共查询到20条相似文献，搜索用时 62 毫秒
1.
对半胚冷冻的方法和条件进行了系统研究,证明采用下述程序冷冻小鼠半胚可显著提高解冻半胚的成活率:①在含10％甘油的磷酸缓冲液中平衡35～40min;②在-6.5℃或-7℃诱发结晶,③以0.05℃/min的速度缓慢降温15min;④以0.3℃/min的速度降温至-35℃投入液氮;⑤在30～35℃的水浴中解冻;⑥在含不同浓度(6.6％,3.3％,0％)甘油和0.3mol/L蔗糖的磷酸缓冲液中平衡35～40min,去除甘油。将按上述程序冷冻—解冻的16对半胚移植后,获半胚鼠12只,其中5对为同卵双生。 相似文献
2.
3.
用RPE冷冻器冷冻42枚桑椹胚和13枚囊胚。冷冻液为1M甘油杜氏磷酸盐缓冲液,胚胎采用0.25ml细管包装。0℃时置入冷冻器。以1℃/分降温,-6.5～-7℃诱发结晶,再以0.5℃/分(0.3～0.8℃/分)降温至-30℃,然后投入液氮。35℃水浴解冻。桑椹胚与囊胚的冻后存活率分别为71.4％(30/42)和53.8％(7/13),差异不显著(P>0.05)。胚胎冻后发育步调很不一致。 相似文献
4.
奶牛和小鼠半胚低温冷冻的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
本实验对小鼠裸半胚采取了多种不同的处理方式，其中冷冻前不培养、冷冻前经短时间培养和冷冻前经长时间培养的冷冻半胚解冻后培养发育率分别为１４．５５％、２６．６７％和６．１２％；装透明带半胚和装透明带后再用琼脂包埋半胚的解冻后培养发育率分别为５６．６７％和６４．２９％；小鼠半胚快速冷冻解冻的培养发育率为６２．００％。此外．将１０枚奶牛半胚装带、包埋、冷冻解冻后，移植给５头受体．结果有１头妊娠；奶牛整胚冷冻后分割的半胚移植妊娠率为２８．５７％（４／１４）。 相似文献
5.
用FSH+PGF_(2)超排黑白花奶牛,以非手术方法采得7日龄早期胚胎。应用含10％甘油卵细胞培养液作为胚胎冷冻保护液,采用自制简易胚胎冷冻器冷冻,在-196℃液氮中保存。冻胚在35℃水浴中解冻,应用92.1g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS,46g/L甘油+171.2g/L蔗糖PBSS和171.2g/L蔗糖PBSS三步脱去甘油,用含20％犊牛血清PBS将胚胎清洗2遍后装管移植。共解冻18枝冻胚,16枚可用。可用胚率为84.2％(16/18)。采用非手术方法移植16头受体牛,5头妊娠产犊,移植妊娠率为31.5％(5/16)。 相似文献
6.
将小鼠囊胚一分为二后,采用血清-琼脂法(A),透明带-琼脂法 (B)和双层透明带法(C)包被半胚。在RPE冷冻仪的控制下,对包被半胚进行冷冻。解冻后将360枚半胚进行体外培养。A,B,C三组的半胚发育率分别为69.2％(83/120),67.5％(81/120)和60％(72/120)。将12对在冷冻前用A法包被的解冻半胚移植于6只假孕母鼠,结果有3只妊娠,共产半胚鼠8只,其中3对为同卵双生。实验证明,本研究建立的血清-琼脂包被法操作简便,效果良好,便于应用,是一种较理想的包被半胚新方法。 相似文献
7.
波尔山羊胚胎冷冻和移植试验 总被引：1，自引：0，他引：1
用含1．5M乙二醇,0．1M蔗糖、20％NCS(V／V)的PBS液,或含1．5M乙二醇,20％NCS的PBS为冷冻保护液,将42枚A级胚胎(致密桑葚胚16枚,早期囊胚26枚)一并移入冷冻保护液,并进行快速冷冻,在降温至-36℃时将胚胎投入液氮保存。解冻时,胚胎细管先在室温(20～22℃)空气中停留15s后进入水浴快速解冻,解冻后一步除去保护剂,移入含20％NCS的PBS液中保存,手术移植入受体子宫角内。结果表明,解冻后形态质量完好的A级冻胚达88,1％(37／42),移植受体妊娠率达42,9％,说明本试验采用的胚胎冷冻-解冻程序,能有效地进行波尔山羊致密桑葚胚和囊胚的冷冻保存。 相似文献
8.
9.
本实验对昆明白系小鼠的桑椹胚实施OPS法玻璃化冷冻,研究不同管内解冻程序对胚胎体内外发育的影响,旨在为小家畜胚胎冷冻、解冻和移植提供技术参数。采用OPS冷冻两步法(10%(体积分数)EG 10%(体积分数)DMSO溶液中平衡30 s,移入EDFS30平衡25 s)保存小鼠桑椹胚。一步法解冻是将OPS直接插到盛有0.5mol/L蔗糖的离心管中分别平衡1、2、3、4、5和6 min,解冻后经体外培养结果表明,平衡2~4 min组囊胚发育率(93.58%~97.22%)与对照组(100%)无显著差异(P>0 05);实施两步法解冻时将OPS先后插入0.5和0.25mol/L蔗糖中,体外培养结果显示,先后平衡3和2 min组囊胚发育率(100%)最佳,同对照组无显著差异(P>0.05)。将以上方法管内解冻最佳组的胚胎用OPS管作移植导管,直接移植到受体子宫角中,其妊娠产仔率(38.57%)和管外解冻组(42.86%)及新鲜对照组(51.19%)均无显著性差异(P>0.05)。证明OPS玻璃化冷冻的小鼠桑椹胚可以进行管内解冻和直接移植,为小家畜胚胎移植提供了模型。 相似文献
10.
张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1992,20(Z1)
研究了培养基、血清浓度和培养温度对山羊半胚体外发育的影响。结果表明:与杜氏磷酸缓冲液和TCM—199相比,在改良Whitten氏液中进行体外培养可显著提高半胚体外发育率(P<0.05);用改良Whitten氏液进行体外培养,含10％和15％犊牛血清组的半胚发育率显著高于5％血清组(P<0.05),极显著地高于无犊牛血清组(P<0.01);在38～39℃的条件下培养半胚的效果显著优于36℃(P<0.05),但在37～39℃的范围内,温度对半胚体外发育率无显著影响(P>0.05)。 相似文献
11.
红松胚性愈伤组织的超低温保存技术 总被引：1，自引：0，他引：1
本文初步研究报道了红松胚性愈伤组织的超低温保存方法,结果表明,预处理、保护剂与解冻方式对胚性愈伤组织存活率均有一定影响.效果较好的方法为:利用0.4 mol·L- Sorb(山梨醇)预处理愈伤组织24 h,5%DMSO(二甲基亚砜)+0.4 mol·L-1 Sorb为冷冻保护剂,冷冻方式为程序降温盒在-70℃停留3 h后投入液氮罐中保存,解冻方式为20℃流水冲洗.胚性愈伤组织解冻后再培养,其存活率可达71.4%. 相似文献
12.
山羊精液冷冻保存技术研究 总被引：2，自引：0，他引：2
[目的]探索山羊精液的冷冻方法。[方法]以甘油为冷冻保护剂,采用细管法冷冻保存山羊精液,探讨甘油浓度和添加时间、冻结方法和解冻温度对山羊精液冷冻效果的影响。[结果]在稀释液中添加6%和7%甘油的处理组中,冻后精子活率与复苏率均显著高于添加3%、5%甘油的处理组。配液时添加6%甘油的处理组中冻后精子活率与复苏率均显著低于在4℃平衡后添加的处理组。把平衡的山羊精液分别在离液氮面3 cm处熏蒸9 min和-80℃冰箱中冻结9 min,前者的精子复苏率显著低于后者。在解冻温度分别为40、45和50℃的处理组中精子冻后活率与复苏率显著高于解冻温度为55和60℃的处理组,说明解冻温度以40～50℃为宜。[结论]在山羊精液冷冻保存中,甘油的最佳添加时间为4℃平衡后冻结前。 相似文献
13.
14.
影响猪胚冷冻效果的若干因素的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
屠宰（或手术）采取３￣７日龄猪胚，分别就胚胎不同发育时期，２５℃和－７℃两个冷冻起始温度，甘油、丙二醇和乙二醇３种防冻剂及６％、８％、１０％３种甘油浓度进行冷冻比较。结果表明，冷冻解冻后及解冻后在Ｍ１６＋１０％ＦＣＳ中培养２４小时的胚胎存活率均与胚胎发育时期有关。胚胎存活率以孵化囊胚最高，分别为５８．８％和５２．９％，高于校内发育（２４．４％和１７．１％）或体外培养发育（２１．４％和１７．９％）的 相似文献
15.
研究了不同冷冻方法对小鼠胚胎的冷冻保护效果及能否进行重复冷冻、重复冷冻后胚胎的继续发育率情况.采用乙二醇(1.8 mol/L、2.7 mol/L、3.6 mol/L、4.5 mol/L)和EFS玻璃化液(EFS20、EFS30、EFS40)对小鼠的桑椹胚和囊胚进行程序化冷冻和细管法玻璃化冷冻并再进行重复冷冻.结果表明以1.8 mol/L EG和EFS30对小鼠的胚胎冷冻效果最好,一次冷冻解冻后的发育率桑椹胚分别为92.5%和91.5%,囊胚分别为82.8%和81.3%,两种冷冻方法差异不显著(P>0.05).经1.8 mol/L EG首次冷冻再经EFS30重复冷冻的效果最好,桑椹胚和囊胚的发育率分别为53.8%和33.9%. 相似文献
16.
以‘徐香’猕猴桃为原材料，系统探究不同冷冻温度（-20 ℃、-40 ℃、-50 ℃和-80 ℃）及解冻温度（4 ℃、15 ℃、25 ℃和35 ℃）组合对猕猴桃主要理化性质及香气成分的影响。结果表明：不同冷冻-解冻处理不会影响猕猴桃的色度；与鲜切猕猴桃一致，4 ℃/-50 ℃、4 ℃/-80 ℃和15 ℃/-80 ℃处理条件下猕猴桃的可溶性固形物含量均为16.0 oBrix。鲜切猕猴桃的可滴定酸和维生素C含量分别为1.22 g/hg 和45.30 mg/hg，处理后猕猴桃的可滴定酸含量为1.06~1.33 g/hg，维生素C含量降低17.62%~33.89%。不同处理后猕猴桃的多酚类物质损失率为20.44%~31.72%，且不同组合处理之间无显著差异。同时，不同处理对猕猴桃香气成分的种类和含量有一定损失，且较低的冷冻温度和解冻温度有利于香气成分的保持。综合考虑，-50 ℃/4 ℃和 -80 ℃/4 ℃冷冻-解冻组合方式可有效保持猕猴桃的品质，为猕猴桃的贮藏保鲜提供了技术支撑。 相似文献
17.
低温速冻实现肉品部分玻璃化工艺探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
试验以汁液流失为主要测试指标，以液氮为制冷工质，在不同降温速度（10℃/min,5℃/min,1℃/min,及0．1℃／min)下，将不同形状的牛肉冻至不同终温（－80℃，－60℃，－40℃，－20℃），然后用自然解冻和冷藏室解冻方法升温至0℃。结果表明，以10℃/min的速率快速降温至肉品玻璃化转变温度－60℃左右范围，可有效地减少汁液流失。相同冻结工艺条件下，形状较小的肉品汁液流失较形状较大者多；对于实现部分玻璃化的肉品，自然解冻比冷藏室解冻汁液流失少。说明液氮快速深冷冻结比普通冻结有利于实现肉品部分玻璃化状态，适当的解冻方式可避免重结晶，从而有效地减少汁液流失量，改善冷冻食品的品质。 相似文献
18.
用３．５Ｍ和２．５Ｍ ＤＭＳＯ作冷冻保护剂进行超速冷冻８－细胞鼠胚。用前者作保护剂的鼠胚，无论在体外培养和体内发育的情况都好于后者。前者中的８－细胞鼠胚解冻后的存活率为７８．９％；存活胚胎体外发育到囊胚的比率为８３．４％，体内附植率为６３．９％，胎儿形成率为４３．２％。实验证明，超速冷冻保护存胚胎是一种省时，省力，省钱的好方法。 相似文献
19.
室温下,将292枚小鼠胚胎在含128.9g/L甘油PBSS(含20％犊牛血清的磷酸盐缓冲液)和含193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内分别孵育片刻,装管后直接投入液氮冷冻保存。冻胚快速解冻后,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,用PBSS清洗后镜下观察评定,胚胎回收率为86.9％(254/292),胚胎形态正常率为77.1％(196/254)。其中部分桑椹胚经体外培养,囊胚发育率为71.4％(20/28)。将110枚冻胚移植给7只受体,3只妊娠,产仔12只(5,7),妊娠率为43％(3/7),产仔率为10.9％(12/110),其中囊胚移植1只受体妊娠产仔3只,产仔率为25％(3/12)。 相似文献
20.
以藏獒精液为研究对象,观察甘油浓度和平衡时间对对藏獒精液冷冻-解冻后品质的影响.试验表明,甘油浓度为2%和3%时,冷冻-解冻后精子在活力、精子畸形率和顶体完整率方面都显著优于甘油浓度1%和4%(P＜0.05),但2%和3%浓度之间无显著差异(P＞0.05);精子于甘油中经不同时间平衡后,冷冻-解冻后精子活力和顶体完整率以15 min和30 min显著优于其他平衡时间(P＜0.05),但2者之间无显著差异(P＞0.05).精液在甘油浓度为3%、甘油平衡时间为15 min时冷冻效果较好. 相似文献