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1.
本试验旨在研究不同浓度降钙素基因相关肽(CGRP)对猪小肠上皮细胞钠离子依赖型Ⅱb磷转运蛋白(NaPi-Ⅱb)表达和磷吸收的影响.选用第3～8代猪小肠上皮细胞进行试验,按单因素试验设计,将试验细胞分为1个对照组和5个CGRP(1×10-11～1×10-7 mmol/L)试验组,每组设6个重复.用4-甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞生长速度,采用比色法测定CGRP干预24 h后细胞上清液磷含量,用RT-PCR法检测NaPi-Ⅱb mRNA相对表达量,以及蛋白质印迹(Western blot)法检测NaPi-Ⅱb蛋白表达.结果表明:与对照组相比,不同浓度CGRP对细胞生长没有显著影响(P＞0.05);各试验组均极显著或显著地促进了磷的吸收和NaPi-ⅡbmRNA的相对表达量(P＜0.01或P＜0.05);除1×10-10 mmol/L组外均显著提高了NaPi-Ⅱb蛋白的表达(P＜0.05).研究结果表明,CGRP通过诱导小肠上皮细胞中NaPi-Ⅱb的表达促进细胞磷的吸收,其中以1×10-9、1×10-8 mmol/L浓度的CGRP促进效果较为显著. 相似文献
2.
为了探讨氟对体外培养的绵羊成骨细胞中核因子кB受体活化因子配体(RANKL)mRNA基因表达的影响,进行了绵羊成骨细胞体外培养,分别加入含浓度为0、10-6、10-5、10-4、5×10-4mol/L氟化钠(NaF)的培养液,并于第6天提取细胞总mRNA,用半定量RT-PCR方法分析RANKL mRNA表达水平的改变.结果表明,10-6、10-5、10-4、5×10-4 mol/L NaF均能刺激体外培养成骨细胞RANKL mRNA表达,当氟化钠浓度为10-5及5×10-4 mol/L时,可以明显促进RANKL mRNA表达(与对照组相比P＜0.01).这说明氟呈剂量依赖性地刺激成骨细胞RANKLmRNA的表达. 相似文献
3.
试验旨在研究葡萄籽原花青素(Grape Seed Proanthocyanidin Extract,GSPE)对绵羊前脂肪细胞增殖与分化的影响。选择1月龄健康小尾寒羊公羔羊,屠宰后取腹股沟白色脂肪组织。分离绵羊前脂肪细胞,并进行原代体外培养。诱导分化后,进行油红O的染色鉴定。将传代培养后的绵羊前脂肪细胞随机分成6个处理组,每个处理组3个重复,培养基内添加不同浓度GSPE(0、6.25×10~1、1.25×10~2、2.5×10~2、5×10~2、1×10~3ng/mL)。培养结束后,用CCK-8法测定GSPE对绵羊前脂肪细胞增殖的影响。绵羊前脂肪细胞由诱导分化培养基和分化培养基处理后,再用含不同浓度GSPE(0、6.25×10~1、1.25×10~2、2.5×10~2、5×10~2、1×10~3ng/mL)的培养基培养。培养结束后,测定甘油三磷酸脱氢酶(G3PDH)、脂肪酸合成酶(FAS)以及FASmRNA、激素敏感脂肪酶mRNA(HSLmRNA)。结果表明:不同浓度的GSPE具有促前脂肪细胞增殖的作用,且有明显的时间和浓度效应;在分化试验中,与对照组相比,不同浓度的GSPE能明显抑制TG合成,但在诱导分化第8天,仅6.25×10~1、1.25×10~2 ng/mL的GSPE对TG的合成有抑制作用;在诱导分化后期,GSPE降低了脂肪沉积过程中关键酶G3PDH、FAS的活性,对FAS mRNA的表达无明显影响(P0.05),显著降低HSL mRNA的表达(P0.01),并且GSPE是通过同时作用脂类生成与脂解来抑制脂肪沉积。 相似文献
4.
为了研究新孢子虫急性感染对小鼠体内不同器官中Toll样受体3(TLR3)表达的影响,试验将培养、纯化的新孢子虫Nc-1株速殖子通过腹腔注射途径感染5周龄C57BL/6小鼠(8×106个速殖子/只),感染后第2天和第8天分别采集小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏和脑,通过荧光定量PCR和免疫组织化学方法,分别从mRNA和蛋白质水平检测各器官中TLR3的表达量。结果表明:感染组小鼠脾脏和肺脏中TLR3 mRNA的相对表达量较对照组显著或极显著升高(P0. 05或P0. 01),其中脾脏中第2天和第8天TLR3 mRNA的相对表达量为对照组的6倍或9倍,肺脏中TLR3 mRNA的相对表达量约为对照组的4倍;肝脏和心脏中TLR3 mRNA的相对表达量约为对照组的2倍,但差异均不显著(P0. 05),脑中TLR3 mRNA的相对表达量未见明显变化。免疫组织化学结果与荧光定量PCR结果基本一致。说明新孢子虫急性感染可上调小鼠多个器官中TLR3的表达。 相似文献
5.
【目的】分析藏绵羊Krüppel样因子7(Krüppel-like factor 7,KLF7)基因表达特征,研究过表达该基因对前脂肪细胞增殖及分化的影响。【方法】从藏绵羊脂肪组织中分离前脂肪细胞进行培养及成脂诱导,应用实时荧光定量PCR技术检测KLF7基因在藏绵羊7个组织(大脑、皮下脂肪、肾脏、背最长肌、瘤胃、睾丸和回肠)和前脂肪细胞不同分化阶段(第0、2、4和8天)的mRNA相对表达水平;应用RT-PCR方法从藏绵羊脂肪组织中扩增KLF7基因CDS区序列,并将其连接到pcDNA3.1(+)真核表达载体获得pcDNA3.1-KLF7过表达质粒,转染前脂肪细胞;应用实时荧光定量PCR方法检测脂肪细胞增殖及分化标志基因mRNA表达水平;采用EdU和CCK-8方法分别检测过表达KLF7基因对EdU阳性细胞数和细胞活力的影响;采用油红O染色检测过表达KLF7基因后脂肪细胞脂滴生成量。【结果】KLF7基因在藏绵羊7个组织中均有表达,其中在大脑中的表达量最高,其次为皮下脂肪和肾脏,均显著高于其他组织(P<0.05);诱导分化第2、4和8天脂肪细胞mRNA表达量均显著高于分化前(P＜0.05),且分化第2天表达量最高;pcDNA3.1-KLF7过表达质粒转染前脂肪细胞2 d后显著或极显著抑制增殖标志基因CDK4、CyclinB1和CyclinD1的表达水平(P＜0.05;P＜0.01),极显著降低细胞活力及EdU阳性细胞数量(P＜0.01);pcDNA3.1-KLF7过表达质粒转染前脂肪细胞,诱导分化8 d后,脂肪细胞分化标志基因PPARγ、Glut4和ELOVL6的mRNA相对表达水平显著或极显著下调(P＜0.05;P＜0.01),且脂质沉积极显著减少(P＜0.01),表明过表达KLF7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞增殖及分化。【结论】KLF7基因在藏绵羊多个组织中广泛表达,且大脑、皮下脂肪、肾脏中表达量较高;诱导分化后脂肪细胞表达量显著高于分化前,且分化第2天表达量最高;过表达KLF7基因可抑制藏绵羊前脂肪细胞的增殖及分化。试验结果为阐明藏绵羊脂肪沉积的分子调控机制提供了基础数据。 相似文献
6.
旨在探索益生性酿酒酵母菌及其灭活菌对绵羊瘤胃外植体内β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的影响。本研究建立了绵羊瘤胃外植体培养方法,将不同浓度(10~4、10~5、10~6、10~7、10~8、10~9 CFU·mL-1)的酿酒酵母菌及其灭活菌与外植体共培养24 h后,通过qPCR和ELISA方法检测瘤胃外植体内SBD-1 mRNA和蛋白的表达变化,以分别确定活菌及其灭活菌诱导SBD-1表达最高的菌液浓度;然后用该浓度的活菌及其灭活菌对瘤胃外植体进行不同时间(2、4、8、12、16、20、24 h)的刺激,同样用qPCR和ELISA方法检测瘤胃外植体内SBD-1 mRNA及蛋白的表达变化,从而筛选出活菌及其灭活菌诱导SBD-1表达的最佳时间。结果表明,益生性酿酒酵母菌及其灭活菌均能显著促进绵羊瘤胃外植体SBD-1的表达(P<0.05)。当酿酒酵母菌浓度为10~7 CFU·mL-1、灭活菌浓度为10~8 CFU·mL-1分别诱导绵羊瘤胃外植体16 h时,SBD-1表达量分别达到最大,且二者与对照相比均呈极显著差异(P<0.01)。在最佳诱导条件下对比二者的诱导效果,酿酒酵母菌活菌高于其灭活菌。因此,益生性酿酒酵母菌及其灭活菌均能促进绵羊瘤胃外植体内SBD-1的表达,且活菌浓度为10~7 CFU·mL-1、灭活菌浓度为10~8 CFU·mL-1分别诱导16 h时,绵羊瘤胃外植体内的SBD-1的表达量分别达到最大,并且益生性酿酒酵母菌的诱导效果高于其灭活菌。 相似文献
7.
本试验旨在研究体外感染金黄色葡萄球菌与大肠杆菌对奶牛子宫内膜组织中细胞因子白介素-6(IL-6)、IL-1β和IL-8的表达及损伤程度的影响。以体外培养的奶牛子宫内膜组织作为研究对象,采用1×10~5～1×10~9 CFU/mL大肠杆菌与金黄色葡萄球菌对奶牛子宫内膜组织进行体外感染,通过实时荧光定量PCR和ELISA方法检测两种细菌刺激后奶牛子宫内膜组织中IL-6、IL-1β及IL-8 mRNA与蛋白的表达量,并用HE染色法观察两种细菌感染后奶牛子宫内膜组织病理学切片。结果显示,1×10~5～1×10~9 CFU/mL大肠杆菌体外感染后,奶牛子宫内膜组织中IL-6、IL-1β和IL-8 mRNA表达量均极显著高于空白对照组(P0.01);金黄色葡萄球菌感染浓度为1×10~5、1×10~6 CFU/mL时,IL-6、IL-1βmRNA表达量极显著高于空白对照组(P0.01),感染浓度为1×10~7 CFU/mL时,IL-6、IL-1βmRNA表达量显著高于空白对照组(P0.05),感染浓度为1×10~6 CFU/mL时,IL-8 mRNA表达量显著高于空白对照组(P0.05),其他感染浓度均与空白对照组无显著差异(P0.05)。奶牛子宫内膜组织感染1×10~5～1×10~9 CFU/mL金黄色葡萄球菌和大肠杆菌时,IL-6、IL-1β及IL-8蛋白表达量均极显著高于空白对照组(P0.01)。相同浓度的大肠杆菌感染奶牛子宫内膜组织后,IL-6、IL-1β及IL-8 mRNA与蛋白表达量均极显著高于金黄色葡萄球菌感染组(P0.01)。HE切片染色结果显示,大肠杆菌感染后仍有部分上皮细胞保留,而金黄色葡萄球菌感染后上皮细胞全部脱落。本试验结果表明,大肠杆菌与金黄色葡萄球菌感染奶牛子宫内膜组织后,引起的炎症反应不同。大肠杆菌感染后,促炎性细胞因子被显著上调,而金黄色葡萄球菌感染后破坏子宫内膜上皮细胞程度更加严重。 相似文献
8.
德氏乳酸菌对黄河鲤皮肤黏液中免疫和抗氧化指标以及皮肤中抗菌肽基因表达的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验主要研究了德氏乳酸菌(Lactobacillus delbrueckii)对黄河鲤(Cyprinus carpio Huanghe var.)皮肤黏液中免疫和抗氧化指标以及皮肤中抗菌肽基因表达的影响。将初重为(15.0±0.5)g的450尾黄河鲤随机分为5组,每组3个重复,每个重复30尾。5组试验鱼分别投喂含德氏乳酸菌0(对照组)、1×105、1×10~6、1×10~7和1×108CFU/g的饲料,饲养8周后,采集皮肤黏液和皮肤,测定皮肤黏液中免疫和抗氧化指标以及皮肤中抗菌肽基因[肝表达抗菌肽1(Leap-1)和肝表达抗菌肽2(Leap-2)]的相对表达量。结果显示:1×10~6和1×10~7CFU/g德氏乳酸菌组皮肤黏液中溶菌酶(LYZ)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及补体3(C3)、补体4(C4)含量均显著高于对照组(P0.05),同时其皮肤黏液中丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P0.05),而1×105和1×108CFU/g德氏乳酸菌组的上述指标与对照组差异不显著(P0.05)。皮肤黏液中酸性磷酸酶(ACP)活性各组之间差异均不显著(P0.05)。1×10~6CFU/g德氏乳酸菌组皮肤黏液中过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性显著高于对照组(P0.05),1×105、1×10~6和1×10~7CFU/g德氏乳酸菌组皮肤黏液中总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组(P0.05)。各试验组皮肤中抗菌肽基因Leap-1和Leap-2的相对表达量均显著高于对照组(P0.05),其中以1×10~7CFU/g德氏乳酸菌组最高。结果表明,饲料中添加1×10~6～1×10~7CFU/g的德氏乳酸菌能够提高黄河鲤皮肤的免疫功能和抗氧化能力,并能上调抗菌肽基因的表达。 相似文献
9.
《中国畜牧兽医》2020,(7)
为了研究单味中药对肠道菌群和肠黏膜损伤的调节和修复作用,选用金银花、连翘和紫花地丁三味清热类中药对大肠杆菌所致肉仔鸡肠道菌群失调和黏膜屏障功能障碍进行治疗,为单味中药在提高肠道细菌的有益菌群和保护肠黏膜屏障提供可靠的理论依据。选取100只1日龄雄性肉仔鸡,分成5组,每组20只,空白组正常饲喂,模型组和中药组于15～17 d腹腔注射大肠杆菌O_(78)(1.0×10~6 CFU/mL),1 mL/只。中药组在第18天开始饮用中药,连续7 d,各中药组动物给药量为生药量1 g/kg。在给药后第7和14天,每组取6只鸡心脏釆血,采用ELISA法按照试剂盒说明进行D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)和内毒素(ET)的检测。采集空肠肠段和盲肠。采用实时荧光定量PCR检测空肠紧密连接蛋白((闭合小环蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)和闭合蛋白-1(Claudin-1))的mRNA的相对表达量。盲肠送检测公司检测中药对盲肠菌群多样性的影响。试验结果表明,金银花、紫花地丁和连翘均可以降低给药后第7和14天肉仔鸡血清(DAO活性)、D-LA和ET含量。在给药后第7天,金银花组ZO-1和Occludin的mRNA相对表达量显著升高(P0.05);连翘组Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量显著升高(P0.05);在给药后第14天,金银花组ZO-1的mRNA相对表达量显著升高(P0.05),紫花地丁组ZO-1和Claudin-1的mRNA相对表达量显著升高(P0.05),连翘组ZO-1、Claudin-1的mRNA相对表达量显著升高(P0.05)。金银花、紫花地丁和连翘均可提高给药后第7天厚壁菌门占比(P0.05),金银花、紫花地丁可提高给药后第14天拟杆菌门占比(P0.05),金银花、紫花地丁抑制给药后第7和14天变形菌门的增殖,紫花地丁和连翘抑制给药后第7天放线菌门的生长(P0.05),连翘、金银花可以显著提高给药后7和14 d乳酸杆菌占比,紫花地丁可以显著提高给药后7 d乳酸杆菌占比(P0.05),紫花地丁显著提高给药后第14天未分类毛螺旋菌种相关菌属的占比。综上,金银花、紫花地丁和连翘均可以降低肉仔鸡血清DAO活性、D-LA和ET含量,减少毒素入侵。金银花可以提高ZO-1、Occludin的mRNA相对表达量,连翘可提高ZO-1、Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量,保护肠道黏膜;紫花地丁可提高ZO-1、Claudin-1的mRNA相对表达量。金银花、紫花地丁和连翘均可使肠道OTU数目增多,在不同程度上促进有益菌群繁殖,抑制致病菌群生长,具有调节肠道菌群结构的作用。 相似文献
10.
断奶仔猪小肠黏膜脂肪酸结合蛋白和二肽转运载体1mRNA表达发育性变化及谷氨酰胺对其的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验旨在研究断奶仔猪小肠黏膜脂肪酸结合蛋白( Ⅰ-FABP)和二肽转运载体1( PEPT1) mRNA表达的发育性变化及谷氨酰胺对其的影响.以69头(21±3)日龄断奶杜×长×大仔猪为试验动物,断奶当天选取3头猪进行屠宰,剩余66头随机分为2组,每组3个重复,每个重复11头.对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮+1％谷氨酰胺.断奶后第3、5、7、14天试验组和对照组分别选取3头猪进行屠宰(共计27头),取十二指肠、空肠和回肠黏膜组织样品,通过实时定量PCR法测定Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA的表达量.结果表明:1)Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA的表达量各肠段间无显著差异(P＞0.05);2)Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA在十二指肠、空肠和回肠的表达量均在断奶后急剧下降,断奶第3天的表达量最低,显著低于断奶当天(P＜0.05),而后逐渐升高,第14天达到峰值;3)试验组Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA表达量与对照组无显著差异(P＞0.05),但试验组表现出促使十二指肠、空肠、回肠黏膜的Ⅰ-FABP和十二指肠PEPT1 mRNA表达提前恢复至断奶前水平的趋势.结果提示,断奶仔猪Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA表达量随时间而变化,谷氨酰胺对断奶后Ⅰ-FABP和PEPT1 mRNA表达量的恢复有一定的促进作用. 相似文献
11.
姜黄素对早期断奶仔猪回肠黏膜形态、紧密连接蛋白和炎性因子基因表达以及血清免疫球蛋白水平的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
《动物营养学报》2016,(3)
本试验旨在研究姜黄素对早期断奶仔猪回肠黏膜形态、紧密连接蛋白和炎性因子基因表达以及血清免疫球蛋白水平的影响。选取50头胎次、体重相近的21日龄"杜×长×大"健康断奶仔猪,公母各占1/2,随机分为5组,每组10个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加50 mg/kg喹烯酮及200、300和400 mg/kg姜黄素的饲粮。预试期7 d,于第4天接种大肠杆菌;正试期21 d。结果表明:1)与对照组相比,300和400 mg/kg姜黄素组回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度显著提高(P0.05),绒毛宽度和隐窝深度显著降低(P0.05),回肠黏膜紧密连接闭锁蛋白(occludin)、闭锁小带蛋白(ZO-1)mRNA相对表达量显著提高(P0.05),白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和Toll样受体4(TLR4)mRNA相对表达量显著降低(P0.05),白细胞介素-10(IL-10)mRNA相对表达量、血清免疫球蛋白G(Ig G)和免疫球蛋白M(Ig M)水平显著提高(P0.05);2)喹烯酮组回肠绒毛宽度和TLR4 mRNA相对表达量显著低于对照组(P0.05),其余各项指标与对照组相比差异不显著(P0.05)。结果显示:添加300或400 mg/kg姜黄素可改善回肠黏膜上皮形态,增加肠黏膜屏障完整性,提高仔猪免疫力,其作用效果优于喹烯酮。 相似文献
12.
本试验旨在研究饲粮中单独或联合添加益生菌对蛋雏鸡生长性能、肠道形态和免疫功能的影响。选用396只1日龄海兰褐蛋雏鸡,随机分为4组,每组3个重复,每个重复33只,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加1×10^8 CFU/kg海洋红酵母菌、1×10^10 CFU/kg枯草芽孢杆菌和复合益生菌(1×10^8 CFU/kg海洋红酵母菌+1×10^10CFU/kg枯草芽孢杆菌)。试验期28d。结果表明:与对照组比,添加复合益生菌能提高蛋雏鸡15~28和1~28日龄的平均日增重并降低15~28日龄的耗料增重比(P<0.05);复合益生菌组蛋雏鸡十二指肠和空肠的绒毛高度及绒腺比提高(P<0.05);复合益生菌组蛋雏鸡血清IgA、IgG含量提高(P<0.05);复合益生菌组空肠IL-4、IL-6 mRNA相对表达量提高(P<0.05),海洋红酵母菌组空肠IL-4mRNA相对表达量提高(P<0.05),枯草芽孢杆菌组空肠IL-6mRNA相对表达量提高(P<0.05)。综上,饲粮中添加复合益生菌可有效提高蛋雏鸡的生长性能、改善肠道形态,并增强免疫功能。 相似文献
13.
《中国畜牧杂志》2017,(8)
本试验旨在研究饲粮中添加丁酸梭菌对仔猪回肠免疫信号通路相关蛋白和血清细胞因子的影响。选用12头(21±2)日龄、体重为(6.97±0.68)kg的杜×长×大商品杂交断奶仔猪,随机分为2个处理组,每组6头,单栏饲养。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加5×10~(11)CFU/kg丁酸梭菌,饲养14 d后屠宰。结果表明:试验组仔猪回肠TLR2/4以及负调控因子Tollip和Bcl3的mRNA表达量极显著高于对照组(P0.01),接头蛋白My D88的mRNA表达量显著高于对照组(P0.05);试验组仔猪血清中IL-8和TNF-α含量有上升趋势(P0.05)。综上可知,在仔猪饲粮中添加丁酸梭菌后,激活了TLR2/4信号通路,使仔猪处于免疫激活状态,提升了机体的免疫力。 相似文献
14.
凝结芽孢杆菌对断奶仔猪肠道抗氧化和抗病毒能力的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
《黑龙江畜牧兽医》2019,(24)
为了研究日粮中添加凝结芽孢杆菌对断奶仔猪肠道抗氧化和抗病毒能力的影响,试验选取24头21日龄的健康断奶仔猪(杜×长×大),随机分为3组(对照组、BC6组、BC7组),每组8个重复,对照组饲喂基础日粮,BC6组饲喂基础日粮+凝结芽孢杆菌(2×10~6 cfu/g饲料),BC7组饲喂基础日粮+凝结芽孢杆菌(2×10~7 cfu/g饲料),于试验第21天屠宰取样,检测空肠黏膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活力和丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_2O_2)含量,以及空肠炎性抗病毒和免疫调节相关基因[热休克蛋白1(HSPH1)、趋化因子(CCL2)、干扰素-α(IFN-α)、干扰素-β(IFN-β)、白细胞介素-4(IL-4)、抗氧化应激转录因子2(Nrf-2)基因]及相关蛋白[2’-5’寡聚腺苷酸合成酶1(OAS1)、抗黏液病毒1(MX1)]的相对表达量。结果表明:与对照组相比, BC6组空肠MDA、H_2O_2的含量显著降低(P0.05),HSPH1、IFN-β基因的相对表达量显著下调(P0.05),OAS1蛋白相对表达量显著升高(P0.05);BC7组空肠H_2O_2的含量显著降低(P0.05),SOD和CAT活力显著升高(P0.05),IL-4、HSPH1和Nrf-2基因的相对表达量显著下调(P0.05),IFN-β基因的相对表达量显著上调(P0.05),MX1蛋白相对表达量显著升高(P0.05)。说明日粮中添加凝结芽孢杆菌可以提高断奶仔猪肠道抗氧化能力和抗病毒能力,促进仔猪肠道吸收,从而维护肠道稳态,且日粮中添加2×10~7cfu/g的凝结芽孢杆菌效果更好。 相似文献
15.
试验旨在阐明雌激素(E2)对体外培养的奶牛输卵管组织中环氧合酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)与环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因表达的影响。分离培养奶牛输卵管组织,用不同浓度的E2作用于奶牛输卵管组织,采用实时荧光定量PCR与Western blotting检测COX-1与COX-2 mRNA和蛋白的表达量。结果表明,E2作用浓度为10-11 mol/L时奶牛输卵管组织中的COX-1与COX-2 mRNA相对表达量达到高峰;E2作用时间为8 h时COX-1 mRNA的相对表达量达到高峰,E2作用时间为2 h时COX-2 mRNA的相对表达量达到高峰;浓度为10-11 mol/L的E2作用不同时间后,COX-1蛋白的相对表达量在8~48 h显著升高;没有检测到COX-2蛋白的表达。 相似文献
16.
为了探讨Ghrelin在绵羊卵母细胞体外成熟过程中与BCL-2、BAX的相关性及Ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中可能的作用机理,试验在绵羊卵母细胞成熟液中添加500 ng/mL Ghrelin,采用实时荧光定量PCR分别在0,8,16,24小时时检测卵母细胞BCL-2、BAX的表达量。结果表明:试验组添加Ghrelin后8,16小时时卵母细胞BCL-2 mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),但成熟后16,24小时时较8小时时有下降趋势;下降到24小时时,其表达量与0小时时没有显著变化(P>0.05);8,16小时时试验组与对照组比较差异显著(P<0.05),0,24小时时差异不显著(P>0.05)。试验组添加Ghrelin后8,16,24小时卵母细胞BAX mRNA相对表达量较0小时时下降,且差异显著(P<0.05),但成熟后16,24小时时与8小时时比较有上升趋势;在8,16小时时试验组较对照组BAX mRNA相对表达量均有所下降,且差异有显著性(P<0.05),而在0,24小时时差异不显著(P>0.05)。说明Ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中与BCL-2和BAX的表达存在相关性,推测Ghrelin在卵母细胞成熟过程中存在积极调控作用。 相似文献
17.
本试验旨在运用高通量测序方法研究醋酸棉酚对绵羊瘤胃液真菌多样性的影响。选取8只健康、体重为(49.13±4.70)kg、安装有永久性瘤胃瘘管的哈萨克羊母羊,随机分为2组,分别为对照组和试验组,每组4只。试验期对照组绵羊饲喂基础饲粮;试验组绵羊第1~26天在基础饲粮中添加600 mg/(d只)醋酸棉酚,在第27~47天醋酸棉酚添加量增加至1200mg/(d只)。采集试验期正试期第1、20、37和47天瘤胃液样品,运用Illumina Hiseq平台测序分析绵羊瘤胃液真菌变化。结果显示:1)由样品物种稀释曲线和累积曲线可以看出,测序深度已经覆盖了瘤胃液样品中大部分的真菌。2)第1、20、47天,试验组与对照组相比瘤胃液真菌的Alpha多样性指数差异不显著(P>0.05);第37天时,试验组瘤胃液真菌的Shannon和Simpson指数显著高于对照组(P<0.05)。3)主坐标分析图显示,试验组与对照组瘤胃液真菌样品聚集在一起。4)在属水平上,第20和37天,试验组瘤胃液真菌区系中毛霉菌属(Mucor)相对丰度显著高于对照组(P<0.05)。第47天,试验组绵羊瘤胃液真菌区系中Metschnikowia相对丰度显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,低浓度醋酸棉酚对绵羊瘤胃液真菌多样性无明显影响,醋酸棉酚浓度增加至1200mg/(d只)时,Simpson和Shannon指数显著升高;醋酸棉酚对绵羊瘤胃液真菌主要优势菌属组成无显著影响。 相似文献
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《畜牧兽医学报》2015,(12)
旨在探索内皮素3(Endothelin 3,EDN3)在不同毛色绵羊皮肤的表达差异以及对毛色的影响。以不同毛色绵羊为研究对象,通过荧光定量PCR技术分析EDN3基因在不同毛色绵羊皮肤的表达量,通过免疫组织化学和ELISA方法对EDN3蛋白在不同毛色绵羊皮肤中的定位和表达进行研究。1)qRT-PCR结果显示,EDN3在白色绵羊皮肤的相对表达量为5.540 6±0.030 7,在黑色绵羊皮肤的相对表达量为1.005 8±0.062 0。黑白花色绵羊的白色区和黑色区的相对表达量分别为4.341 9±0.087 7和1.150 1±0.005 3。2)ELISA结果显示,EDN3在白色绵羊皮肤中的表达量为128.424 7±2.223 4,在黑色绵羊皮肤的相对表达量为25.114 4±3.248 3。在黑白花色绵羊白色皮肤中的表达量为93.945 3±7.562 2,黑色皮肤的表达量为28.606 0±9.295 9。3)免疫组织化学显示,EDN3在绵羊皮肤毛囊的毛基质、内外毛根鞘、毛乳头等区域均有表达。综上表明,EDN3在不同毛色绵羊皮肤中均可正常表达,且表达量存在显著差异。EDN3是维持黑色素细胞存在不可缺少的基因,但不影响绵羊黑白花的形成。 相似文献
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本试验旨在研究饲粮中添加苏氨酸和色氨酸对接种猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒苗生长猪免疫反应的影响。试验选取16头平均体重为(29.11±4.41)kg健康去势生长猪,按体重相近原则随机分为4个处理,每个处理4个重复,每个重复1头猪。采用2×2两因子试验设计,设2个苏氨酸和色氨酸添加水平,按比例分别为赖氨酸∶苏氨酸∶色氨酸=100∶64∶18(NRC对照水平)和赖氨酸∶苏氨酸∶色氨酸=100∶80∶26(试验水平);2个氨基酸添加水平下按免疫处理情况分为注射磷酸盐缓冲液(PBS)和接种PRRS弱毒苗(试验开始当天和第35天肌肉注射2 mL PBS或PRRS弱毒苗)。试验第14、28、35和49天收集血样,检测血浆中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量和血清中免疫球蛋白G(IgG)含量;试验第49天屠宰取样,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测肺组织中Toll样受体1～10(TLR1～TLR10)mRNA相对表达量。结果表明:与饲粮添加NRC对照水平苏氨酸和色氨酸相比,注射PBS条件下,饲粮添加试验水平苏氨酸和色氨酸显著提高了生长猪试验第14和28天血清IgG含量(P<0.05);接种PRRS弱毒苗条件下,饲粮添加试验水平苏氨酸和色氨酸显著提高了生长猪试验第35天血清IgG含量(P<0.05)。试验第14、28和35天,接种PRRS弱毒苗生长猪血浆IFN-γ、IL-10、IL-1β含量均显著高于注射PBS生长猪(P<0.05);试验第14、28、35和49天,接种PRRS弱毒苗条件下,与饲粮添加NRC对照水平苏氨酸和色氨酸相比,饲粮添加试验水平苏氨酸和色氨酸提高了生长猪血浆IL-1β(试验第14天除外)、IFN-γ(试验第49天除外)含量,降低了血浆IL-10含量,但差异均不显著(P>0.05)。接种PRRS弱毒苗生长猪肺组织中TLR1～TLR7、TLR9、TLR10 mRNA相对表达量显著高于注射PBS生长猪(P<0.05);接种PRRS弱毒苗条件下,与饲粮添加NRC对照水平苏氨酸和色氨酸相比,饲粮添加试验水平苏氨酸和色氨酸显著提高了生长猪肺组织中TLR1～TLR3、TLR7、TLR8、TLR10 mRNA相对表达量(P<0.05),显著降低了TLR4、TLR6、TLR9 mRNA相对表达量(P<0.05)。由结果分析可知,饲粮中添加苏氨酸和色氨酸可上调TLR3、TLR7、TLR8 mRNA相对表达量,表明PRRS弱毒苗可能激活了TLR3、TLR7、TLR8信号通路,进而提高血清免疫球蛋白含量,促进炎症细胞因子产生,最终强化获得性免疫。 相似文献
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研究孕酮(P4)对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素2(SBD2)基因表达的影响,探讨P4调节SBD2表达的潜在机制。建立绵羊输卵管上皮细胞体外培养体系,用不同浓度(10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10mol/L)P4分别处理绵羊输卵管上皮细胞0、2、6、12、24、48h,筛选P4诱导绵羊输卵管上皮细胞SBD2mRNA表达的最佳条件。然后使用10-6mol/L孕激素核受体拮抗剂RU486,50μmol/L蛋白激酶C(PKC)信号通路阻断剂H7预处理细胞1h,再使用P4诱导SBD2mRNA表达的最佳条件处理细胞,同时设只添加阻断剂(RU486和H7)处理组、只添加孕酮(P4)处理组和空白对照组,通过RT-qPCR技术检测SBD2mRNA的表达变化。10-9mol/LP4诱导绵羊输卵管上皮细胞6h和24h时SBD2mRNA表达显著高于对照组(P<0.01),且与P4组相比,添加RU486和H7后显著抑制了P4诱导的SBD2mRNA的表达水平(P<0.01)。P4以浓度和时间依赖性方式显著增加SBD2mRNA表达,并且诱导可能通过孕酮核受体(PR)介导的基因组途径以及PKC信号通路来提高绵羊输卵管上皮的先天免疫防御能力。 相似文献