共查询到20条相似文献，搜索用时 125 毫秒
1.
[目的]观察獐牙菜苦苷对氧化应激引起的大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,初步探讨獐牙菜苦苷抗心肌细胞氧化应激的保护作用机制。[方法]用差速贴壁法培养SD乳鼠心肌细胞,检测不同给药组中SD乳鼠细胞心肌细胞存活率以及培养液中超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量;用免疫细胞化学检测心肌细胞的相关凋亡蛋白bcl-2、Bax表达;用吖啶橙荧光染色检测细胞的凋亡情况。[结果]3种不同浓度獐牙菜苦苷均能提高心肌细胞存活率和细胞上清液中SOD含量,且能降低MDA含量,与H2O2刺激组比较有显著性差异（P〈0.05;P〈0.01）。[结论]獐牙菜苦苷对H2O2诱导损伤的心肌细胞有保护作用,其作用机制可能是通过影响氧化系统以及调控特异性蛋白来抑制心肌细胞凋亡。 相似文献
2.
目的 探讨在高糖作用下,体外培养的小鼠足细胞凋亡及bax、bcl-2表达水平的变化,及左归降糖益肾方含药血浆的调控作用。方法 将体外培养的小鼠足细胞随机分为空白组（A组,25 mmoL/L葡萄糖,10%空白血浆）、高糖组（B组,200 mmoL/L葡萄糖,10%空白血浆）、左归降糖益肾方含药血浆组（C组,200 mmoL/L葡萄糖,10%含药血浆）,4-苯基丁酸（4-PBA）含药血浆组（D组,200 mmoL/L葡萄糖,10%含药血浆）。采用间接免疫荧光细胞化学法检测足细胞凋亡情况;MTT自动比色法检测足细胞活力,蛋白质印迹法和逆转录-聚合酶链反应法分别检测bax及bcl-2蛋白或mRNA表达水平的变化。结果 与A组相比,B组足细胞活力降低,bax及 bcl-2蛋白或mRNA的表达水平均升高（P<0.01）;与B组相比,C组、D组足细胞活力升高,bax蛋白或mRNA的表达水平均降低（P<0.05或P<0.01）,bcl-2蛋白或mRNA的表达水平均升高（P<0.01）;与C组比,D组足细胞活力升高（P<0.05）,但bax及bcl-2蛋白或mRNA的表达水平,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 bax及bcl-2蛋白或mRNA表达水平的升高,是足细胞损伤的分子机制之一;左归降糖益肾方含药血浆可以通过影响bax及bcl-2蛋白或mRNA的表达水平,从而抑制足细胞凋亡。 相似文献
3.
目的 观察健脾补土组方对新生SD鼠神经元体外培养低氧/复氧后的凋亡情况以及PI3K、Akt、Caspase-3表达的影响,探讨其减少神经元凋亡的作用机制。方法 原代分离培养新生SD鼠神经元,随机分为正常血清对照组、低氧模型组、神经生长因子组、健脾补土组。将标本低氧诱导24 h,再复氧培养4 h进行造模。用流式细胞术检测神经元凋亡情况,RT-qPCR法检测PI3K、Akt、caspase-3 mRNA的表达,免疫细胞化学法和Western blot法检测PI3K、Akt、caspase-3蛋白的表达。结果 与正常对照组相比,低氧模型组神经元凋亡率显著增加,PI3K、Akt mRNA与蛋白表达显著减少,Caspase-3 mRNA与蛋白表达显著增加;与低氧模型组比较,神经生长因子组、健脾补土组神经元凋亡率均显著减少,PI3K、Akt mRNA及蛋白表达显著增强,Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著较少（P<0.01）;与神经生长因子组比较,健脾补土组神经元凋亡率显著减少,PI3K、Akt mRNA及蛋白表达显著增加,Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著降低。结论 健脾补土组方能减少脑缺血后神经元的凋亡,其作用机制可能与其通过上调PI3K和Akt的表达水平,最终抑制在细胞凋亡中起关键作用的因子Caspase-3的表达有关。 相似文献
4.
目的探讨高糖培养对乳鼠海马神经元存活及c-fos蛋白表达影响。方法无血清体外培养方法获得新生SD乳鼠海马神经元,分为正常组和高糖6、12、18、24h共5组。分别用PI/Hoechest33342染色法、免疫荧光细胞化学法检测检测海马神经元存活率及c-fos蛋白表达。结果高糖24h组海马神经元存活率明显低于正常组及高糖6、12、18h组(P<0.01)。高糖处理后,c-fos蛋白表达在6h开始出现,12h达高峰,此后逐渐下降(P<0.01)。结论高糖培养导致的乳鼠海马神经元存活率下降与c-fos蛋白表达有关。 相似文献
5.
为揭示凋亡相关基因和c-kit基因在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后的相互关系,利用RT-PCR和免疫组化技术,分别检测了caspase-3、bax、bcl-2、c-kit的mRNA和蛋白在小鼠脊髓损伤后的表达。结果显示:在SCI后4 h开始出现大量的神经元和胶质细胞凋亡,其中促凋亡因子表达增加,而抑制凋亡因子表达量减少。caspase-3的mRNA和蛋白的表达在SCI后开始增加,并在72 h时达到峰值,bax表达规律与之基本一致,但是其峰值出现在24 h。随着时间的变化,bcl-2与c-kit的表达均表现为升高—降低—升高的变化趋势,与caspase-3和bax的变化趋势相反,且其调控作用均发生在caspase-3之前。此外,SCI后c-kit基因也呈现抑制凋亡的作用。表明:损伤是导致脊髓发生凋亡的因素之一;bcl-2是凋亡抑制因子,与bax共同控制细胞凋亡,并直接作用于下游caspase-3的表达。 相似文献
6.
将草鱼肾细胞(CIK)在28℃条件下培养24h后,分别置于28(对照)、32、36和40℃的条件下暴露2h,测定不同温度处理组的细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞周期的改变、细胞内多泛素化蛋白水平以及caspase-3和bcl-2的表达变化;置于28(对照)、32、36和40℃的条件下暴露12h,测定不同温度处理组的细胞活力。试验结果表明,热应激引起细胞活力显著下降,导致CIK细胞的LDH漏出率显著上升,多泛素化蛋白表达量显著增加,bcl-2的表达量显著下调和caspase-3的表达量显著上调,G0/G1期细胞显著减少。急性热应激可能会引起CIK的细胞膜通透性和蛋白质表达量的变化,从而诱导细胞启动凋亡。 相似文献
7.
[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的凋亡及其信号通路的影响。[方法]体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·mL~(-1))进行处理,采用倒置显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化及线粒体结构,CCK-8试剂盒检测细胞的存活率,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化,ELISA试剂盒检测caspase-3酶活性,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。[结果]DON可显著抑制仔猪海马神经细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,且具有剂量和时间效应;DON可降低线粒体膜电位,增强caspase-3酶活力,并通过上调Bax mRNA和下调Bcl-2 mRNA的表达,增加Bax/Bcl-2值。[结论]DON可通过引起线粒体功能障碍,激活caspases-3并调节Bcl-2家族基因,从而诱导仔猪海马神经细胞凋亡。 相似文献
8.
3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)脂肪酸酯是一类在食品加工过程中产生的有害物质,关于其毒性机制尚不明确。本文以大鼠肾细胞NRK-52E为模型,采用RNA干扰技术,研究3-MCPD-1-棕榈酸单酯(C_(16:0)-ME)诱导肾细胞凋亡过程中JNK及p53的靶向调控作用,以及JNK1、JNK2和JNK3亚型在肾损伤过程中发挥的作用。结果表明,采用浓度为300μmol/L的C_(16:0)-ME处理细胞24h,JNK及p53磷酸化水平均显著提高,细胞凋亡相关蛋白bax及cleaved caspase-3表达量显著上调,bcl-2表达被明显抑制。当采用shRNA沉默p53蛋白表达后,采用浓度为300μmol/L的C_(16:0)-ME处理细胞24h,bax及cleaved caspase-3的表达均被抑制。在JNK 3个亚型中,只有JNK1shRNA处理组能显著减轻C_(16:0)-ME引起的肾细胞凋亡,p-c-Jun、bax、cleaved caspase-3、p53及p-p53的表达明显被抑制。研究结果表明,C_(16:0)-ME通过JNK1/p53通路诱导肾细胞凋亡。 相似文献
9.
【目的】运用si RNA沉默小鼠前体脂肪细胞3T3-L1的细胞信号负调控因子3基因(SOCS3),探讨SOCS3在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导3T3-L1细胞凋亡中的作用。【方法】体外培养3T3-L1细胞,用0,20,40,60,80,100,150,200 ng/mL TNF-α处理细胞24 h后,观察细胞凋亡情况。利用脂质体LipofectamineTM2000,用化学合成的SOCS3小干扰RNA(si RNA)转染3T3-L1细胞,用100 ng/mL TNF-α刺激24 h,荧光显微镜下观察细胞凋亡的变化,RT-PCR检测SOCS3、c-myc和survivinmRNA的表达情况。【结果】SOCS3 si RNA抑制了3T3-L1细胞中SOCS3 mRNA的表达(P<0.05)。与空白对照组相比,SOCS3 si RNA组的SOCS3 mRNA表达量极显著减少,c-myc和survivinmRNA的表达水平极显著或显著升高,而脂质体组和阴性对照组无显著差异。【结论】体外试验结果证明,靶向抑制SOCS3基因表达可以有效抑制TNF-α诱导的3T3-L1细胞凋亡。 相似文献
10.
《吉林农业科学》2013,(5):51-53
目的:探讨灭多威对家蝇胚胎细胞系MDEC-07114细胞凋亡的影响。方法:1、实验分组:不同浓度灭多威组(1 mg/mL组、2 mg/mL组、4 mg/mL组、8 mg/mL组),同时设正常组、1%丙酮组;2、HE染色法观察MDEC-07114细胞凋亡形态,并测定细胞凋亡指数;3、TUNEL检测MDEC-07114细胞凋亡。结果:1、不同浓度灭多威作用于MDEC-07114后,从2 mg/mL组开始见典型凋亡细胞,细胞凋亡指数增加,且随浓度的递增而逐渐升高;2、TUNEL检测:2 mg/mL组出现明显的绿色荧光,4 mg/mL组有所增加,8 mg/mL组荧光最强。结论:灭多威可诱导MDEC-07114细胞凋亡。 相似文献
11.
Wang Guo-yue Wang Nan Li Ming-yue Xin Jun-jie Qin Yu-shi Meng Fan-li Yuan Qiang Wang Xiao-yun Zhang Xiao-ming 《东北农业大学学报(英文版)》2021,28(2):15-22
RNA interference (RNAi) technology is a promising crop protection strategy against agricultural pests.The soybean pod borer (SPB),Leguminivora glycinivorella (Mats.),is a serious pest of soybean in northeastern Asia.The neonate larvae of SPB are endophagous,initially feeding on the inner layer of the pod and then on the immature soybean seeds,a behavior that makes them difficult to rear.Therefore,a suitable artificial diet is desirable to facilitate RNAi research.Seven artificial diets and soybean pods were used for rearing SPB neonate larvae.The survival and mean weight of the larvae reared on artificial diet 6 (A6,included 2 g soybean flour and 10 g R3 immature soybean pod powder) were found to be significantly higher than those for larvae reared on all other diets.Subsequently,A6 diet was prepared in DEPC-treated water to obtain a RNase-free artificial diet (RF).The survival and mean weight of the larvae were not significantly different between A6 and RF diets.Feeding neonate larvae with RF-SpbP0 dsRNA (ribosomal protein P0) silenced SpbP0 gene,resulting in arrested development and increased mortality.The results of this study suggested that the newly developed A6 or RF diets could rear SPB neonate larvae and help towards developing an effective method for oral delivery of dsRNA to SPB larvae. 相似文献
12.
小鼠心肌细胞的体外培养 总被引：5，自引：0，他引：5
对采用组织块法和酶消化法体外培养小鼠心肌细胞的结果进行了比较,并对体外培养心肌细胞的生理活性进行了初步测定。结果表明,用组织块法分离培养胎、乳鼠心肌可得到自主节律性搏动的心肌细胞;分别用1g/L胶原酶+10g/LBSA,0.5g/L胰酶+1g/L胶原酶,1g/L胰酶分离培养胎、乳鼠心肌,均可得到大量心肌细胞,且细胞活力较好,能自主博动20d以上;用上述2种方法分离培养成年鼠心肌,结果均不理想;在载有自主节律性搏动的小鼠心肌功能性细胞团的培养皿中加入Ca2+和肾上腺素后,细胞团搏动速度加快,搏动力加强;加入K+后则细胞团搏动速度减缓,搏动力减弱,其对钾、钙、肾上腺素的反应与在体内基本一致,表明体外培养的小鼠心肌细胞具有与在体心肌细胞相似的功能。 相似文献
13.
为了探讨新型化学益生剂甘露聚糖 -寡糖 (mannanoligosaccharides,MOS)对家畜肠道致病菌的去粘附及免疫调节作用的机制 ,进行了初生仔猪的饲养试验以及致病性大肠肝菌的分离、鉴定及其与猪红细胞的凝集试验 .初生仔猪的饲养试验选用了三元杂交初生仔猪 6 0只 ,随机分成 2组 ,处理组口服 MOS的商品制剂(Bio- MOS) ,对照组则口服同体积的蒸馏水 ,试验期 2 8d.结果表明 ,初生仔猪添加 Bio- MOS,可明显提高仔猪的日增重 (P<0 .0 5) ,降低腹泻发生率 (P<0 .0 5) ,提高机体的细胞免疫和体液免疫水平 .分离到的致病性大肠杆菌可与猪红细胞发生凝集 ,而此凝集反应可被甘露糖、果糖和 Bio- MOS所抑制 .由此可见 ,致病性大肠杆菌粘附于肠上皮的作用可被这些糖类所阻断 ,因而可以预防仔猪的大肠杆菌性腹泻 . 相似文献
14.
曲亚玲 《甘肃农业大学学报》1998,33(3):256-259
用原子吸收光谱法测定了双峰驼羔全血和被毛Ｓｅ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｍｎ等６种微量元素的含量并计算出Ｆｅ／Ｚｎ、Ｆｅ／Ｃｕ和Ｃｕ／Ｚｎ的比值。结果表明被毛中元素含量均极显著高于全血,当地驼羔处于低Ｍｎ营养状况。 相似文献
15.
大银鱼为敞水性小型鱼类，现为天津地区北塘、黄港二库、东丽水库的主要经济鱼类之一。为合理利用水库资源和将来的银鱼池塘化养殖，我们在１９９５年３月至５月初步研究了大银鱼仔、幼鱼的食性，大银鱼成鱼为肉食性鱼类，但其在仔、幼鱼阶段主要摄食水中浮游生物，食谱较为广泛。 相似文献
16.
目的：观察大鼠脊髓Ｐ物质对细胞免疫水平的影响，方法：两组新生大鼠分别皮下注射辣椒素（ＣＡＰ）和Ｐ物质抗血清，成年大鼠则于脊髓蛛网膜下腔注射，用丝裂原激活的大鼠脾细胞方法测定了淋巴细胞的白细胞介素－２（ＩＬ－２）水平。结果：大鼠皮下及脊髓蛛网膜下腔各分别注射ＣＡＰ，Ｐ物质抗血清后，ＩＬ－２的水平较对照组显著升高（Ｐ〈０．０１）。结论：新生大鼠（皮下）与成年大鼠（蛛网膜下腔）注射ＣＡＰ或Ｐ物质抗血清垃 相似文献
17.
Nishimura H Okazaki T Tanaka Y Nakatani K Hara M Matsumori A Sasayama S Mizoguchi A Hiai H Minato N Honjo T 《Science (New York, N.Y.)》2001,291(5502):319-322
Dilated cardiomyopathy is a severe pathology of the heart with poorly understood etiology. Disruption of the gene encoding the negative immunoregulatory receptor PD-1 in BALB/c mice, but not in BALB/c RAG-2-/- mice, caused dilated cardiomyopathy with severely impaired contraction and sudden death by congestive heart failure. Affected hearts showed diffuse deposition of immunoglobulin G (IgG) on the surface of cardiomyocytes. All of the affected PD-1-/- mice exhibited high-titer circulating IgG autoantibodies reactive to a 33-kilodalton protein expressed specifically on the surface of cardiomyocytes. These results indicate that PD-1 may be an important factor contributing to the prevention of autoimmune diseases. 相似文献
18.
在温度为（174-1）℃和盐度为16±1的条件下,研究了培养密度（0．1、0．2、0．3个／mL）和容积（20、50、80、150mL）对西藏拟涵Daphniopsistibetana生长和生殖的影响。结果表明：在试验范围内,低种群密度比高种群密度更有利于西藏拟淹的生长和繁殖,当种群密度为0．1个／mL时,最有利于溢体的生长和繁殖,当种群密度达到0．3个／mL时,水体中开始出现雄体（CV3组除外）;在容积试验中,容积为20—80mL时,西藏拟潘的体长随着容积的增大而增大,容积为80mL时,最适宜潘体的生长和生殖;西藏拟涵的生殖量随着体长的增加而增加。 相似文献
20.
目的 观察加味丹参饮含药血清对缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）乳鼠心肌细胞p38 MAPK蛋白表达的影响,以探讨其保护心肌的作用机制。方法 将20只SD乳鼠的心肌细胞进行原代培养,建立H/R模型并随机分为H/R组、SB203580（p38MAPK阻断剂组）、加味丹参饮含药血清组,正常心肌细胞组作为对照组。采用T淋巴细胞化学染色法鉴定心肌细胞,罗丹明B（Rhodamine B）染色法观察细胞形态,MTT比色法检测含药血清对乳鼠心肌细胞的毒性,Western-blot法检测MKK3（促分裂原活化蛋白激酶-激酶3）、MKK6（促分裂原活化蛋白激酶-激酶6）、p38MAPK、phospho-p38MAPK蛋白表达。结果 与正常血清对照组比较,H/R组MKK3、MKK6的蛋白表达增多,p38MAPK通路阻断剂SB203580和加味丹参饮均不能减少其表达;p38MAPK、phospho-p38MAPK在H/R时表达均增加（P<0.01）,而SB203580和加味丹参饮含药血清均能减少其表达（P<0.01）。结论 加味丹参饮含药血清预处理可通过抑制缺氧,复氧心肌细胞p38MAPK信号通路发挥保护作用,抑制p38MAPK表达及其磷酸化,减轻心肌细胞损伤,起到保护心肌细胞的作用。 相似文献