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产气荚膜梭菌β-毒素基因的克隆与核苷酸序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为了给产气荚膜梭菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）β毒素基因工程亚单位苗和细菌毒素多价基因工程苗的研制提供基因材料，用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，从Ｂ型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了９３０ｂｐ的β－毒素基因。用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ对ＰＣＲ产物进行双酶切处理，然后通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的载体质粒ｐＥＴ－２８Ｃ（＋）的多克隆位点，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切分析和ＰＣＲ扩增检测，证明重组质粒ｐＥＣＢ２中含有产气荚膜梭菌的β－毒素基因。经核苷酸序列分析，明确了克隆的β－毒素基因在重组质粒中的连接向位和阅读框架是正确的。 相似文献
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产气荚膜梭菌所致仔猪坏死性肠炎 总被引：1，自引：1，他引：0
产气荚膜梭菌所致仔猪坏死性肠炎吴雅玲，高其栋（青海省畜牧兽医科学院西宁，８１０００３）产气荚膜梭菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎ－ｇｅｎｓ）也称魏氏梭菌（ｃｌｏｓｔｒｄｉｕｍｗｅｌｃｈｉｉ），根据该菌产生４种主要毒素（α、β、ε、）的有无，把... 相似文献
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Ｃ型产气荚膜梭菌感染哺乳仔猪暴发坏死性肠炎渡边一夫ｅｔａｌ１前言猪由Ｃ型产气荚膜梭菌（ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍＰｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓＣ型）所致的坏死性肠炎，是哺乳仔猪，尤其是新生猪发生血便，取急性经过而死亡的疾病。我国自１９７２年新泻县报道此病发生以来... 相似文献
4.
表达CPB—ST融合蛋白工程菌株的免疫原性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
已构建的能表达产气荚膜菌β－毒素和大肠埃希氏菌ＳＴ融合蛋白的基因工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３,ｐＥＣＢ－ＳＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌株中提取的包涵体和经甲醛灭活的工艺菌株全菌体制备抗原免疫小白鼠,攻毒试验结果表明,免疫小白鼠能分别抵抗１ＭＬＤ的Ｂ型产气荚膜梭菌强毒株和产ＳＴ的大肠埃希氏菌工程菌株ＨＢ１０１（ｐＳＬＭ００４）的攻击。 相似文献
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产气荚膜梭菌是牛羊猝死和肠出血症的重要病原之一。本研究根据其常见的A、B、C、D四种菌型菌株编码α、β和ε毒素的保守序列,分别设计合成了针对这3种毒素的特异性引物,建立了多重PCR检测不同血清型产气荚膜梭菌的技术方法。通过对参考菌株的分型检测表明,该方法不仅快速、客观,而且具有良好的特异性和敏感性。对羔羊猝死症中分出的菌株进行检测,确定其为产气荚膜梭菌A型和D型混合感染;对产后母牛血痢病料中分离的菌株进行检测确定其为产气荚膜梭菌A型。 相似文献
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小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞和用产气荚膜梭菌ε类毒素免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠的脾细胞，以ＰＥＧ为融合剂进行融合，获得分泌抗产气荚膜梭菌ε毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株１３株，经鉴定，杂交瘤所分泌的单克隆抗体在ＥＬＩＳＡ中均特异地与产气荚膜梭菌ε毒素反应，而不与α和β毒素反应，１３株单克隆抗体均为ＩｇＧ１亚类，经毒素抗毒素中和试验测定，１３株单克隆抗体中，１２株具有中和ε毒素的活性。 相似文献
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产报荚膜梭菌β—毒素基因的克隆与核苷酸序列分析 总被引：4，自引：0，他引：4
为了给产气荚膜梭菌β－毒素基因工程亚单位苗和细菌毒素多价基因工程苗的研制提供基因材料,用聚合酶锭式反应（ＰＣＲ）技术,从Ｂ型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了９３０ｂｐ的β－毒素基因,用限制性核酸内切栈ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ对ＰＣＲ产物进行双酶切处理。然后通过了Ｔ４ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的载体质粒ＰＥＴ－２８Ｃ（＋）的多克隆位点,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中,经ＢａｍＨ 相似文献
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C型产气荚膜梭菌β毒素基因克隆与核苷酸序列分析 总被引：5，自引：0，他引：5
用ＰＣＲ技术,从含Ｃ型产气荚膜梭菌β毒素基因质粒ｐＢ１２中扩增出了０．９５Ｋｂ的β毒素基因,然后用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ对其进行双酶切处理,最后将其定向连接在事先经同样内切酶处理的载体ｐＥＴ－２８ｃ（＋）中的相应位点上,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切分析和核苷酸序列分析,证明重组质粒ｐＸＥＴＢ２含有产气荚膜梭菌β毒素基因,确定了其全部的核苷酸序列,并且具有正确的阅读框架 相似文献
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宁夏家畜产气荚膜梭菌病病原诊断和疫苗免疫研究 总被引：4，自引：0，他引：4
１９９０年宁夏泾源县暴发了以牛急性死亡为特征的传染病，以后疫区逐年扩大，发病数与死亡数日趋增多，１９９７年镀流区扩大到１０余个县，死亡牛２０００多头，同时驴和骡也出现发病，死亡，这种病因不明的“猝死症”已给当地的畜牧业生产造成了较大损失。现已查明，引起以牛为主发生急性死亡的疫病是由产气荚膜梭菌引起的肠毒血症，经用产气荚膜梭菌抗毒素对小白鼠进行中和试验，鉴定出Ａ，Ｃ和Ｄ型肠毒素。 相似文献