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<正>在动物疫病监测工作中,采集动物样品进行实验室检测是开展动物疫病监测的一种主要的有效方法,样品的采集是动物疫病监测诊断工作的前提和基础,采集样品的时机、处理、保存运送等均影响到对疫病监测与诊断结果的准确性和可靠性。 相似文献
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实时荧光定量PCR技术融汇了传统PCR技术灵敏、快速、特异的特点以及光谱技术的高敏感性和高精确定量的优点,以直接探测PCR过程中荧光信号的变化获得定量的结果。因其具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,成为当前疫病检测广泛采用的分子生物学诊断技术。本文就实时荧光定量PCR技术在疾病检测上的应用作一综述。 相似文献
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采集动物样品进行实验室检测是开展动物疫病监测工作最常用的方法之一.样品采集是动物疫病监测诊断工作的前提和基础,采集样品的时机,样品的处理、保存运送等均有可能影响到疫病监测与诊断结果的准确性和可靠性,必须注意. 相似文献
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实时荧光PCR技术在动物疫病诊断中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,实时荧光PCR技术在动物疲病诊断中的应用得到了进一步的发展,在诊断动物的病毒性、细菌性和寄生虫性疫病中得到了广泛的应用。实时荧光PCR不仅实现了常规PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,实时荧光PCR技术由于多使用了一条可与模板互补配对的荧光探针,提高了特异性,并且由自动化仪器收集荧光信号,避免了肉眼判断的主观性,又可进一步提高灵敏度;实时荧光PCR技术全封闭反应,无须PCR后处理,避免污染,保证了结果的可靠性和重复性。随着实时荧光PCR试剂盒的进一步开发,实时荧光PCR技术将会在动物疫病诊断中得到更加广泛的应用。 相似文献
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数字PCR是近年发展起来的一种核酸绝对定量的检测技术,与传统的PCR和荧光PCR技术相比,数字PCR具有较好灵敏度、准确度和重复性,可实现绝对定量分析,为动物疫病的早期诊断和病原的定量检测提供了一个新平台。本文介绍了数字PCR的技术原理,并对该技术在动物疫病检测领域的中应用进行综述。随着数字PCR技术的发展,相关动物疫病配套检测试剂的研发,数字PCR技术将在动物疫病中得到广泛应用。 相似文献
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实时定量PCR技术在弓形虫研究中的应用 总被引:1,自引:1,他引:0
实时定量PCR技术(real-time polymerase chain reaction/quantitative real time polymerase chain reaction,real-time PCR/qPCR)是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法;该技术具有特异性强、灵敏度高、定量准确和快速等优点,在生物医学领域中得到广泛的应用。笔者对实时定量PCR技术的原理和近几年新兴的荧光探针的原理和类型进行了论述,并对实时定量PCR技术在弓形虫基础生物学、诊断及检测、药物和疫苗研究中的应用进行了综述。 相似文献
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本研究建立了一种实时荧光PCR检测奶牛乳液中结核分支杆菌复合群的技术,克服了以往牛结核PCR检测样品取样难的缺陷,具有检测灵敏度高、特异性强等优点,可用于奶牛乳房结核的早期诊断以及乳品安全生产检测。以乳液中加卡介苗作为模拟临床检测样本,对DNA提取方法进行改进,利用基于TaqMan技术的实时荧光(real—time)PCR检测。选择分支杆菌编码16sRNA基因和23sRNA基因之间ITS(internal transcribed spacer)序列作为扩增靶序列,研究结果表明卡介苗DNA提取效率提高,实时荧光PCR检测灵敏度达到每毫升乳液检测10个结核分支杆菌。奶牛乳液中结核分支杆菌复合群的检测对兽医系统疫病监测及诊断部门、奶牛养殖业、乳品生产行业有重要应用价值。 相似文献
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实时荧光定量PCR技术 总被引:11,自引:0,他引:11
荧光定量PCR技术是一种目前国内外应用较为广泛的定量PCR技术,是通过始点定量和荧光检测系统实时监测累积荧光强度而实现的,具有灵敏度高、特异性强、线性关系好、操作简单等优点,不但能够用于基因定量检测,还能准确定量疾病相关基因的表达,现已广泛应用于人类和动物疾病的快速检测、定量分析、早期诊断、基因分型等方面。它可以采用绝对定量和相对定量2种方式实现定量检测,但都有各自的优缺点,需根据具体的试验选择合适的定量方式,从而得到更准确的试验结果。提高荧光定量PCR技术的特异性和灵敏度需从多方面着手,主要指特异性探针及引物的设计,选择合适的Mg2 浓度、引物和探针浓度、循环数等。 相似文献
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《畜牧兽医科技信息》2017,(12)
正在动物疫病监测的工作中,采集动物的疫病样本是进行动物疫病监测的重要组成部分,是进行实验室检测的有效方法。样品的采集是动物疫病监测工作的前提基础,采集样品的处理、时机、保存、运输等,都能影响到动物疫病监测的结果精准度和可靠性。1不同动物的监测样品采集1.1细菌样品的采集在细菌样品监测中,应选取发病典型和刚死亡的动物进行采样。如采集无菌样品和现场利用接种棒进行无菌采集动物肝脏及血液等样品,将采集好的样品接种到血平板上。所 相似文献
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实验室检测是目前动物疾病诊断的重要内容,特别是传染性疫病更离不开实验室检测,实验结果的准确性、有效性除实验方法、检测试剂、实验操作等因素影响外,从一开始就受到样品的采集、保存、运输等因素的影响。特别是在开展动物疫病的监测工作,监测结果是否具有代表性,是否能够真实反映出疫病的真实情况都与监测样品的采集有重要关系。 相似文献
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多重荧光定量PCR技术可以利用一次反应,同时检测、鉴别出多种病原体,在临床混合感染的诊断上具有独特优势和很高的实用价值。与实时荧光定量PCR技术结合,可以定量拷贝数、省去PCR后处理,减少交叉污染,整个检测过程耗时短、准确、高效、特异。因此本文对多重荧光定量PCR技术的分类及各种方法的优缺点做了简要概述,并对近年来多重荧光定量PCR在动物中的应用概况及其研究进展,如在动物性食品卫生中的应用、细菌病诊断、病毒病诊断、饲料中动物源性成分的检测、抗性基因检测及肿瘤早期诊断等有关方面进行概述,旨在为该技术的进一步开发应用提供理论参考。 相似文献
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动物疫病监测在动物疫病防控中作用巨大,实验室检测是目前动物疾病监测的重要内容,特别是传染性疫病更离不开实验室检测,实验结果的准确性、有效性除实验方法、检测试剂、实验操作等因素影响外,从一开始就受到样本的采集、保存、运输等因素的影响.特别是在开展动物疫病的监测工作,监测结果是否具有代表性,是否能够真实反映出疫病的真实情况都与监测样本的采集有重要关系.规范化的样本采集与管理是质量控制动物疫病诊断、监测工作中至关重要的一环,关系到实验结果的准确性.动物疫病样本监测采集需要注意以下内容: 相似文献