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甘蓝与大白菜的原生质体融合 总被引：2，自引：0，他引：2
[目的]研究两种近缘物种原生质体的最佳融合条件。[方法]利用培养好的甘蓝与白菜的幼苗在果胶酶与纤维素酶的作用下分离出原生质体,再利用PEG融合液将这2种原生质体融合。[结果]用6％甘露醇＋8％纤维素酶＋2％果胶酶处理材料,酶解4h后,可以获得大量的游离原生质体,大部分原生质体呈圆形,散乱地游离在原生质体溶液各处。利用30％PEG融合液及0．1mol／LCaCI：溶液（含9％甘露醇,pH值9．5）将这两种原生质体融合可以获得稳定的、可育的细胞杂种植株,可以直接作为育种的种质材料。[结论]该研究为远缘杂交和进一步研究原生质体的培养及再生奠定了基础。 相似文献
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矮牵牛叶肉原生质体分离条件的优化 总被引：1，自引：1，他引：0
以幼嫩叶片为试材,探讨了渗透压(甘露醇浓度)、水解酶浓度、酶解时间等关键因素对矮牵牛叶肉原生质体分离效果的影响。研究结果表明,以2%纤维素酶R-10+0.2%果胶酶Y-23+0.4%离析酶R-10+20 mmol/L 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)+0.1%牛血清白蛋白(BSA)+0.11%无水氯化钙(CaCl_2)为酶解液,在0.5mol/L甘露醇浓度下静置酶解5h,1 100r/min离心2min沉淀原生质体,原生质体产量及活性分别为2.90×106个/g和88.1%,可为后续原生质体培养及融合提供材料。 相似文献
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桑树原生质体分离条件的优化 总被引：1，自引：0，他引：1
为了获得桑树原生质体分离的最优条件,为今后桑树原生质体融合、新种质的获取等植物遗传改良提供理论基础,采用酶解法和血球板计数法,对桑树原生质体分离的影响因素进行研究。结果表明,酶、酶液组合、酶解时间和渗透压稳定剂等都对原生质体的制备有显著的影响,较适宜桑树叶片游离的组合条件是1.0%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.2%离析酶+0.6mol/L甘露醇+CPW盐溶液,酶解温度为28℃±2℃,酶解时间为6h。在此条件下可获得高产量的原生质体。 相似文献
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甘蓝型油菜子叶原生质体培养及植株再生研究 总被引：2，自引：1，他引：1
以甘蓝型油菜中双6号子叶为材料制备原生质体,采用固液结合培养,探讨了其原生质体分离、培养与再生的优化条件,获得了再生植株。结果表明:混合酶液(0.5%纤维素酶+0.1%果胶酶+0.2 mol/L甘露醇+80 mmol/L CaCl2)与SCM溶液按3∶7的比例混合,酶解14 h可获得高产率中双6号子叶原生质体;原生质体在前人设计的B、C固液相结合培养基上培养效果好;最佳分化培养基为E培养基+1.0 g/L 6-BA+0.1 g/L NAA+0.02 g/L GA3+30μmol/L AgNO3;所有再生芽均在无激素的MS培养基上生根。研究结果为建立成熟的甘蓝型油菜原生质体再生体系提供了新的配方与依据。 相似文献
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毛葡萄原生质体分离与纯化研究 总被引：4，自引：0，他引：4
以毛萄萄愈伤组织、悬浮培养细胞,无菌苗幼叶为材料,研究了毛葡萄原生质体的分离纯化方法及影响因素.结果表明,毛葡萄原生质体分离材料以悬浮细胞和愈伤组织最好.毛葡萄愈伤组织在0.5 mol/L甘露醇中预处理90 min,CPW+13%甘露醇+2%纤维素酶+0.25%果胶酶+0.5%离析酶的酶液中酶解10 h,其原生质体产量最高可达6.24×106个/g,活力为86.83%. 相似文献
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草莓属间体细胞融合研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以长白山区的东方草莓和安娜草莓叶片为试材,PEG结合高浓度Ca2+、高pH值的方法进行原生质体融合,将融合后的杂种细胞接种到适宜培养基中进行细胞增殖形成细胞团和细胞团再分化芽苗培养.对融合、融合前后及融合后细胞增殖形成的细胞团分化的再生芽苗进行染色体鉴定,结果表明,1.0％纤维素酶+0.5％果胶酶+0.6 mol/L甘露醇+0.1％ 2-(N-吗啡啉)乙磺酸MES+0.05 mol/L CaCl2组合原生质体产量和活力最高;当PEG6000浓度为30％时,原生质体一对一融合概率最高,达10.67％;融合后形成的第一代类愈伤组织细胞及再分化的芽苗有60％染色体倍性为6x,说明草莓属间体细胞已经融合,进一步开展育种是可行的. 相似文献
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以苹果试管苗叶片为原生质体分离材料,对影响原生质体分离和培养的因素进行了研究.结果表明适合叶片酶解的酶液组成是Cellulase-Onzuka R-10 0.8%+Pectinase 0.5%+PVP 1%+甘露醇0.65 mol/L+MES0.1%;以改良MT+BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+甘露醇0.65 mol/L+Vc 5.0 mg/L+Glu 500 mg/L+CH 100 mg/L+ME 500 mg/L+Arg 50 mg/L为培养基对原生质体进行培养,固液双层培养效果较好,最适培养密度为1×105个/ml,培养1～2天原生质体变形,3～4天第一次分裂,2周分裂3～5次.平邑甜茶原生质体一个月后形成微细胞团,两个半月形成肉眼可见的微愈伤组织.鲁加5号和M7均只形成7～10个细胞的细胞团,嘎拉未见细胞分裂. 相似文献
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【目的】探究百合原生质体分离纯化和培养条件，为百合原生质体融合、再生体系建立、转基因育种等研究奠定基础。【方法】以‘白天堂’百合无菌苗叶片为材料，采用纤维素酶、果胶酶和离析酶组合分离原生质体，采取单因素试验法，对影响原生质体的制备及再生条件的主要因素即渗透压、酶解组合、细胞筛和酶解时间进行筛选与优化。【结果】以百合无菌苗叶片在1.0%纤维素酶+0.5%离析酶+0.1%果胶酶+0.6 mol/L甘露醇+10.0 mmol/L CaCl2·2H2O+20.0 mmol/L MES+20.0 mmol/L KCl混合酶解液为最优条件，25℃,25 r/min, pH为5.6黑暗酶解6 h;孔径75μm细胞筛过滤，600 r/min离心5 min收集细胞，原生质体产量可达6.4×105个/mL,原生质体活力为78.0%;将纯化后密度为1×105个/mL的原生质体溶液接种在葡萄糖作为唯一碳源的培养基中可以存活，并生长产生细胞壁，但没有启动细胞分裂和诱导形成愈伤组织。【结论】初步建立‘白天堂’百合的高效原生质体... 相似文献
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【目的】探索葡萄成熟花粉粒原生质体分离条件,为下一步原生质体杂交及遗传改良提供技术参考。【方法】使用低温—酶解法对酿酒葡萄桂葡一号花粉原生质体进行分离,探讨低温处理不同时间、不同花序位置和不同甘露醇浓度对原生质体分离的影响。【结果】随着低温处理时间的延长,原生质体分离得率越高,在0.6mol/L甘露醇条件下,以处理7d的原质体分离得率最高,达18.94%,其次是处理5d。对于不同部位花粉,以中上部花药的原生质体分离得率较高,而以中部花序的花粉原生质体分离得率最高,达19.11%;中下部花药及已开始散粉的花药原生质体分离得率较低。相对于1.2mol/L甘露醇,以添加0.6mol/L甘露醇作为渗透压处理的花粉原生质体分离得率较高。【结论】低温处理时间、花粉成熟度及甘露醇浓度均对酿酒葡萄花粉原生质体的分离有明显影响。选用即将开花的中上部花药为材料,经0～4℃低温预处理5～7d,并以0.6mol/L甘露醇作为渗透压调节剂可获得大量有活性的花粉原生质体。 相似文献
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利用表皮条生物分析、激光扫描共聚焦显微术、显微注射等技术,研究观察了蚕豆气孔关闭过程,结果表明,SA浓度在1~1 000μmol/L时诱导的气孔关闭具有可逆性,而10-2mol/L时导致的气孔关闭不可逆;20 U/mL的过氧化氢酶(catalase,CAT)与SA共同处理时可逆转SA诱导气孔关闭作用的83%~90%。以H2O2荧光探针H2DCFDA结合激光扫描共聚焦显微术,直接检测保卫细胞内H2O2的产生,结果表明,与外源10-5mol/L的H2O2的处理结果类似。外施或通过显微注射技术而在保卫细胞内引入100μmol/L的SA均可引起保卫细胞内DCF荧光快速增强。在保卫细胞内显微注射CAT可完全阻止SA导致的DCF荧光增强。表明SA诱导的气孔关闭可能与H2O2的产生有关。 相似文献
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菊芋ISSR-PCR反应体系的建立与优化 总被引：1，自引：0，他引：1
利用正交试验设计的方法,从Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶浓度4因素对菊芋ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度及退火温度进行梯度检测。结果表明:菊芋20μl最佳反应体系包括10×PCR buffer,200μmol/L dNTP,0.5μmol/L引物,1.5 mmol/L Mg2+,1.0 U Taq DNA聚合酶和50 ng模板DNA。这一优化系统的建立,将为菊芋种质资源鉴定及遗传多样性的研究奠定基础。 相似文献
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[目的]研究养殖丁(Tinca tinca L.)肝胰脏淀粉酶的基本性质。[方法]采用酶学分析方法研究丁肝胰脏淀粉酶的pH、温度、底物浓度、缓冲液及8种金属离子对其肝胰脏淀粉酶活性影响。[结果]淀粉酶最适pH为7.5,最适温度44℃,最适底物浓度0.4%,最适缓冲液为0.2 mol/L Tris-HCl缓冲液。在设定浓度范围内(10～50 mmol/L),K+、Na+对淀粉酶活力影响具有促进作用;Ca2+、Mg2+对淀粉酶活力也有促进作用;Fe3+在低浓度(10 mmol/L)表现为促进,高浓度(20～50 mmol/L)表现为抑制作用;Al3+、Pb2+、Ag+对酶活力具有抑制作用。[结论]结果为丁鱼岁的人工养殖和饲料优化,提供一定的理论依据。 相似文献
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汞胁迫对辣椒种子萌发和幼苗生长的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
[目的]为研究Hg2+对植物的毒害机理提供理论依据。[方法]用不同浓度(0、0.5、1.0、5.0、10.0、25.0、50.0μmol/L)氯化汞溶液分别对辣椒种子进行浸种处理,通过种子发芽试验和生长试验,研究Hg2+胁迫对辣椒种子的发芽率、胚轴和胚根长度及幼苗中叶绿素、丙二醛和游离脯氨酸的含量以及过氧化物酶活性(POD)的影响。[结果]随Hg2+浓度的增加,Hg2+对辣椒种子萌发、胚轴和胚根生长的抑制作用增强,幼苗叶片内的叶绿素含量降低,丙二醛和游离脯氨酸的含量明显增加,POD活性呈先上升后下降的趋势,POD活性在Hg2+浓度为25.0μmol/L时最高。[结论]经5.0μmol/L氯化汞溶液浸种后,辣椒种子的萌发及其胚根、胚轴生长受到抑制。高浓度Hg2+胁迫下,叶绿素含量降低直接影响了叶片的光合作用,会降低植物株高和生物量,甚至导致死亡。 相似文献
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铅胁迫对费菜叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
[目的]丰富绿化植物抗重金属污染的理论,为受污染地区绿化植物的选择提供借鉴。[方法]采用水培的方法,研究不同浓度的重金属铅（240、480、960、1450、1630μmol/L）对费菜生理生化特性的影响。[结果]叶绿素的含量及抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性对Pb^2＋胁迫都表现为低浓度下的促进和高浓度下的抑制作用。轻度胁迫下叶绿素含量增加;随着处理时间的延长和重金属浓度的增加,叶绿素含量总体呈下降趋势。当Pb^2＋浓度小于480μmol/L时,SOD的活性随着时间的延长先升高后下降;随着Pb^2＋浓度的增加,酶的活性逐渐降低。随着处理时间的延长,低浓度铅（Pb^2＋≤480μmol/L）胁迫下CAT活性先升高后下降,高浓度铅（Pb^2＋≥960μmol/L）胁迫下,CAT活性持续下降。[结论]明晰了铅胁迫对费菜叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响规律。 相似文献
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铅对蚕豆种子萌发及根生长的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]研究铅对蚕豆种子萌发、根生长以及细胞分裂的影响。[方法]用不同浓度的PbC l2溶液培养蚕豆种子,以蒸馏水培养作为对照,统计蚕豆种子萌发率,测量根长,根尖固定、染色、压片后镜检,计算有丝分裂指数。[结果]1.0×10-45.0×10-4mol/L Pb2＋处理第1、2天,蚕豆种子萌发率稍高于对照,培养第3、4天则与对照相当,Pb2＋对蚕豆种子的萌发没有显著影响。Pb2＋对蚕豆根尖生长产生抑制作用,随着浓度增加,根的生长速率递减,随着处理时间延长,每单位时间的根生长速度递减或停止。根尖细胞有丝分裂指数随Pb2＋浓度的增高和处理时间的延长而递减。[结论]Pb2＋对蚕豆根尖生长发育有影响,其影响程度与Pb2＋处理浓度、处理时间有关。 相似文献
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[目的]建立西番莲快速高效的离体再生系统。[方法]采用西番莲一年生茎段、叶片及叶柄为离体培养材料,对诱导部位的选择、不同取材时间、愈伤组织诱导与分化、不定芽继代增殖、生根诱导等方面进行研究。[结果]MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+TDZ 0.05 mg/L组合较优,其嫩茎尖诱导率为96.6%,嫩叶柄为88.4%,嫩叶片为83.5%;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+TDZ 0.05 mg/L组合为最优组合,分化丛生芽率为92.8%;MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+TDZ 0.05 mg/L组合不定芽诱导率达90.9%;MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L组合芽增殖倍数为2.91;1/2MS+NAA 2 mg/L+PP3330.5 mg/L组合平均生根数为1.3条;1/2MS+NAA 2 mg/L+ABT 0.5 mg/L组合生根率为95.4%;1/2MS+NAA 2 mg/L+IBA 0.5 mg/L组合平均根长为1.23 cm。[结论]该研究为今后西番莲的选育及综合利用奠定基础。 相似文献
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[目的]以蕨菜叶柄为外植体研究蕨菜的组织培养技术。[方法]在1/2 MS培养基中设置不同的6-BA和IBA浓度,研究6-BA和IBA对蕨菜叶柄组织培养的影响。[结果]1/2 MS+0.2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA为愈伤组织的最佳诱导培养基,诱导率为82%;1/2MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L 6-BA为愈伤组织的最佳增殖培养基,增殖倍数为8.07;1/2 MS+0.4 mg/L IBA为最佳生根培养基,生根率达100%,根数多、根长且健壮。[结论]结果为蕨菜植物的组培繁殖提供参考。 相似文献
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[目的]研究玉环剪豆的茎尖脱毒及快繁技术。[方法]选用含1～2个叶原基的玉环剪豆无菌苗茎尖为外植体,筛选其最佳脱毒培养基,并建立其组培快繁体系。[结果]玉环剪豆茎尖脱毒及诱导的最佳培养基为MS+1.0μmol/L 6-BA+0.5μmol/L NAA,成活率可达75.0%;RT-PCR检测结果显示试管苗脱毒率超过90%;脱毒苗茎段快繁的最佳配方为MS+10.0μmol/L 6-BA+0.5μmol/L NAA;脱毒苗在MS+20μmol/L NAA培养基上的生根率达80%以上。[结论]该研究建立了一套适宜玉环剪豆地方品种的脱毒快繁体系,为玉环剪豆脱毒组培苗的工厂化生产奠定了基础。 相似文献