱萸叶片基因组DNA,而改良CTAB法提取效果较好;酚-SDS法和Trizol法不适合高质量吴茱萸叶片RNA的提取,而改良异硫氰酸胍法的提取效果良好。  相似文献   

9.
月季基因组DNA与总RNA提取方法的优化研究   总被引:2,自引:1,他引:2  
[目的]优化月季基因组DNA与总RNA的提取方法。[方法]通过对经典提取方法的改进与筛选,获得月季DNA和总RNA。[结果]经过改进与筛选的方法提取的月季DNA和总RNA可用于酶切、PCR和RT-PCR等一系列分子生物学的研究。[结论]该研究为其他以次生代谢物含量丰富植物为材料的研究提供了技术参考。  相似文献   

10.
分子数据的遗传多样性分析方法(综述)   总被引:18,自引:0,他引:18  
以蛋白质和DNA(RNA)作遗传标记是进行遗传多样性研究的主要方法.由实验所得的等位基因频率、蛋白质序列、DNA(RNA)序列、带型等定量或定性数据,经不同数学分析处理,可获得基因多样性、基因型多样性、核苷酸多样性、遗传距离、遗传相似性、遗传变异系数等指标,从而为进一步分析种群遗传结构、群体遗传分化、基因流动及系统发育等提供了可能.  相似文献   

11.
柑橘花芽分化期结果和未结果树核酸含量变化   总被引:1,自引:0,他引:1  
用石蜡切片法确定温州蜜柑花芽形态分化集中在3月初到4月中旬.同时分析了8年生和2年生温州蜜柑树体秋春季叶片核酸含量,结果表明:结果树叶片RNA含量较高,在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,RNA含量和核酸总量均达到峰值,随后下降.花芽形成期DNA含量较低,形态分化期下降.未结果树叶片DNA含量高于成年树,且在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,结果树叶片RNA/DNA比值出现峰值,未结果树叶片RNA/DNA比值有相似变化,但峰值较小.核酸总量(包括RNA含量)及RNA/DNA比值结果树大于未结果树.  相似文献   

12.
对龙眼胚胎发育过程中胚珠内核酸、蛋白质和淀粉含量的变化进行了研究.结果表明:以每克胚珠鲜重计,核酸含量在花后10-17 d达到最大值,以后逐渐降低,至45 d左右达最低值后又平稳回升;以每胚珠鲜重计,DNA含量随胚珠的发育而逐渐增加.RNA的含量变化总体趋势与DNA相似,但DNA含量的变化先于RNA.以每克胚珠鲜重计,蛋白质含量变化与核酸的变化基本相似;以每胚珠鲜重计,蛋白质的积累基本上与RNA的积累同步进行.胚珠内淀粉含量的变化趋势与DNA、RNA、蛋白质略有不同.以每克胚珠鲜重计,淀粉含量的变化表现为先降低后升高的变化趋势;以每胚珠鲜重计,则随着胚珠的发育含量不断增加,其中52 d后急剧增加.龙眼胚胎的发育状况与胚珠内核酸、蛋白质和淀粉含量的变化密切相关.  相似文献   

13.
一种有效的葡萄叶片总RNA提取方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
RNA的提取技术是现代分子生物技术的基础,植物RNA的提取比较困难.实验以新鲜的葡萄叶片为材料,采用SDS、CTAB相结合的方法,进行酚/氯仿的提取,消除了DNA及植物中较多的多糖、多酚等污染,提取到较纯净的总RNA,此方法适合于葡萄叶片总RNA的提取,试剂简单经济,实验结果稳定,重现性强.  相似文献   

14.
用石蜡切片法确定温州蜜柑花芽形态分化集中在3月初到4月中旬.同时分析了8年生和2年生温州蜜柑树体秋春季叶片核酸含量,结果表明:结果树叶片RNA含量较高,在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,RNA含量和核酸总量均达到峰值,随后下降.花芽形成期DNA含量较低,形态分化期下降.束结果树叶片DNA含量高于成年树,且在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,结果树叶片RNA/DNA比值出现峰值,未结果树叶片RNA/DNA比值有相似变化,但峰值较小.核酸总量(包括RNA含量)及RNA/DNA比值结果树大于未结果树.  相似文献   

15.
[目的]筛选出适合于c DNA文库构建的猪苓菌核及菌丝体总RNA的提取方法。[方法]采用Trizol改良法和EASY Spin植物快速提取试剂盒法(简称试剂盒法)对猪苓菌丝及菌核的总RNA进行提取。[结果]经紫外分光光度计对所得总RNA的均一性及1%琼脂糖凝胶电泳对所得总RNA的完整性检测后发现,2种方法均可提出完整的总RNA,试剂盒法相较于Trizol改良法其所提取的总RNA质量和纯度都较好,但Trizol改良法所提取的总RNA产率比较高。[结论]LD-PCR成功合成了猪苓菌核和菌丝体的c DNA产物,呈弥散状分布在1 0005 000 bp和7502 500 bp,满足c DNA建库的要求。  相似文献   

16.
以细叶百合为试材,通过冷藏(5℃)解除鳞茎休眠,研究了细叶百合鳞茎解除休眠过程中核酸及可溶性蛋白质的变化规律。结果表明,冷藏过程中顶芽与鳞茎盘中核酸含量发生了明显的变化,顶芽中DNA、RNA含量及RNA/DNA比值在鳞茎冷藏36 d时变化最为明显,贮藏36 d是内外鳞片DNA及核酸总含量的转折点;顶芽和鳞茎盘冷藏0~36 d内可溶性蛋白质的含量升高,鳞茎不同部位可溶性蛋白质含量在冷藏48 d后迅速降低也是鳞茎开始解除休眠的重要体现。  相似文献   

17.
百合叶片总RNA提取方法比较及优化   总被引:11,自引:1,他引:11  
为筛选出适合百合叶片RNA提取方法,以铁炮百合‘白天堂’组培苗叶片为材料,比较了改进的CTAB、SDS及传统的Trizol、CTAB、SDS方法提取RNA的效果。结果表明:不论传统及改进的SDS法和Trizol法均不能有效去除百合叶片组织中的多糖、蛋白等杂质,传统CTAB法提取RNA存在DNA污染。针对百合叶片组织富含多糖多酚的特点,改进了CTAB法,采用醋酸钠及无水乙醇去除多糖,酚/氯仿反复抽提去除蛋白,DNaseⅠ去除DNA,LiCl有效沉淀RNA。采用此方法提取的RNA条带清晰,经紫外光谱分析D260/D280比值为2.0,D260/D230为2.1,电泳28S、18S条带清晰,比值约为1.5。RT-PCR结果表明,改进的CTAB法提取的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学实验。  相似文献   

18.
以水稻双链RNA(dsRNA病毒)为例,研究了2种总RNA提取方法(Trizol法和柱层析法)以及寄主DNA污染对dsRNA病毒定量分析的影响。结果显示,2种总RNA提取方法中,Trizol法的dsRNA损失比率较大,不能应用于dsRNA病毒的定量分析;无论DNase I处理与否,提取的总RNA样品中普遍存在DNA污染。对于真核生物而言,通过设计跨内参基因内含子的引物可以有效地克服寄主DNA污染对定量分析的影响。  相似文献   

19.
苹果梨花芽分化期核酸代谢规律的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用生化测定的方法对苹果梨花芽分化的核酸代谢进行了研究,结果表明:花芽生理分化期核酸总量高,RNA高于DNA,RNA/DNA比值高,其核酸代谢模式为:RNA双峰,第1峰大于第2峰,DNA单峰,在RNA双峰之间,RNA/DNA呈双峰,蜂值出现时间与RNA双峰相同,第1峰远大于第2峰;花芽形态分化过程中,RNA和DNA变化动态相似,一直处于较高水平且呈增加趋势,RNA高于DNA,雄蕊和紫蕊分化期含量最高,形态分化结束时降至最低。  相似文献   

20.
测定昆虫卵巢内核酸、蛋白质等含量的方法研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
本文在研究昆虫雌虫卵巢内无机磷、游离核苷酸、磷脂、RNA、DNA、磷蛋白和蛋白质的含量时,将Schnider分离法、Schmidt和Thannhauser分离法结合,并进行改进。在用NaOH降解RNA后,改用HCl代替PCA或TCA,使之生成的NaCl(浓度为0.15N),在此溶液中DNA溶解度很小,更利于分离RNA与DNA。并以定磷法和紫外吸收法对比测定RNA含量,以Folin-phenal法与紫外吸收法对比测定蛋白质含量,表明改进的分离方法测定的结果准确,方法简便,取材少,可一次性分离上述7种成份。  相似文献   

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