糙皮侧耳以果皮为基质固态发酵产漆酶及其酶学性质的研究     

李梅  吴小波  李萌  吕聪  董旭杰  曹福祥 《食用菌学报》2018,(1)

以漆酶活性为指标,利用不同果皮为基质对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)固态发酵产漆酶的条件进行优化并对所产漆酶进行纯化,研究纯化后漆酶的酶学性质。结果表明:以柚皮为培养基质(5g柚皮、25mL水、20μL吐温-80),30℃固态发酵10d,糙皮侧耳产漆酶的活性最高,比活力为21800U/g;在该条件下将糙皮侧耳所产漆酶的粗酶液用硫酸铵沉淀、透析、浓缩、DEAE-纤维离子交换柱层析得到漆酶蛋白单一条带,SDS-PAGE检测蛋白相对分子质量约66000;该漆酶命名为Lac h2,其最适反应温度为60℃,最适反应pH值为4.5;在30～50℃,pH 4.5～6.0范围内稳定;金属离子Zn~(2+)、Mn~(2+)、Cu~(2+)和Mg~(2+)对纯化的漆酶Lac h2的酶活力有促进作用而Ca~(2+)、Ag~+和Fe~(2+)对Lac h2的酶活力有抑制作用。  相似文献   

金属离子对香菇纤维素酶、漆酶和木质素过氧化物酶活性的影响     

肖冬来  张迪  林衍铨  杨菁 《中国食用菌》2018,(3)

测定了6种常见金属离子对香菇(Lentinula edodes)羧甲基纤维素酶、漆酶和木质素过氧化物酶活性的影响。结果表明,Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Fe~(2+)、Mg~(2+)对香菇羧甲基纤维素酶活性具有激活作用,其中K~+激活效果最强;Fe~(2+)能明显抑制漆酶活性;Mn~(2+)、Ca~(2+)、K~+、Mg~(2+)和Fe~(2+)对木质素过氧化物酶活性有抑制作用,Na~+对木质素过氧化物酶活性具有激活作用。  相似文献   

白灵侧耳菌渣中漆酶的分离纯化与酶学性质     

《食用菌学报》2019,(4)

依次采用离子交换层析(DEAE-Sepharose、CM-Sepharose和SP-Sepharose)和凝胶过滤层析(Superdex 75 HR10/300)从白灵侧耳(Pleurotus tuoliensis)菌渣中分离纯化得到一种漆酶,该酶比活力为176.1 U/mg,纯化倍数为90.7;采用EDMAN降解法和HPLC-LTQ-Orbitrap测序得到该漆酶的N端和3条肽段序列分别为LHGTHAAIGP和PGVLVQGNKGDN、ISMSCDPNFTFS、DSIQIFAGQRYSFVLNAN;对该漆酶的理化性质进行研究,结果表明:该酶相对分子质量为7.0×10~4,最适反应温度为50℃,最适反应pH为4.0,具有较好的酸耐受性,在pH 2～4孵育1 h后能保持90%以上的活性。Cd~(2+)、Pb~(2+)、Hg~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)和Fe~(2+)在1.25～10 mmol/L浓度下对该酶活性具有抑制作用。  相似文献   

双孢菇漆酶酶学性质及染料脱色初探   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘新颖  朱启忠  赵春媛  魏翩翩 《北方园艺》2010,(14):182-183

对双孢菇漆酶的酶学性质及对染料的脱色性能进行了研究。结果表明:双孢菇漆酶的最佳反应温度和保存温度都是25℃,最佳反应pH和保存pH都是5.0,对大多金属离子不敏感,但Al3+对其有明显抑制作用。对8种工业染料中的4种脱色效果比较明显,其中弱酸艳蓝-RAWL的脱色率达到79%。  相似文献   

红芝组成型漆酶酶学性质的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

赵亮亮  谌斌  李燕荣  孙秋芳  冯志菊 《北方园艺》2010,(5):138-140

研究了温度、pH值、金属离子和抑制剂对红芝漆酶活性和稳定性的影响,测定该漆酶的Km值和Vmax。结果表明:红芝漆酶最适反应温度为60℃,低于50℃时较稳定;最适pH值为3.0,在pH 2.5~4.0的范围表现出较强的稳定性;Cu2+、Mn2+、Mg2+对酶活有促进作用,而Cr3+、Hg2+、Fe2+和抑制剂EDTA、DMSO、SDS对酶活有抑制作用;以愈创木酚为底物时Km值为0.13 mmol/L,最大反应速率Vmax为234 nmol.mL-1.min-1。  相似文献   

云芝发酵液中α-半乳糖苷酶酶学特性的研究     

杜芳  雷萍  吴亚召  张文隽  王贺祥 《中国食用菌》2018,(2)

为了研究云芝(Trametes versicolor)发酵液中α-半乳糖苷酶的生理生化性质,并筛选提高该酶稳定性的共溶剂,将α-半乳糖苷酶在不同p H缓冲液、不同反应温度、不同金属离子溶液以及不同保护剂中孵育一定的时间,并测定酶活。结果表明,α-半乳糖苷酶的最适反应p H为3.0,最适反应温度为60℃;金属离子Pb2+和Fe3+对酶活性有较强的抑制作用,并随着浓度的升高抑制作用有所增强,Cd~(2+)、Cu2+和Hg2+致使α-半乳糖苷酶的活性降低20%~50%,Ca2+、Mg2+、Zn2+和Fe2+等离子对该酶的活性影响不明显;保护剂筛选结果显示,2 mmol·L-1甘露醇对该酶热稳定性的保护效果最好,其次是海藻糖、蜜二糖、棉籽糖、L-半胱氨酸、甘油和黄原胶等。  相似文献   

杏鲍菇漆酶的生物学特性   总被引：12，自引：2，他引：12  

兰瑞芳  林少琴  林玉满  冯珊 《食用菌学报》2002,9(2):14-16

从杏鲍菇、双孢蘑菇、美味侧耳、茶薪菇、凤尾菇和香菇子实体中提取漆酶，用分光光度法测定酶活，发现杏鲍菇漆酶酶活最高，实验结果表明，杏鲍菇漆酶是一种较稳定的高温酶，其最适PH为3．0，最适温度60℃；Pb^2＋,K^ 对酶活有较大的激活使用，而Fe^3 ,Fe^2 则对酶活有较强的抑制作用。  相似文献   

香菇漆酶的纯化及部分性质研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

王方忠  朱启忠  董学卫  林金飞  曲悦文  徐国英 《北方园艺》2008,(6)

对香菇漆酶进行了丙酮分级沉降、半透膜透析、DEAE一纤维素及Sephadex G100柱层析纯化,并研究了漆酶的产酶曲线及酶作用最适条件.,结果表明:在该培养条件下,香菇第10天达产酶高峰,峰值酶活为216 U/mL,酶作用的最适pH值为3.6,在pH值3.6～4.6有较强的稳定性.最适酶解温度为30℃,Ba2 、Cu2 对香菇漆酶有激活作用,而Ag 、Fe3 则能明显抑制漆酶活性,其它离子影响相对较小.以邻联甲苯胺为底物的表观Km值为1.68 mmol/L.  相似文献   

三色雷蘑核糖核酸酶的分离纯化和理化性质     

耿雪冉  张巧毅  常明昌  徐丽婧  程艳芬  王贺祥 《食用菌学报》2019,(2):59-64

依次采用离子交换层析(DEAE-Cellulose、CM-Cellulose和SP-Sepharose)和凝胶过滤层析(Superdex 75 HR10/300 GL)从三色雷蘑(Leucopaxillus tricolor)子实体中分离纯化得到一种核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)。该酶比活为1406 U/mg,纯化倍数为154,通过HPLC-LTQ-Orbitrap测序得到4条肽段序列,分别为DMAVSYLSR、IGLSSIPR、ILGRFVVDTYK和SGKANAATPK。该核糖核酸酶的相对分子质量为15000,最适反应pH为 9.0,最适反应温度为40 ℃,热稳定性高,80 ℃孵育1 h后能保持90%以上的活性:Cu^2+、Ca^2+、Mn^2+、Cd^2+和Al^3+在1.25~10 mmol/L浓度下对该酶活性具有抑制作用,且抑制作用随着金属离子浓度的升高而变强;Fe^2+在1.25~5 mmol/L的浓度下,Pb^2+、Zn^2+、Mg^2+、Hg^2+、Fe^3+在1.25~2.5 mmol/L 的浓度下对该酶的活性有促进作用。  相似文献   

包埋法固定双孢菇漆酶及其应用研究     

刘新颖  朱启忠  赵春媛  赵垒 《北方园艺》2010,(2):151-153

采用海藻酸钠包埋法固定双孢菇漆酶,优化固定条件并研究了固定化酶酶学性质,以及其在染料脱色方面的应用。结果表明:最适固定条件为海藻酸钠10g/L,CaCl20.25mol/L,酶与海藻酸钠体积比为1。相比于游离酶,固定化酶的最适反应温度与保存温度和前者相同,但固定化酶作用的温度范围更广,且固定化酶提高了游离酶的热稳定性。固定化酶与游离酶相比更耐酸碱。对8种工业染料中4种染料脱色效果较为明显,其中弱酸艳蓝RAWL的脱色率达64.7%。固定化酶优化了游离酶的部分酶学性质,并具有一定应用价值。  相似文献   

不同培养基成分对灵芝漆酶酶活的影响     

《食用菌》2015,(3)

灵芝具有巨大的潜在漆酶生产能力。研究采用ABTS法测定灵芝漆酶的酶活,比较液体发酵培养基中不同培养基成分对灵芝漆酶酶活的影响。结果显示:PDB加富培养基、Cu2+培养基诱导漆酶最大酶活期提前;PDB加富培养基有利于灵芝菌丝的前期生长及漆酶的产生,秸秆粉对漆酶酶活诱导作用最大、Cu2+培养基次之,Ca2+对试验灵芝菌株没有明显的影响。  相似文献   

平菇漆酶对农药六六六降解作用研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘绍雄  李建英  刘春丽  王明月  张微思  罗孝坤 《中国食用菌》2018,(5)

研究了平菇(Pleurotus ostreatus)菌株产漆酶规律、漆酶对农药六六六的降解作用和农药消解动态变化。结果表明:平菇菌株在液体培养基中,漆酶酶活性随着培养时间的增加先逐渐增强, 8 d达到峰值,随后逐渐降低;平菇漆酶对农药六六六具有降解作用,漆酶酶活性与农药降解呈正相关关系;在菌丝生长过程中,农药六六六残留量随着菌丝的培养时间延长而逐渐减少,半衰期为7.0 d,农药六六六对平菇漆酶影响较大,降低了培养基中漆酶酶活性。  相似文献   

真姬菇融合菌株生物学特性及生产性能的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘建忠  孙淑静  胡开辉  熊芳  肖雅敏  陈明祥  饶榆平  张俊兰 《中国食用菌》2010,29(3):22-25

运用原生质体融合与漆酶转化体系筛选到一株真姬菇融合菌株(金山1号),研究了不同培养基配方、温度、pH及含水量对该菌株菌丝生长的影响,并对该菌株的漆酶活性、生产特性进行了初步分析。结果表明,金山1号在PDA胡萝卜培养基上菌丝生长最快、活力较强,菌丝最适生长温度为25℃,最适pH为6.5,最适含水量60%～65%,漆酶活力为3.95 U·mL-1,生产周期可缩短3 d～5 d,生物学效率72.86%,与真姬菇相比提高了17.15%,表现出该融合菌株具有良好的生产应用价值。  相似文献   

草莓果实成熟过程中Ca~(2+)-ATPase活性变化及酶学特性   总被引：8，自引：1，他引：8  

樊秀彩  关军锋  刘崇怀  张继澍 《果树学报》2003,20(2):99-102

以不同成熟度的草莓果实为试材,研究了草莓果实成熟过程中Ca2+-ATPase活性变化规律、最适pH值、动力学参数Km值和Vmax值。研究结果表明,草莓果实从开始成熟时(绿熟期)Ca2+-ATPase活性不断升高,果实完全成熟时(粉红期)达到最大值,随着成熟后的不断衰老,其活性逐渐降低;该酶的最适pH值为7.0;不同成熟阶段果实Ca2+-ATPase反应所需的Ca2+浓度有所不同,EGTA对各成熟阶段草莓果实的Ca2+-ATPase活性的抑制作用存在明显的差异。经对Ca2+-ATPase的动力学分析表明,不同成熟度果实Ca2+-ATPase的Km值和Vmax值不同,从果实开始成熟Km值逐渐降低,衰老时又逐渐上升,变化趋势与酶活性变化趋势相反;Vmax值变化趋势与酶活性变化趋势相同。2+  相似文献   

云芝漆酶的分离纯化和理化性质及抗增殖活性   总被引：1，自引：0，他引：1  

马茜茜  李淼  王贺祥 《食用菌学报》2010,17(2)

采用DEAE-cellulose, CM-cellulose和 Q-Sepharose离子交换层析和Superdex 75 凝胶过滤层析,从云芝(Coriolus versicolor)发酵液中纯化得到了一种漆酶, SDS-PAGE 电泳检测其为单一蛋白,分子量为67 kDa,N-端部分氨基酸序列为GIGPVADLTITNAAV.该酶可以催化氧化多种底物,其中对ABTS[ 2,2,-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonate)]的催化作用最强.最适反应条件为40 ℃, pH 5.0,其活性可以被Cu2+ 激活,被Fe3+、Hg2+、Fe2+抑制.该酶对HIV-1逆转录酶、乳腺癌MCF7细胞和肝癌HepG2细胞均具有抑制作用,其IC50 分别为 1.5 μmol/L、 2.3 μmol/L 和 4.4 μmol/L.  相似文献   

香菇漆酶同工酶的部分酶学性质的研究     

王方忠  朱启忠  董学卫  林金飞  曲悦文  顾文辉 《北方园艺》2008,(7)

通过丙酮分级沉淀、DEAE-纤维素离子柱层析和Sephadex G100柱层析得到两种香菇漆酶同工酶,分别命名为lac1和lac2,并对其理化性质进行了研究.考察了香菇漆酶同工酶最适反应温度和pH值、热稳定性和pH值稳定性、反应动力学常数以及金属离子对酶活的影响.试验结果表明:Lac1、lac2最适作用温度都为30℃,在不高于40℃的条件下保存30 min,lac1残余酶活在60%以上,lac2在不高于60℃有较高热稳定性,残余酶活在80%以上.最适pH值,lac1为3.6,lac2为4.0.pH值3.0～4.8,lac1有较强稳定性,在pH值4.0～4.6,lac2有较强的稳定性.以邻联甲苯胺为底物lac1和lac2的Km分别为0.964 mmol/L和1.38 mmol/L.金属离子Cl-对lacl有激活作用,Ag 、Mn2 对lac1有抑制作用.金属离子Ba2 和Cu2 对lac2有激活作用,Fe3 、Cl-、Ca2 、Zn2 、Ag 、Mn2 对lac2有抑制作用.  相似文献   

响应面法优化金针菇漆酶产酶条件     

张嘉清  牛丽  单玉虹  张天宇  唐小婷  王越  张建伟  马懿贤  王霞  王盼盼  冯九海  梁倩倩  丁玲强 《食用菌》2022,(3):4-8

高效获得金针菇闽金1号产漆酶条件,为实现漆酶大规模生产提供参考。采用单因素试验、P-B试验、响应面法（RSM）、中心组合试验（CCD）对闽金1号产漆酶的液体培养基组成进行优化。结果表明：最优碳源和氮源为蔗糖、蛋白胨+酵母粉,蔗糖、MgSO₄、KH₂PO₄对漆酶活性有显著影响,最优产漆酶培养基组成为蔗糖22.27 g/L、MgSO₄0.96 g/L、KH₂PO₄1.25 g/L,在此条件下,漆酶活性为945.981 U/L,是原始条件下（334.73U/L）的2.83倍。  相似文献   

木耳漆酶高产菌株筛选及其发酵条件的研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

杨建明  张小敏  刑增涛  陈明杰  曹晖  谭琦  潘迎捷 《中国食用菌》2004,23(6):40-44

通过运用不同检测方法对木耳属中的三个种的 2 7个菌株的产过氧化物酶、漆酶能力的检测 ,筛选得到一漆酶高产菌株毛木耳 (Auriculariapolytricha)AP4。并且对AP4的产漆酶的发酵条件进行了初步研究。摇瓶实验产漆酶的最佳培养基的成分为 :碳源羧甲基纤维素(CMC) 5g/L ,氮源NH4NO3 L -天冬酰胺 (L -As paragine) 2 4mmol/L ,培养基的初始pH4 0 ,培养温度2 5℃。  相似文献   

香菇中γ-谷氨酰转肽酶的分离纯化及其酶学性质研究     

尹洁  朱军莉  傅玲琳  励建荣 《食用菌学报》2009,16(2)

通过(NH4)2SO4沉淀、Phenyl Sepharose FF疏水层析分离纯化香菇中的γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase,GGT),纯化后的GGT的比活力到达了19.59 U/mg.SDS-PAGE分析表明,GGT由分子量分别为28 kDa和60 kDa的两个亚基组成.酶学性质试验结果表明,GGT反应的最适温度为37 ℃,最适pH 值为7.6;金属离子Na+、K+和Ca2+对酶有激活作用,而Ag+、Cu2+、Zn2+和Fe3+则有抑制作用;试验范围内,GGT水解γ-glutamyl-p-nitroanilide的米氏动力学参数Km 值为2.601 μmol/mL,Vmax值为0.0287 μmol/min;组成的氨基酸中,Glu和Asp含量较高,Met和Cys含量较低.  相似文献   

桑黄漆酶的发酵条件研究初报   总被引：1，自引：0，他引：1  

雷萍  吴亚召  张飞龙  张文隽  董艳鹤  王成章  宫坤 《中国食用菌》2012,(5):26-28

采用液体深层培养方法通过不同碳源、氮源、pH值、温度等因素对桑黄产酶量的影响,研究桑黄合成漆酶的最适发酵条件。采用L9(34)正交设计法对桑黄合成漆酶发酵培养基进行了优化,初步筛选出了桑黄合成漆酶发酵培养基。结果表明,培养基为玉米粉1%、麦麸1%、葡萄糖2%、蛋白胨0.5%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、添加Cu2+浓度60μmol.L-1,维生素B1 1 mg.100-1.mL-1,漆酶产量最高,为7 666 U.L-1。  相似文献