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目前 ,动物腔前卵泡的体外培养正日益受到重视 ,并已取得了较大进展 ,已建立的培养体系可成功地使腔前卵泡发育到有腔阶段 ,猪、山羊等已可实现腔前卵泡卵母细胞体外成熟 ,体外受精并发育至囊胚阶段。但有关腔前卵泡体外成熟的机制仍不明了。本文通过对体内发育与体外培养之卵泡及其卵母细胞超微结构进行比较 ,从微细结构上客观评定体外培养卵泡的形态、活力、代谢状况及功能完整性 ,界定体外生长卵泡所处发育阶段 ,从而为确立和完善腔前卵泡体外培养体系并最终选择高质量的卵母细胞进行体外受精提供可靠的理论依据。1 体内发育卵泡及其卵… 相似文献
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山羊卵巢无腔卵泡的体外发育 总被引:4,自引:0,他引:4
在三维琼脂凝胶培养体系中 ,山羊无腔卵泡的生长模式类似于体内。在一定培养时间内能善为保持其完整的立体结构和形态。原始卵泡能在体外启动 ,并得到一定程度的生长。初级卵泡能发育为次级卵泡 ,次级卵泡发育为有腔卵泡。卵泡在体外发育过程中 ,表现出了明显的优势化。本试验首次初步揭示了山羊无腔卵泡的体外发育基本过程和规律。 相似文献
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为了解水牛卵巢卵泡中颗粒细胞(GCs)和卵母细胞在体外培养过程中发生凋亡的变化特征,通过体外培养、血清撤除法诱导水牛卵泡GCs凋亡,并应用苏木精伊红(HE)染色和DNA原位末端标记的TUNEL方法观察其病理特征;通过水牛腔前卵泡体外培养、诱导或等待其中的卵母细胞及卵泡细胞发生凋亡,然后应用透射电镜技术检查其超微结构改变。结果显示:凋亡卵泡GCs的HE染色特征包括细胞体积缩小,染色较深呈紫黑色,且多成簇分布。DNA原位末端标记检查的特征是DNA发生降解,其降解碎片呈TUNEL阳性。原始卵泡体外培养中调亡卵母细胞的超微结构表现为胞核碎裂成电子密度高的大碎片,或出现形态奇特的凋亡小体;初级卵泡中的调亡GCs,细胞内外均出现凋亡小体,细胞内还见有典型的螺层状内质网结构,其中包涵部分核质。 相似文献
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本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集不同直径卵泡卵母细胞,研究卵泡直径对卵母细胞回收效果和体外成熟、体外受精的影响。结果表明,卵泡直径直接影响卵母细胞的回收效果及随后的体外成熟、体外受精;卵母细胞的回收率和可用卵的比率及成熟率与卵泡直径呈正相关;直径2.1~5 mm卵泡的卵母细胞由于处于生长旺盛期,受精率和卵裂率分别为59.15%和42.50%,显著高于直径5 mm卵泡和≤2 mm卵泡,适合体外胚胎的生产,而直径≤2 mm卵泡的卵母细胞因未发育充分体外发育潜能最差;直径5 mm卵泡的卵母细胞可能因体外培养成熟过度而老化导致受精率和卵裂率降低,缩短其体外成熟时间可能会提高其体外发育潜能。 相似文献
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牛腔前卵泡在体外无血清培养中发育为有腔卵泡 总被引:13,自引:3,他引:10
用无血清培养系统研究了牛腔前卵泡的体外培养。直径为100-200μm的牛腔前卵泡在添加L-谷氨酰胺、BSA、睾酮、转铁蛋白和硒的McCoy′s 5a培养液中培养,卵泡保持正常的形态结构并持续生长,培养10d左右形成贸泡腔,成腔率约50%。培养液中添加胰岛素对卵泡直径的增长和卵泡腔的形成有明显的促进作用,但添加FSH对腔前卵泡的生长未表现促进作用。 相似文献
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哺乳动物卵巢内含有数量庞大的腔前卵泡,然而在生理条件下,这些卵泡只有大约1%能发育到成熟的排卵阶段,其余都由于闭锁而退化,这是对雌性繁殖潜力的极大浪费。通过在体外培养复苏这些卵泡的生长,可以为体外受精,克隆和转基因等生物工程技术提供潜在的同种质卵母细胞来源[1]。特别是随着克隆和转基因技术的发展,将来对卵母细胞的需要越来越大,只靠回收窦腔卵泡中的卵子已经不能满足需求,通过体外培养卵巢组织或者卵泡,复苏卵巢中占主导地位的腔前卵泡的生长,可以加强我们对卵泡颗粒细胞生存、发育的生理调节机制的了解,对于提高高遗传和经济价值的家畜以及在科研上具有重要价值的动物的繁殖潜力,珍稀或濒危动物的保护以及人类生育能力的保存和辅助受孕具有重大意义[2]。 相似文献
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近20年来,胚胎移植、体外受精、核移植、转基因等胚胎工程技术在理论和生产应用上已取得了很大进展.然而,所有这些技术是建立在具有完全发育能力的卵母细胞的基础之上的.大量卵母细胞的体外成熟培养是这些技术的限速步骤之一.目前采用的有腔卵泡卵母细胞的体外成熟和超数排卵,不能提供充足的卵母细胞以支撑胚胎工程技术的进一步发展.此外,卵巢中的卵母细胞绝大多数以无腔的形式存在于卵巢皮质内,有腔卵泡所占比例不到1%,屠宰场屠宰羊只后的卵巢内含有大量的腔前卵泡.如果建立腔前卵泡的体外培养体系,获得大量的具有成熟和受精能力的卵母细胞,一方面将会最大限度地挖掘保存卵巢上遗传资源;另一方面将极大的促进胚胎工程技术的研究与应用,还有利于研究卵泡和卵母细胞的生长和发育规律. 相似文献
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大熊猫卵泡卵母细胞体外受精的初步研究 总被引:1,自引:1,他引:0
用抽吸法和切割法采集非发情季节病亡大熊猫的卵泡卵母细胞,经体外成熟培养后,用大熊猫冷冻精液进行体外受精。结果表明∶(1)在非繁殖季节,大熊猫卵巢中小腔及大腔卵泡卵母细胞仍较丰富,其大腔卵泡卵母细胞可在体外培养成熟;(2) 大熊猫的卵母细胞平均直径为(141±6.7)μm ,其胞质富含卵黄颗粒;(3)自配 Panda I I号获能液(含丙酮酸钠、肾上腺素等)可使大熊猫精子有效获能;(4) 大熊猫卵母细胞体外受精后,经培养可观察到第 2 极体,有的受精卵开始发生卵裂。 相似文献