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纪成刚 《河南畜牧兽医(综合版)》2011,32(12):22-22
1单独喂养成年公兔应单独喂养，一兔一笼，兔笼坚固，笼门严紧，防止公兔外逃、斗殴造成损失。公母兔笼应有一定距离，以避免异性气味刺激，引起公兔过度消耗精力或造成公兔性欲降低。种公兔兔笼要宽敞，便于公兔活动。 相似文献
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卵巢对公兔精子发生的生理作用 总被引：1，自引：0，他引：1
将同窝成年母兔卵巢移植给公兔，母兔卵巢可在公兔体内产生生理作用，其雌二醇分泌量高达母兔体内正常量的５．０倍。这未能抑制公兔的睾酮分泌，反而改善了公兔的性机能及精子发生能力。公兔采精成功率比移植前提高７７．４％（Ｐ＜０．００１）。每次采得的精子密度，精子活力均提高，射出活精子数增多。 相似文献
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本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细胞冻存前和复苏后存活率分别为97.2%和92.6%(P>0.05),生长曲线呈"S"形,细胞群体倍增时间为36h,体外培养14代后仍能保持正常核型。以其作为核移植供体细胞,核移植重构胚卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数分别为61.9%、13.0%和37枚,移植了重构胚的3头代孕母猪均妊娠,并且有1头母猪产下1头正常的克隆猪。综上所述,利用版纳微型猪近交系成年猪能建立稳定的成纤维细胞系,该细胞系作为核移植供体细胞可获得版纳微型猪近交系克隆猪。 相似文献
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《中国牧业通讯》2000,(12):30-31
一、培育过程 鲁西茌平长毛兔是以德系安哥拉为基础母兔，通过导入蒙德、唐行、浙系兔及中国白兔血统，采取杂交创新，同质选配，横交固定等育种措施定向培育而成，具有体型外貌一致，遗传性能稳定，产毛量高，粗毛含量适中的特点，符合毛纺工业的需求和现代毛兔的发展方向。 二、外貌特征 鲁西茌平长毛兔头型独特为猫头型，双耳大而直立，耳尖有一撮毛，耳背有少量绒毛，额颊毛丰满，腹毛脚毛浓密。成年公兔体重4.59千克，母兔体重5.15千克。 三、生产性能 1、产毛性能：该兔产毛量居国内先进水平，成年兔年平均产毛量1360.05克，其中公兔1331.97克，母兔1388.12克；粗毛率平均13.50％，其中公兔13.40％，母兔13.60％；饲料报酬高，毛料比1：42，饲养效益显著。 相似文献
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成年小鼠雄性生殖细胞的冷冻保存 总被引：1，自引：0，他引：1
在含10％小牛血清（NBS）的DMEM培养基中，分别各添加5％，10％，15％，20％和25％的二甲基亚砜（DMSO）,丙二醇（PG），乙二醇（EG）和甘油（G），对成年小鼠睾丸生殖细胞冷冻保存；复苏后台盼蓝染色测定细胞复苏率。结果显示，5％－25％DMSO冻存液组的细胞复苏率分别为88.5%,88.0%,65.6%及51.3%;5%-25%PG冻存液组的细胞复苏率分别为87.2%,86.4%,79.0%,73.4%及40.1%.;5%-25%EG冻存液组的细胞复苏率分别为6.6%,80.9%,60.8%,51.3%及30.0%;5%-25%G冻存液组的细胞复苏率分别为86．5％，86．3％，65．3％，36．0％及31．4％。其中各抗冻剂5％和10％组的细胞复苏率最高，与15％组相比均存在显著或极显著差异。4种抗冻剂的最高细胞复苏率之间无显著差异。DMSO，PG，EG和G分别冷冻保存成年小鼠睾丸生殖细胞对的最小损失率分别为4．8％，6．1％，6．7％，6．8％。结果表明，采用慢速冷冻时，DMSO，PG，EG及G均适宜用作成年小鼠睾丸生殖细胞的抗冷冻剂，最佳使用含量均为5％－10％。成年小鼠睾丸生殖细胞分别在含5％－10％的DMSO，PG，EG和G的DMEM（含10％NBS）冻存液中，2步慢速降温，液氮储存，37℃水浴复苏，是一种具有较高复苏率的冷冻保存方法。 相似文献
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《中国兽医杂志》2018,(9)
为了探究中药饲料添加剂"消暑促精散"对夏季公兔生殖能力的影响,选取24只成年新西兰种公兔,随机分为对照组和试验组,每组12只,试验组每天饲喂中药4. 4 g/只。公兔每3 d采精一次,记录爬跨情况,检测采精量、精子总数、密度、存活率、畸形率,试验第30天测量体温,第35天剖杀,取睾丸、附睾制备切片并观察。结果显示,试验组有爬跨行为公兔数增为(8. 46±1. 16)只/d,公兔采精量升高为0. 79±0. 16 m L,精子总数升高为(1 858. 31±461. 25)个/20μL,精子密度升高为(2. 0581±0. 42) 107/m L,精子畸形率降为(29. 12±0. 0784)%,与对照组相比差异显著(P 0. 05),精子存活率升高,公兔体温为(38. 24±0. 39)℃,处于正常水平。试验结果表明,"消暑促精散"对夏季公兔生殖能力有促进作用。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2014,(15)
为了研究犬睾丸支持细胞体外生长和生物学特征,试验采用组织培养法和酶消化法分离该细胞,并通过H.E.染色、油红O染色和AKP染色对细胞进行鉴定。结果表明:组织培养法和酶消化法均获得了成年犬睾丸支持细胞,细胞增殖活力旺盛;H.E.染色可见睾丸支持细胞呈长梭形或不规则的多边形,有3~4个突起,胞质呈浅红色;油红O染色可见支持细胞的胞质中存在脂滴,被染成桔红色,而细胞核不着色。将支持细胞与生殖细胞共培养,精原干细胞可以贴附于支持细胞表面进行体外增殖,而难以直接贴于皿底生长。AKP染色可见精原干细胞呈AKP阳性,而支持细胞呈阴性。说明成年犬支持细胞可以在体外进行培养,具有其他物种支持细胞共有的一些生物学特征。 相似文献
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小鼠睾丸支持细胞分离培养及生物学特性鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
为了揭示睾丸支持细胞在精子发生及睾丸免疫豁免中的生物学作用,采用胰蛋白酶、胶原酶分步消化法和1/3浓度的Hank′s低渗液、50mmol/L Tris-HC(l pH7.1)液分别低渗处理及油红O脂质染色法对16～22d的幼鼠睾丸进行分离、纯化和生物学特性鉴定。结果表明:分离、纯化后的睾丸支持细胞损伤少、活率高、睾丸支持细胞占培养细胞总数的90%以上;根据形态学观察及油红O脂质染色法鉴定,睾丸支持细胞的生长状态良好,细胞突起很多,核仁清晰,胞质中可见大小不等的红色空泡状脂质小滴。 相似文献
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旨在建立牦牛与犏牛睾丸支持细胞分离培养及鉴定方案,比较两种牛睾丸支持细胞的生物学特性。本研究分别采集24月龄的3头健康公牦牛与3头F1代公犏牛睾丸组织作为2个样品组,其中每组3个生物学重复,分别通过混合酶消化、差速贴壁和饥饿处理分离得到两种牛的睾丸支持细胞,采用DMEM高糖及DMEM/F12培养基培养睾丸支持细胞,筛选更佳的培养体系。采用碱性磷酸酶染色、油红O染色和免疫荧光染色鉴定细胞表型特征,利用CCK8和RT-qPCR法分别检测细胞的增殖活性和标志功能基因的表达,进一步通过不同浓度丝裂霉素C处理两类支持细胞来评价两牛种支持细胞的耐受性及其作为饲养层细胞的潜能。结果,经形态、特殊染色及标志基因表达鉴定,成功分离到牦牛与犏牛睾丸支持细胞,建立了牦牛与犏牛睾丸支持细胞体外长期培养方案。发现DMEM高糖培养基更适用于睾丸支持细胞的增殖,两牛种支持细胞形态相似、轮廓清晰、呈现多边形或长梭形,牦牛睾丸支持细胞的体外增殖速率及活性远高于犏牛。调节精原细胞增殖分化相关基因（胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF）和转化生长因子β1基因（transforming growth factor-β1,TGF-β1））的表达在犏牛支持细胞中分别下调了3.4与2.9倍（P<0.05）,基质细胞源性因子12基因（stromal cell-derived factor 12,CXCL12）的表达在犏牛上调了3.6倍（P<0.05）;调节睾丸发育的SRY-盒包含蛋白9基因（sex determining region Y-box9,SOX9）和睾丸支持细胞特异表达的Wilm肿瘤基因1（Wilms tumor gene1,WT1）在犏牛支持细胞中的表达分别下调了25.9（P<0.01）与38.7倍（P<0.01）。与牦牛相比,犏牛睾丸支持细胞对于丝裂霉素C具有较差的耐受性,表现为细胞核质分界不清、胞质空泡化严重和悬浮死细胞增多。本研究成功建立了牦牛与犏牛睾丸支持细胞分离纯化与体外培养方案;与牦牛相比,犏牛睾丸支持细胞在增殖活性和睾丸生精细胞分化关键功能基因表达等方面均存在缺陷,这可能也是导致犏牛雄性不育的原因之一。 相似文献
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小鼠睾丸支持细胞体外分离培养的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了研究一种能快速、高效地分离、纯化小鼠睾丸支持细胞的方法,试验采用颈部脱臼的方法处死3周龄的小白鼠,取其睾丸并去除附属组织(血管、白膜脂肪等)后剪碎,用Ⅳ型胶原酶和胰蛋白酶分步消化制备细胞悬液进行培养,台盼蓝染色以鉴定细胞的活率;再对细胞悬液进行低渗溶液处理并利用支持细胞贴壁而其他细胞不贴壁的特性对其进行分离、纯化;最后对支持细胞采用H.E.和油红O染色的方法进行鉴定,观察其形态、结构和生长增殖情况。结果表明:该方法能够有效地分离、纯化以及培养小白鼠睾丸支持细胞。 相似文献
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In order to get mast cells in mice abdominal cavity,we used three Percoll gradient separation methods to extract mast cells from mice abdominal cavity,and counted cell viability, cell purity and the total number of cells.The 3 mL Percoll gradient separation liquids in the centrifugal tube from top to bottom were divided into 4 layers to analyze the dynamic distribution of mast cells.The results showed that in the method Ⅰ,the cell viability, cell purity and the total number of cells were (83.51±14.00)%，(69.04±11.75)% and（10.60±5.20）×105 /mL,respectively；in the method Ⅱ,the cell viability, cell purity and the total number of cells were (85.71±9.23)%，(87.10±3.93)% and（11.64±5.73）×105 /mL,respectively；in the method Ⅲ,the cell viability, cell purity and the total number of cells were (72.25±24.81)%，(68.34±10.20)% and（8.87±5.18）×105 /mL,respectively.The cell viability and total number of cells in the three groups were not significantly different(P＞0.05).The cell purity of method Ⅱ was extremely significantly higher than that of methods Ⅰ and Ⅲ (Ρ＜0.01). The dynamic distribution of mast cells in the Percoll gradient separation liquid was that the cell viabilities of 3,4 layers were extremely significantly higher than 1 layer (Ρ＜0.01),significantly higher than 2 layer (Ρ＜0.05); the cell purity of 3 layer was extremely significantly higher than 1,4 layers (Ρ＜0.01), significantly higher than 2 layer (Ρ＜0.05); the number of cells of the 3,4 layers were extremely significantly higher than 1,2 layers (Ρ＜0.01). Therefore, adopting the method Ⅱ, layer 3 of extraction, the middle and lower 0.5 mL, which was close to the interface parts in 30%∶ 80% of the Percoll gradient separation liquid, the separation of mast cells of mice peritoneal cavity was best. 相似文献
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为分离、培养高纯度原代小鼠肝实质细胞,并鉴定其纯度及生物活性,试验采用原位两步循环灌流法及多次低速差速离心法分离纯化肝实质细胞,促贴壁培养基原代培养,台盼蓝检测其存活率,PAS反应检测其糖原合成能力,免疫荧光化学检测细胞中CK18表达情况。结果表明:每只小鼠可获取约1.5×10^6个细胞,存活率>97%;镜下发现细胞在接种后6h开始贴壁,72h贴壁细胞生长状态良好,胞体变大、不规则,细胞间相互靠拢呈岛状或条索状连接;肝细胞出现成片紫红色糖原颗粒,CK18在细胞中均匀分布;糖原反应联合CK18免疫荧光显示细胞纯度在90%以上。说明该试验所用方法分离出肝实质细胞数量和存活率高,促贴壁培养基培养的肝实质细胞纯度高,为细胞代谢、细胞毒性等的研究奠定了基础。 相似文献
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旨在研究啶虫脒对雄性小鼠睾丸支持细胞和生精细胞的损害作用是否与氧化应激有关.将50只成年昆明雄鼠(25～30 g)随机分成5组,灌喂方式给药,所有实验动物连续灌喂35 d,通过电镜观察睾丸超微结构的变化,并检测一氧化氮合酶(NOS)、羟自由基、谷胱甘肽(GSH)和总抗氧化能力(T-AOC)的变化确定抗氧化能力的变化.观察睾丸的超微结构发现,啶虫脒组小鼠睾丸的支持细胞胞质中内质网扩张,溶酶体数量减少;初级精母细胞的细胞核溶解,染色质异常聚集,线粒体固缩,细胞器较少;精子细胞的核染色质异常聚集,精子细胞内出现明显染色质样小体,线粒体固缩明显.此外,啶虫脒能引起睾丸中总一氧化氮合酶(TNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)的活性及产生羟自由基的能力升高(P＜0.05),GSH和T-AOC活性降低(P＜0.05).维生素E能够明显降低啶虫脒对睾丸超微结构的损害作用.研究结果表明啶虫脒通过诱导氧化应激对小鼠睾丸的超微结构产生损害作用. 相似文献
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旨在构建干扰胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor-II,IGF-II）的重组质粒载体,研究IGF-II对牦牛睾丸支持细胞的影响。本研究设计并合成针对牦牛IGF-II的shRNA寡核苷酸,并将其克隆至pLKO.1质粒载体上,转染牦牛睾丸支持细胞后经嘌呤霉素筛选获得稳定的细胞株,并采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹法检测IGF-II基因和蛋白的表达,采用细胞生长分析仪分析支持细胞的增殖凋亡情况。结果显示,干扰牦牛IGF-II表达的pLKO.1质粒载体构建成功,其可在睾丸支持细胞中稳定表达,且能有效抑制IGF-II基因的表达。与对照组相比,pLKO.1-shRNA2的干扰效率最显著,IGF-Ⅱ的表达量下调至19.1%（P<0.05）,且pLKO.1-shRNA2可使内源性IGF-II蛋白的表达量减少76.3%（P<0.05）。pLKO.1-shRNA2质粒转染及筛选得到的稳定细胞株培养48 h后的细胞分裂增殖活性显著低于对照组（P<0.05）。qRT-PCR结果显示,干扰内源性IGF-II后,睾丸支持细胞中的IGF-I和IGF-IIR基因表达出现了显著的上调（P<0.05）,IGF-IR与Bcl-2的表达出现了显著的下调（P<0.05）。综上表明,牦牛IGF-II干扰质粒构建成功,其转染至牦牛睾丸支持细胞有效抑制了IGF-II的表达,改变了IGF-IR与Bcl-2的表达模式,潜在影响了牦牛支持细胞的分裂增殖,具体作用机制有待进一步研究。 相似文献
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分别以鸡胚来源的不同细胞为饲养层培养精原干细胞,比较3种不同的饲养层对精原干细胞体外培养的影响。结果显示:精原干细胞在鸡胚成纤维细胞饲养层和鸡睾丸支持细胞饲养层上存活时间较长、生长增殖状况良好。在鸡胚成纤维饲养层上传至四代,每代的AKP阳性克隆率分别为45%、40%、36%和21%。在以睾丸支持细胞为饲养层进行培养时传至三代,每代的AKP阳性克隆率分别是40%、32%、和22%。而以鸡肝细胞作为饲养层,精原干细胞未见有克隆形成,不能进行传代培养,表明鸡胚肝细胞饲养层不适合培养精原干细胞。 相似文献
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The aim of this study was to construct shRNA recombinant vector interfering insulin-like growth factor-II (IGF-II), and study the effects of IGF-II on the yak sertoli cells. The shRNA oligonucleotides targeting yak IGF-II were designed and synthesized and it was cloned into pLKO.1 plasmid vector, after transfected into yak sertoli cells, a stable cell line was obtained by puromycin selection. The relative expressions of IGF-II mRNA and protein were identified by qRT-PCR and Western blotting, respectively. The proliferation and apoptosis of sertoli cells were analyzed by proliferation measurement system. The results showed that the pLKO.1-shRNA vector interfering IGF-II was successfully constructed, which was stably expressed in sertoli cells and could interfere the expression of yak IGF-II effectively. Compared with the control group, the interference efficiency of pLKO.1-shRNA2 was the most significant, IGF-II expression down-regulated to 19.1% (P<0.05), and could reduce the expression of endogenous IGF-II protein by 76.3% (P<0.05). The stable cell line obtained by transfection and screening of pLKO.1-shRNA2 plasmid had significant lower activity of cell division and proliferation than that of control group after 48 h of culture (P<0.05). The results of qRT-PCR showed that the expressions of IGF-I and IGF-IIR in sertoli cells were significantly up-regulated (P<0.05), and the expressions of IGF-IR and Bcl-2 were significantly down-regulated (P<0.05) after interfering IGF-II. In conclusion, the interference plasmids of IGF-II were successfully constructed. After interference plasmid was transfected into yak sertoli cells, it could effectively inhibit the expression of IGF-II, change the expression pattern of IGF-IR and Bcl-2, and potentially affect the division and proliferation of yak sertoli cells, however, the specific regulation mechanism requires further studied. 相似文献