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高质量的基因组DNA的获取是芋螺毒素基因克隆及基因组文库构建的关键。笔者采用4种方法提取信号芋螺(Conus litteratus)的不同组织器官的DNA,并综合比较了各组DNA的浓度和纯度、DNA片段的大小和完整性。结果表明,由改良的DNA快速提取试剂盒法提取的DNA纯度和浓度较好;4种组织器官中,腹足纯度较高,是更合适的提取组织;肝胰脏和毒管获取的DNA产率最高,但片段完整性差,污染严重;PCR反应获得了跟预期大小一致的特异扩增产物。因此,信号芋螺基因组DNA的提取最佳方法为改良的DNA快速提取试剂盒法,提取部位为腹足组织,可以获得高质量的基因组DNA,且符合后续实验要求。 相似文献
2.
红皮云杉胚乳中提取DNA的最佳时段 总被引:3,自引:1,他引:2
以来自不同地点的红皮云杉胚乳为材料提取DNA,研究了DNA提取的最佳时段,从而为构建红皮云杉的遗传图谱做准备,结果表明:提取DNA样品的最佳时段是在种子生根的晚期,即根长到4cm以后,提取的DNA样品纯度和浓度都较高:单一胚乳中DNA量完全能够满足大量PCR扩增的需要。 相似文献
3.
中国李基因组DNA提取方法的优化 总被引:10,自引:0,他引:10
3种常用的植物基因组DNA提取方法在中国李上的实验,结果表明:改良陈大明法提取的DNA纯度高,产率高。为满足植物样品较少时提取DNA的需要,将该法进一步优化的结果表明,不使用液氮研磨而是在低温条件下将组织捣碎的微量法同样提取出了产率高、纯度高的DNA,完全满足RAPD扩增的需要。裂解缓冲液中NaCl的浓度以1.1mol/L提取DNA的产率最高,且DNA的质量与其他浓度之间没有明显差异。 相似文献
4.
石榴DNA提取方法的比较及抗氧化剂对DNA质量的影响* 总被引:8,自引:1,他引:8
比较了SDS-CTAB微量提取法和改进的SDS微量提取法提取的石榴叶片DNA质量,结果认为两种方法提取的DNA均可用于RAPD分析,但SDS微量提取法较适合于石榴叶片DNA的提取。试验中还研究了抗氧化剂PVP,α-巯基乙醇和抗坏血酸3种试剂单独使用及PVP与α-巯基乙醇混合使用对SDS-CTAB微量提取法的影响,发现与对照相比,单独加抗坏血酸及PVP与α-巯基乙醇混合使用能很好地防止DNA在提取过程中的褐化。 相似文献
5.
为了探究不同基因组DNA提取方法在生物学试验中适用性问题,采用5种方法提取番茄基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、微量紫外分光光度计、聚合酶链式反应(PCR)比较提取的DNA浓度、质量及适用性。结果显示,碱裂解煮沸法成本低、操作简便,但所提取的DNA浓度最低,质量最差,只适合一般PCR检测试验;SDS冰浴法和改良的CTAB法操作步骤多、程序复杂,提取的DNA浓度和质量好,通用性最强,但所用试剂具有毒性;高盐低pH法和PVP-40法操作简单,提取的DNA浓度和质量较好,具有一定的通用性,且所用试剂无毒,建议一般性的生物学试验可优先考虑这两种方法。 相似文献
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一种快速的植物DNA制备方法 总被引:9,自引:0,他引:9
介绍一种DNA提取方法,该方法具有快速,简便,高效的优点,可在60 min内提取出纯净无RNA的DNA,获得的DNA纯度高,DNA质量可满足酶切及PCR等分子生物学实验要求。 相似文献
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改进DNA提取方法,利用含2%CTAB、1%SDS、2% PVP、100 mmol/L Tris-Cl (pH8.0)、20 mmol/L EDTA (pH8.0)和1.4 mol/L NaCl的DNA提取缓冲液,提取了不同种属12种植物的DNA,并对其进行了PCR检测.结果显示,所提取的DNA符合PCR试验要求,用真核生物ITS4/ITS5通用引物均能扩增出清晰的条带.该方法无需酚仿抽提,简单、高效、环保,特别适合大规模植物DNA的提取. 相似文献