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以青霉素、甘氨酸、溶菌酶和渗透压稳定剂等为影响因素,通过酶解,稀释平板计数等方法对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)QM3原生质体的制备及再生条件进行了研究。结果表明菌株原生质体形成与再生的最适条件是:酶解缓冲液SMM pH=6.5,青霉素和甘氨酸的浓度分别为4U∕ml和4mg∕ml,时间2h;溶菌酶的浓度为2mg∕ml,在32℃下,酶解60min,形成率和再生率分别达到82.11%和89.2%。研究为枯草芽孢杆菌QM3原生质体的制备、再生条件及将其进行基因操作等相关研究奠定理论基础。 相似文献
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[目的]优化玉木耳原生质体制备条件,获得高质量、高产量的原生质体,为后续玉木耳遗传育种、优良性状筛选和品种改良提供良好的试验材料.[方法]以玉木耳原生质体产量为考察指标,结合单因素试验和响应面优化法,建立原生质体制备回归方程,探究玉木耳原生质体的最佳制备条件.[结果]单因素试验结果表明,玉木耳原生质体制备的适宜条件为:酶解时间3 h、酶解液浓度2.0%、酶解温度35℃.响应面试验结果表明,各因素对原生质体制备影响程度的排序为:酶解温度>酶解时间>酶解液浓度,酶解温度与酶解时间的交互作用对原生质体产量有极显著影响(P<0.01),酶解时间与酶解液浓度的交互作用影响显著(P<0.05).响应面试验优化后,获得玉木耳原生质体的制备条件为:酶解液浓度2.0%、酶解时间3.4 h、酶解温度35℃,此条件下玉木耳原生质体的平均产量为17.5×106 CFU/mL,与理论产量(17.77×106 CFU/mL)偏差小.[结论]利用响应面法可确立玉木耳原生质体制备的最佳条件,获得较理想的原生质体产量. 相似文献
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【目的】选用辅酶Q10产生菌深红红螺菌和根癌土壤杆菌为出发菌株,系统研究其原生质体制备和再生条件,为辅酶Q10的工业化生产提供技术支持。【方法】从菌龄、溶菌酶质量浓度、酶解时间、酶解温度、高渗溶液的选择等,对深红红螺菌和根癌土壤杆菌2株菌进行了原生质体制备和再生条件的研究。【结果】①根癌土壤杆菌原生质体制备和再生的适宜条件为:菌龄13.5 h,高渗溶液为0.8 mol/L NaCl,溶菌酶质量浓度为0.2 mg/mL,酶解时间75 min,酶解温度35℃;②深红红螺菌原生质体制备和再生的适宜条件为:菌龄45 h,高渗溶液为0.5 mol/L蔗糖+0.02 mol/L的MgCl2.6H2O,溶菌酶质量浓度为3 mg/L,酶解时间60 min,酶解温度37℃。【结论】得到了根癌土壤杆菌AT-N10和深红红螺菌Rh1.5005适宜的原生质体制备和再生条件。 相似文献
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水稻纹枯病菌原生质体制备与再生条件的优化 总被引：2，自引：0，他引：2
为获得进行水稻纹枯病菌遗传转化所需的高质量原生质体,选用该病菌强致病力菌株GD-118,分别从酶种类、菌龄、酶解时间、酶解温度、酶液pH值和渗透压稳定剂及其浓度6个方面优化了原生质体的制备条件,从酶解时间和渗透压稳定剂及其浓度2个方面优化了原生质体的再生条件。结果表明:优化后的水稻纹枯病菌原生质体制备的最佳条件组合是"纤维素酶+溶菌酶+崩溃酶"组合酶、总酶终质量浓度10mg/mL、菌丝菌龄15h、酶解时间3h、酶解温度35℃、酶液pH5.6、以0.6mol/LMgSO4.7H2O为渗透压稳定剂,此最佳条件组合所制备的原生质体产率高达4.00×107/g;原生质体最佳的再生条件是酶解3h的原生质体在含1.0mol/L甘露醇的再生培养基上26℃时进行培养,在此条件下可获得最佳的再生效果,再生率为39%。 相似文献
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本试验通过酶解法制备田七原生质体,经过滤-离心法将纯化后的田七原生质体培养于适宜的培养基中培养.得到-个制备田七原生质体的最佳酶解条件即:采用混合酶(1:1),最佳酶解时间为4小时,即可得到原生质体制备率高、存活率高的酶解条件. 相似文献
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采用Plackett-Burman试验设计方法对影响枯草芽孢杆菌BS-1101生物表面活性剂产生的培养条件进行了研究。结果表明,在10个因素中,KCl、装液量、液体石蜡三个因素对表面活性剂的产生有显著影响,其他因素则没有显著影响,其中KCl呈现正效应,装液量、液体石蜡则为负效应,为进一步优化培养条件提供了依据。 相似文献
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1株降酚菌的原生质体制备和再生研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了优化组合降酚菌原生质体制备与再生的条件。以从合肥钢厂焦化废水处理池的活性污泥中驯化筛选得到1株高效降酚假单胞菌为材料,通过正交实验,探讨蔗糖浓度、溶菌酶浓度E、DTA浓度和酶解时间对该菌原生质体制备与再生的影响。原生质体制备与再生的最优条件:蔗糖浓度20%,溶菌酶浓度0.5 mg/ml,EDTA浓度0.2%,酶解时间40 min。在此条件下,它的菌株形成率为75.3%,再生率为7.8%。影响降酚假单胞菌原生质体形成率的因素顺序为蔗糖浓度>溶菌酶浓度>作用时间>EDTA浓度。 相似文献
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[目的]优化热浸渍与酶解相结合的方法提高蓝莓果浆出汁率的工艺条件.[方法]蓝莓浆热浸渍后果胶酶解,分别考察了热浸渍的温度、时间以及果胶酶用量、酶解温度和酶解时间对蓝莓果浆出汁率和果汁品质的影响.在单因素的基础上进行Box-Behnken试验设计,以果浆出汁率为响应值,对蓝莓浆的酶解工艺进行优化.[结果]试验得出,在温度60℃下热浸渍30 min后进行酶解,酶添加量0.21％、酶解时间2.38 h、酶解温度44.72℃为最优酶解条件,其预测出汁率为81.50％,实测出汁率为79.91％,两者基本相符.热浸渍和果胶酶共同作用能进一步提高蓝莓果浆出汁率,比单独进行酶解蓝莓果浆出汁率提高了9.59％.[结论]研究可为蓝莓饮品及蓝莓果酒的工业化生产提供一定的参考依据. 相似文献
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响应面法优化大枣多糖的提取工艺研究 总被引：4，自引：3，他引：1
[目的]优化以提取芦丁后的大枣渣为原料进行大枣多糖的提取工艺。[方法]通过Box-Behnken中心组合试验设计及响应面法分析建立二次回归模型,对液固比、提取时间和提取温度进行优化组合。[结果]大枣多糖提取的最佳工艺条件为：液固比30∶1、提取时间3.6 h、提取温度89℃。在此最佳工艺条件下,大枣多糖得率为13.85%。[结论]通过多元回归拟合,所得回归方程可以准确地反映多糖得率与液固比、提取时间和提取温度的相互关系,最佳工艺能够用于指导大枣多糖的提取。 相似文献
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响应面法优化玉米芯木聚糖提取条件 总被引：1，自引：1，他引：0
为提高玉米芯中木聚糖得率,采用响应面法对碱法提取玉米芯木聚糖条件进行优化。利用Design-Expert 8的Min Run ResⅣ多因子两水平设计,对影响木聚糖提取的因素进行效应评价,利用最峭攀登搜索法为响应面分析的中心组合设计确定中心区,利用响应面分析得到优化提取条件。结果表明,碱提温度、碱提时间、NaOH质量分数和料液比对木聚糖提取率有显著影响,其最佳条件为:NaOH质量分数16%,温度85℃,料液比1∶16,提取时间2.5h。利用响应面法成功对玉米芯木聚糖提取条件进行优化,提取率达到25.6%。 相似文献
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茶薪菇原生质体制备条件的分析 总被引：2，自引：0，他引：2
以茶薪菇为出发菌株,对其原生质体制备条件进行研究,具体分析了酶浓度、菌龄、渗透压稳定剂以及酶解时间和温度等因素对茶薪菇原生质体产出量的影响。结果表明:采用液体发酵培养第5 d的菌丝体,以0.4 mol/L KC l作渗透压稳定剂,加入0.20%混合酶(纤维素酶与蜗牛酶按1∶1混合)在25℃下酶解3 h,制备原生质体效果最佳,原生质体产出量可达2.5×107个/mL。 相似文献
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为研究大豆抗毒素（glyceollins,GLYs）合成的诱导条件,以低聚木糖（xylooligosaccharides,XOS）诱导黑豆合成的GLYs含量为考察目标,以XOS诱导质量浓度、诱导时间、培养温度为考察单因素,在此基础上采用中心组合设计-响应面法优化GLYs合成量的诱导条件。结果显示,建立的模型适合度显著（F=13.780）,GLYs实际合成量与预测值拟合良好（R2=0.925 4）。优化后的最佳诱导条件为XOS诱导质量浓度4.0 g·100 mL-1,培养温度24 ℃,诱导时间4 d。在此条件下,GLYs合成量为1.376 5 mg·g-1 DW,与预测值（1.411 8 mg·g-1 DW）相比,相对误差较小。培养温度对GLYs合成量影响极显著（P<0.05）;XOS诱导质量浓度和诱导时间对GLYs合成量影响不显著;三因素交互作用对GLYs合成量影响均不显著。由此表明,该方法合理可行,为大豆抗毒素制备及功能产品开发提供了理论依据。 相似文献
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A developed method was used for the enhancement of arachidonic acid production by M. isabellina. An orthogonal, rotatable and central composite design was applied to determine the optimum conditions for protoplast regeneration mutagenesis. The results showed that a commixture enzyme (cellulase and glusulase) at the concentration of 4%, enzymolysis temperature at 30℃ and enzymolysis time on 7.5 h were the optimal conditions, in which the lethality of M. isabellina spores was 78.4%. After mutagenesis and re-s... 相似文献