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试验对国家标准中恩拉霉素的生物检测方法进行了改进,以干燥滤纸片法代替管碟法对不同样品中的恩拉霉素含量进行了测定;并研究了浸提液组成、浸提时间、检定菌浓度等因素对检测结果的影响,建立了恩拉霉素浓度与抑菌圈直径之间的线性方程。研究结果表明,利用丙酮浸提液A（丙酮：1 mol/mL HCl：水=35：12：56,用1 mol/mL HCl将pH调至3.0）浸提供试品,浸提时间3.5 h,可以充分浸提供试品中的恩拉霉素;使用生物测定指示菌CMCC（B）63501芽孢数为3.4×107个/mL的平皿,形成的抑菌圈边缘规则清晰,准确度好;使用干燥滤纸片法可有效消除浸提液或酸性稀释液本身对检测菌株的抑制作用,且操作简单、重复性好,可以同时对大批量的样品进行恩拉霉素含量的测定。恩拉霉素标准溶液在浓度为150~500 U/mL的范围内,其产生的抑菌圈直径与效价有较好的线性回归性,所得回归方程：Y=0.00944X+11.55344,相关系数R=0.9962,最终有效区间是0.75~2.5 U,测得的结果更接近真实值,可作为一种高效、快速的恩拉霉素含量测定方法,值得推广和使用。 相似文献
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安普霉素抑菌浓度线性范围的探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
采用抗生素微生物检定法中标准曲线法测定安普霉素抑制枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501株的浓度范围与抑菌圈直径大小的关系,结果表明安普霉素浓度范围在5～20U/m l内,浓度的对数剂量与抑菌圈的直径大小呈较好的直线关系,r> 0.99。 相似文献
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以抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,金黄色葡萄球菌为试验菌,将硫酸安普霉素稀释成不同的浓度,寻找其呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、专属性、浊度法与管碟法比较等验证。结果表明:硫酸安普霉素的浓度在2.9～7.2u/ml之间时,其浓度的对数值与相对应的吸光度具有良好的线性关系,相关系数:R2=0.9988。硫酸安普霉素所建立的微生物浊度法平均回收率及平均可信限率为100.00%和1.88%。浊度法与管碟法所测结果无显著差异。浊度法具有简便、精确、快速的特点,可用于硫酸安普霉素及其制剂含量的测定。 相似文献
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微生物浊度法测定硫酸安普霉素及制剂含量的试验研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以金黄色葡萄球菌为供试菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基.将硫酸安普霉素稀释成不同浓度,寻找浓度的对数值与相应的吸光度呈直线相关的线性范围,建立测定硫酸安普霉素及其制剂含量的浊度法.硫酸安普霉素的浓度在3.6～6.0 μ/mL之间,其浓度的对数值与相应的吸光度呈直线相关,相关系数r=0.9909.经t检验,硫酸安普霉素浓度的对数值与相对应的回归效果显著.所建立的浊度法平均回收率为100.73%,平均可信限率为2.94%,RSD为0.31%. 相似文献
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微生物浊度法测定安普霉素及其制剂效价的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液。将硫酸安普霉素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37 ℃培养3～4 h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、专属性及适用性等验证。结果表明,安普霉素的浓度在2.9～7.2 U/mL之间,其浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关,相关系数r＝0.9988。经t检验,安普霉素浓度的对数值与相对应的吸光度回归效果显著。所建立的浊度法平均回收率为99.82%,平均可信限率为2.48%,相对标准偏差（RSD）为1.86%。管碟法与比浊法所测结果无显著差异。因此,本方法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速等优点,可用于硫酸安普霉素及其制剂的效价测定。 相似文献
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饲料中恩拉霉素的微生物学含量测定方法研究 总被引：2，自引：0，他引：2
研究并建立了微生物学法测定饲料中恩拉霉素含量的方法.饲料样品经酸性甲醇溶液提取,大孔吸附树脂层析柱吸附洗脱后,饲料中的恩拉霉素得到很好的分离纯化.本方法采用枯草芽孢杆菌为检验菌,饲料中恩拉霉素的最低定量限为0.5 mg/kg,标准曲线的线性范围为0.4～12.8 u/mL,相关系数R为0.999 1,回收率大于85%,RSD小于15%.该方法适用于饲料中恩拉霉素的检测. 相似文献
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[目的]建立活体动物中大环内酯类残留的检测方法。[方法]采用微生物抑制方法,对藤黄微球菌CMCC 28001的选择性和特异性、样品提取方法、平板制备条件、方法检出限等技术参数进行研究。[结果]建立的方法可用于活体动物中红霉素、泰乐菌素、螺旋霉素、林可霉素、吉他霉素和克林霉素等6种大环内脂类药物的残留检测。当菌悬液添加浓度为10~(-3)倍稀释液(5.5×106CFU/m L)以及培养基PH值为7.5且培养温度为30℃时,可产生直径最大,边缘光滑、完整、清晰的抑菌圈。[结论]该方法具有良好的敏感性和重复性,成本低,操作简便,是色谱分析、免疫分析等其它方法的有益补充。 相似文献
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微生物浊度法测定泰乐菌素及其制剂含量的研究 总被引：2，自引：2，他引：0
以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,将泰乐菌素稀释成不同的浓度,寻找浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,建立测定泰乐菌素及其制剂含量的浊度法。泰乐菌素的浓度在0.6-2.0u/mL之间,其浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关,相关系数r为0.9992。经t检验,泰乐菌素浓度的对数值与相对应的吸光度回归效果显著。所建立的浊度法平均回收率为99.87%,平均可信限率为2.76%,RSD为0.37%。管碟法与浊度法所测结果无显著差异。浊度法具有简便、精确、快速的特点,可用于泰乐菌素及其制剂含量的测定。 相似文献
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The national standard pinella mildew element biological detection method was improved, using dry filter paper method instead of cylinder plate method, the potassium content of different samples of pinella mold were determined,and the extract composition, extraction time, the concentration of bacteria test and other factors influence on the test results of the established enramycin between concentration and the antibacterial circle diameter of linear equations was studied. The results showed that using acetone extraction liquid acetone (A:1 mol/mL HCl:water =35:12:56, pH value was adjusted to 3.0 with 1 mol/mL HCl) leaching provided sample, extraction time of 3.5 h could fully immersed test of enramycin. Use of biological indicator bacteria CMCC (B) 63501 spore count of 3.4×107 per mL of the measurement of living flat dish, the formation of the inhibitory circle edge rule was clear, good accuracy. Using dry filter paper method could effectively eliminate the extraction or dilute acidic fluid itself to detect strains inhibitory effect, and the utility model had the advantages of simple operation, good repeatability. It could be used for large quantities of samples of enramycin content determination.Enramycin standard solution at concentrations for 150~500 U/mL and its bacteriostatic circle diameter and valence have good linear regression.The resulting regression equation was Y=0.00944X+11.55344, the correlation coefficient was R=0.9962, the final effective range was 0.75~2.5 U, the measured results were more close to the true value.It could be used as an efficient enduracidin determination method, worthy of promotion and use. 相似文献
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植物根际促生菌对两种真菌病害病原的抑制作用及其鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
利用钼蓝比色法、乙炔还原法和高效液相色谱法分别测定了分离自5种植物根际的19株细菌溶磷、固氮和分泌生长素特性;用平板对峙生长法测定了19株细菌对黄瓜枯萎病菌和小麦根腐病菌的抑制作用;结合菌株形态、生理生化反应,利用分子生物学方法鉴定了其中8株优良细菌。结果表明,菌株Bacillus subtilis LM4-3固氮酶活性较高[244.88 nmol C2H4/(mL·h)];菌株B. subtilis LHS11-1溶磷能力较强(205.77 mg/L);菌株PGRS-3分泌IAA能力较好(40.78 μg/mL)。5株菌株能够有效拮抗黄瓜枯萎病菌,其中B. subtilis FX2-1抑菌活性较强(活菌抑制率69.07%,发酵液抑制率51.73%)。7株菌株能够有效拮抗小麦根腐病菌,其中B. subtilis FX2-1抑菌活性较强(活菌抑制率 78.17%),B. subtilis LHS11-1发酵液抑制率高达81.52%。其他具有较好促生或拮抗上述两种病原真菌的菌株经鉴定,分别属于蜡样芽孢杆菌(B. cereus,菌株XX1)、短小芽孢杆菌(B. pumilus,菌株F1-4和LX22)、简单芽孢杆菌(B. simplex,菌株XX6)和荧光假单胞杆菌(Pseudomonas fluorescens,菌株XX5)。 相似文献
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本试验旨在从泰山土壤中筛选出具有降解黄曲霉毒素B1（AFB1）作用的枯草芽孢杆菌,经16S rRNA基因测序鉴定为枯草芽孢杆菌,最终确定1株具有较高降解作用的枯草芽孢杆菌,命名为泰山枯草芽孢杆菌,并利用该菌株对AFB1进行了降解率、活性组分、性质的确定及降解饲料中AFB1效果的研究。结果表明,泰山枯草芽孢杆菌对AFB1的降解率达90.28%,其中,泰山枯草芽孢杆菌发酵后的上清液对AFB1的降解活性最高,确定发酵后的上清液中存在解毒活性组分;对解毒活性物质进行加热和蛋白酶K变性处理后,解毒活性显著降低,表明起解毒作用的活性物质是其分泌的一种胞外酶;应用性试验进一步证明泰山枯草芽孢杆菌能降解霉变饲料中的AFB1,可在饲料或食品行业应用。 相似文献
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试验旨在为了降低枯草芽孢杆菌SR096的工业生产成本和提高发酵液的芽孢含量,采用单因素试验和响应面法试验设计对菌株SR096的培养条件和发酵培养基组分优化,优化后的培养基组分为:葡萄糖7.5 g/L、玉米粉15.7 g/L、黄豆粉45.0 g/L、柠檬酸钠4.5 g/L、碳酸钙2.0 g/L、硫酸镁1.0 g/L,经验证在5 L发酵罐中以接种量3%、37℃、250 r/min条件下培养30 h,枯草芽孢杆菌SR096发酵液的活菌含量为1.67×10^10 CFU/mL,芽孢含量为1.56×10^10 CFU/mL,芽孢率为93.3%,为枯草芽孢杆菌SR096后期的产业化放大和推广应用奠定基础。 相似文献
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ZHENG Yi CHEN Xiao-lan GUAN Yuan-hong JIA Ji-ping YANG Hai-feng LI Shi-yang LI Ran 《中国畜牧兽医》2017,44(7):2197-2202
The assay was aimed to determine the content of pinoresinol diglucoside (PDG) in Eucommie ulmoides immunoenhancement liquids. The chromatographic conditions were as follows:Inersustain® C18 column (250 mm×4.6 mm,5 μm) was under column temperature of 35℃, the mobile phase consisted of acetonitrile-0.2% phosphoric acid(15:85)with a flow rate of 1.0 mL/min,and the UV detection wavelength was 277 nm. Ethyl acetate was used as extraction solvent. In order to determine PDG of the test solution under the chromatographic conditions, the number of theoretical plates and resolution were used as system suitability indicators. Linear regression on reference substance (PDG),linearity range and the precision, stability, and reproducibility of the analysis method, the recovery test of adding samples were all determined. The results showed that under the content determination method, the number of theoretical plates of PDG in the test solution was 8 588, and the resolution was 3.046. PDG performed good linear relation at the linear range between 6 and 192 μg/mL, and the related coefficient was 0.9996. The precision experiments showed that the relative standard deviation (RSD) of reference substance solution was 0.74%. The RSD of reproducibility and stability of PDG in the test solution was 4.50% and 2.69%, respectively. The average recovery was 98.74% with RSD 0.65% (n=9). Under the chromatographic conditions established above, the contents of PDG in the test sample were between 0.124 and 0.127 mg/mL. The conclusion was that the RP-HPLC method performed well system suitability, precision, reoroducibility, stability, and high recovery rate. Meanwhile this method was quick, simple and reliable. It could be used to determine the content of PDG in Eucommie ulmoides immunoenhancement liquids. 相似文献
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试验旨在建立测定杜仲增免液中松脂醇二葡萄糖苷含量的RP-HPLC法。以Inersustain® C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,乙腈-0.2%磷酸（15：85）为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,紫外检测波长277 nm。以乙酸乙酯作为提取溶剂,在所建立的色谱条件下测定供试品溶液,以理论塔板数和分离度作为系统适用性指标。对对照品松脂醇二葡萄糖苷溶液进行线性回归,确定线性范围,考察分析方法的精密度、稳定性、重现性,并进行加样回收试验。结果显示,用所建立的方法测定供试品溶液中松酯醇二葡萄糖苷理论塔板数为8 588,分离度为3.046。松脂醇二葡萄糖苷对照品溶液在6~192 μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.9996;精密度试验结果显示松脂醇二葡萄糖苷对照品溶液峰面积相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为0.74%;重现性和稳定性试验结果显示供试品溶液中松酯醇二葡萄糖苷峰面积RSD分别为4.50%和2.69%;平均加样回收率为98.74%,RSD为0.65%（n=9）;在所建立的色谱条件下,供试品中松脂醇二葡萄糖苷的平均含量为0.124~0.127 mg/mL。结果表明,应用该方法测定杜仲增免液中松脂醇二葡萄糖苷的含量,系统适用性好,精密度高,重现性和稳定性好,回收率高,快速简便、准确可靠,可作为杜仲增免液中松脂醇二葡萄糖苷含量测定方法。 相似文献
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ZHANG Xue-wen LI Hong-ya QI Cong-yan WANG Shu-xiang WANG Quan LI Shu-na 《中国畜牧兽医》2017,44(8):2319-2325
The aim of this study was to select a strain of producing mannase Bacillus, and investigate its effects on growth performance of geese. Congo red plate changing color circle method and assay of enzyme activity method in liquid fermentation were used in screen and rescreen,respectively. Animal safety and gastrointestinal tolerability tests were alse carried out. By morphological observation,physiological and biochemical tests,analysis of complete sequence of 16S rDNA and the phylogenetic tree establishment,species were identified. Bacillus were prepared and added by 0.10%, 0.25%, 0.50%, 0.75% and 1.00% in the geese diets to study its effect on the daily gain and F/G in geese. The results showed that the enzyme activity of the isolated Bacillus subtilis Y-3-2 was 45.939 U/mL, and the strain could also endure pH 2.0 and grow normally in 0.1% cholic acid salt solution and artificial intestinal fluid. The results of feeding test showed that, compared to the control group, the average daily gain of geese increased by 8.78%(P<0.01) and F/G decreased by 6.69% (P<0.01) by adding 0.25% Y-3-2 preparation. In conclusion, adding mannase producing Bacillus could improve the feed utilization and growth of geese. 相似文献
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为了筛选一株产甘露聚糖酶的芽孢杆菌,并考察其对肉鹅生长性能的影响,本试验采用刚果红平板变色圈法进行产甘露聚糖酶芽孢杆菌的初筛,通过液体发酵测定酶活力的方法展开复筛,并进行动物安全性和胃肠道耐受性试验。通过形态特征观察、生理生化试验和16S rDNA全序列分析与发育树构建将其鉴定到种。制备该菌菌剂,并将其按0.10%、0.25%、0.50%、0.75%和1.00%添加于肉鹅日粮中,考察其对肉鹅日增重和料重比的影响。结果表明：筛选到产甘露聚糖酶的菌株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtils） Y-3-2,其产酶活力为45.939 U/mL,耐受pH 2.0,在0.1%的胆酸盐溶液和人工肠液中可正常生长。将其制成菌剂,在肉鹅日粮中按0.25%添加,可使试验组肉鹅日增重较对照组提高8.78%（P<0.01）,料重比降低6.69%（P<0.01）。以上结果说明在肉鹅日粮中添加本试验筛选出的产甘露聚糖酶芽孢杆菌可提高肉鹅的饲料利用率,对肉鹅的生长有显著促进作用。 相似文献
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试验旨在建立测定马香苓口服液中百秋李醇含量的研究方法。本研究采用气相色谱法,其色谱条件是使用色谱柱HP-5毛细管柱;柱温采用程序升温（初始温度150 ℃,保持18 min,以50 ℃/min速率升至280 ℃,保持5 min）;进样口温度为280 ℃;载气：高纯氮气;流速1 mL/min;进样量1 μL,分流比20：1;检测器为氢火焰离子化检测器,温度为280 ℃;氢气流速40 mL/min,空气流速370 mL/min;分别进行系统适用性试验、专属性试验、线性范围考察、检测限和定量限的确定、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验、耐用性试验,并对10批样品进行了含量测定。结果显示,专属性溶液中的溶剂峰、药液的杂质峰与主成分峰能达到有效分离且分离度符合要求（R ≥ 1.5）,表明该方法系统适用性良好;阴性对照溶液未检出色谱峰,表明样品中其他成分不干扰测定;百秋李醇定量限和检测限分别为2.842和0.812 μg/mL;百秋李醇检测质量浓度在15.86~1 015 μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系（y=0.869x-10.45,R2=0.999,n=7）。精密度试验、稳定性试验（日内和日间精密度）、重复性试验的平均RSD分别为0.90%、1.63%和1.83%、2.90%,其RSD均在可控范围内（RSD ≤ 3%）;平均加样回收率为95.36%,RSD=2.82%（n=6）,表明所建立的气相色谱法检测百秋李醇的含量回收率良好;进行耐用性试验,最终验证所建立的色谱方法可以稳定检测百秋李醇的含量。经方法学验证,该方法准确稳定,简便可行,能够作为马香苓口服液君药广藿香中百秋李醇的含量控制方法,同时也为该制剂质量控制提供了一种有效的检测方法,暂定本品中广藿香药材按百秋李醇计不少于47.53 μg/mL。 相似文献