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根据苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了ｃｒｙⅠ基因５′端特异引物和３′端共同引物,利用ＰＣＲ扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物,通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型．本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的２０个菌株进行了ｃｒｙⅠＡ（ａ～ｃ）基因类型的ＰＣＲ鉴定．结果表明：４个菌株含有ｃｒｙⅠＡ（ａ）、ｃｒｙⅠＡ（ｂ）和ｃｒｙⅠＡ（ｃ）基因,２个菌株含有ｃｒｙⅠＡ（ａ）和ｃｒｙⅠＡ（ｃ）基因,其余菌株不含所鉴定的基因类型． 相似文献
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根据苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了ｃｒｙⅠ基因５‘端特异引物和３’端共同引物,利用ＰＣＲ扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物。通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型。本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的２０个菌株进行了ｃｒｙⅠＡ（ａ－ｃ）基因类型的ＰＣＲ鉴定。 相似文献
3.
从云南省弥勒县采集典型病株接种蔓陀萝，植斑分离，经免疫电镜（ＩＥＭ）鉴定为ＴＭＶ（Ｔｏｂａｃｃｏ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ），在红花大金元品种中以ＴＭＶ普通株作对照进行致病力测定，确定为强毒株系。以烟草花叶病毒ＲＮＡ云南强毒株系为模板。根据国内外研究结果自行设计、合成寡核苷酸引物，通过ＲＴ－ＰＣＲ体外扩增，Ｅ．ｃｏｌｉ菌株ＤＨ５ａ克隆，获得了云南烟草５４ＫＤ（ＴＭＶ复制酶）全基因片段，顺序分析表明 相似文献
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分别制备了遗传工程稻ＧＥＲ－１及其ＤＮＡ供体（慈利玉米）、ＤＮＡ受体（水稻湘早籼８号）的叶绿体ＤＮＡ（ｃｐＤＮＡ），对三者之间的多种限制性内切酶酶切图谱比较表明，ＧＥＲ－１的ｃｐＤＮＡ基本与ＤＮＡ受体水稻一致。进一步克隆了ＣＥＦ－１的ｐｓｂＡ基因，并构建其酶切图谱、测定其３＇非翻译区（３＇ＵＴＲ）序列，初步认为该基因的序列结构与水稻相同，从而排除了ＧＥＲ－１的性状变异是由其ｐｓｂＡ基因发生变化所致 相似文献
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分别制备了遗传工程稻ＧＥＲ－１及其ＤＮＡ供体（慈利玉米）、ＤＮＡ受体（水稻湘早籼８号）的叶绿体ＤＮＡ（ｃｐＤＮＡ），对三者之间的多种限制性内切酶酶切图谱比较表明，ＧＥＲ－１的ｃｐＤＮＡ基本与ＤＮＡ受体水稻一致．进一步克隆了ＣＥＲ－１的ｐｓｂＡ基因，并构建其酶切图谱、测定其３′非翻译区（３′ＵＴＲ）序列，初步认为该基因的序列结构与水稻相同，从而排除了ＧＥＲ－１的性状变异是由其ｐｓｂＡ基因发生变化所致的可能．此外，对叶绿体ＤＮＡ的制备及酶切消化作了较深入的探讨 相似文献
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新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株经ＳＰＦ鸡胚增殖和超速离心纯化后，以酚－ＳＤＳ法提取其基因组ＲＮＡ，作为反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的模板。根据其已发表的Ｆ和ＨＮ基因核苷酸序列，合成一个长为３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于Ｆ基因内）和一对分别长为２８、３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于ＨＮ基因两侧）分别作为反转录引物和ＰＣＲ引物。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析，出现一条长为１．９３ｋｂ的特异性条带，与预期相符。并将此特异性条带克隆入质粒载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）中，并经限制性核酸内切酶分析（ＲＥＡ）。ＲＴ－ＰＣＲ和ＲＥＡ结果证实其为新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株的血凝素－神经氨酸酶基因。 相似文献
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通过对前期测定的番茄枯萎病菌Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆ．ｓｐ．ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃ基因组１４５０１条ｇｅｎｅ序列进行搜索,发现４６６个简单重复序列（Ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ,ＳＳＲ）分布在４２５条ｕｎｉｇｅｎｅｓ中,发生频率为２.９３％．在番茄枯萎病基因组的ＳＳＲ中,三核苷酸重复占主导地位,占ＳＳＲ总数的６５.８８％．优势重复单元为ＡＧＣ／ＣＴＧ和ＡＡＧ／ＣＴＴ,分别占１６.５２％和１２.６６％．基于筛选的ＳＳＲｓ,运用Ｐｒｉｍｅｒ３软件进行引物的批量设计,共设计出４５１对引物．结果说明番茄枯萎病菌基因组中含有丰富的ＳＳＲ位点． 相似文献
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本研究利用对应于ＰＲＲＳＶＡＴＣＣＶＲ－２３３２株及ＬＶ株ＯＲＦ５基因保守序列的１对均为２５个碱基的引物１００５ＰＳ、１００６ＰＲ对ＰＲＲＳＶ中国分离株Ｂ１３进行ＲＴ－ＰＣＲ,扩增出了包括完整ＯＲＦ５基因的ＤＮＡ片段,片段长约７３０ｂｐ。将此片段定向克隆入ｐＵＣ１８载体的ＥｃｏＲＩ和ｓｔＩ位点之间,获得了Ｂ１３ＯＲＦ５基因与ｐＵＣ１８载体的重组质粒。通过ＥｃｏｒＩ／ＰｓｔＩ、ＥｃｏｒＩ／ＨｉｎｄⅢ 相似文献
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从人胎肝中提取得总ｍＲＮＡ，然后通过ＲＴａｓｅ反转录得到ｃＤＮＡ，利用ＰＣＲ技术克隆ＥＰＯ基因（全长为５２７ｂｐ），经过计算机分析已知ＥＰＯ基因保守区段的限制性内切酶位点，选择ＢｇｌＩ和ＨｉｎｃⅡ进行酶解，确认所获得ＤＮＡ片段为ＥＰＯ基因。 相似文献
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中国食蚜蝇科二新记录ＴＷＯＮＥＷＲＥＣＯＲＤＳＯＦＳＹＲＰＨＩＤＡＥ（ＤＩＰＴＥＲＡ）ＦＲＯＭＣＨＩＮＡ作者在整理新疆毛食蚜蝇属（ＤｅｓｙｓｙｒＰｈＳＳ）标本时，发现２种为我国新记录，现记述如下：１埃氏毛食蚜蝇Ｄａｓｙｓｙａｐｈｕｓｅｇｇｅｒｉ（Ｓｃ... 相似文献
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用ＲＡＰＤ技术鉴别了荸荠属中亲缘关系相近的两个种Ｅｄｕｌｃｉｓ和Ｅｓｐｈａｃｅｌａｔａ,根据３个１０碱基随机引物（ＳＣ１０－２３,ＳＣ１０－２５和ＡＢ０１－１８）获得的遗传距离值,用ＵＰＧＭＡ聚类方法的构建了来自８个样点的样本的分子系统树,在分子系统树中,这８个样点的样本被分为两组：Ｅｄｕｌｃｉｓ和Ｅｓｐｈａｃｅｌａｔａ。 相似文献
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用ＲＡＰＤ技术鉴别了荸荠属中亲缘关系相近的两个种：Ｅｄｕｌｃｉｓ和Ｅｓｐｈａｃｅｌａｔａ。根据３个１０碱基随机引物（ＳＣ１０２３,ＳＣ１０２５和ＡＢ０１１８）获得的遗传距离值,用ＵＰＧＭＡ聚类方法构建了来自８个样点的样本的分子系统树。在分子系统树中,这８个样点的样本被分为两组：Ｅｄｕｌｃｉｓ和Ｅｓｐｈａｃｅｌａｔａ。 相似文献
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《山西农业大学学报(自然科学版)》1994,(3)
ＴＨＥＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＢＥＴＷＥＥＮＬＡＮＧＵＡＧＥＡＮＤＣＵＬＴＵＲＥ￥ＳｏｎｇＸｉｎｍｅｉ；ＬｕＰｕｓｈｅｎｇ（ＳｈａｎｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｇｕ，０３０８０１）Ａｓｉｓｗｅｌｌｋｎｏｗ，ｌａｎｇｕａｇｅ... 相似文献
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茶胚胎发育研究的历史沿革彭海峰严学成（华南农业大学生物技术学院，广州，５１０６４２）ＲＥＳＥＡＲＣＨＡＤＶＡＮＣＥＳＯＮＴＨＥＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦＥＭＢＲＹＯＩＮＣａｍｅｌｉａｓｉｎｅｎｓｉｓＰｅｎｇＨａｉｆｅｎｇＹａｎＸｕｅｃｈｅｎｇ（Ｃｏｌ... 相似文献
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桃花种质亲缘演化关系的研究——RAPD分析 总被引：1，自引：0，他引：1
利用３６个１０碱基随机引物首次对７个桃花（Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ）近缘种和３０个品种进行ＲＡＰＤ反应。对选出１０个引物扩增出的具有多态性、可重复的、清晰的５６条带进行数据统计分析、ＵＰＧＡＭ聚类结果表明：毛桃（Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ）和新疆桃（Ｐ．ｆｅｒｇａｎｅｎｓｉｓ）之间具有很近的亲缘关系,并与桃花品种间亲缘关系最近;寿星桃、垂枝在品种在聚类图上分别较早地聚合在一起,表明其类内具有 相似文献
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传染性支气管炎病毒T株核衣壳蛋白（N）基因的克隆及部分序列分析 总被引：4，自引：0，他引：4
人工合成一双对应于ＩＢＶ－Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｎ基因ＯＲＦ两侧序列的引物,应用ＲＴ－ＰＣＲ方法,获得肾型传染性支气管炎病毒Ａｕｓｔｒａｌｉａ－Ｔ株核衣壳蛋白基因,长度１．２３ｋｂ,利用引物设计中的ＥｃｏＲ Ｉ位点将其克隆至载体ｐＳＫ（＋）中,对该基因进行限制性酶切分析。结果与已报道的相一致。通过Ｎ基因的Ｃ端部分序列分析及与Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株、Ｍ４１标准株和日本分离株相比较,结果表明该部分的序列有 相似文献
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透明颤菌血红蛋白(VHb)基因合成及原核生物中的效应 总被引：7，自引：0，他引：7
以“连续延伸ＰＣＲ基因合成法”（姚泉洪１９９９），按植物偏爱密码子，合成了全长４４１ｂｐ的透明颤菌血红蛋白（Ｖｉｔｒｅｏｓｃｉｌｌａ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ＶＨｂ）基因。此方法不需用连接酶，而用高保真ＤＮＡ聚合酶ｐｗｏ及７个长度为９０ｂｐ左右的长寡核酸引物，经一次ＰＣＲ反应即完成了全长为４４１ｂｐ基因合成。ＰＣＲ产物经ＢａｎＨＩ和ＳａｃＩ酶切，克隆入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ载体，合成的ＶＨｂ基因经克隆和测序证实与设计一致。与报道的ＶＨｂ基因相比，核苷酸改动了９８个。Ｇ＋Ｃ含量由原来的４５．３％提高到４７．８％。将该基因克隆入庆大霉素抗性基因启动子后，构建表达载体ｐＹＰ２００１ｈ（ＶＨｂｐ）。将其转入大肠杆菌菌株ＤＨ５α，在氧胁迫、缺乏、充足等三种情况下，绘制其生长曲线，探讨了合成ＶＨｂ基因在原核生物中的效应。结果 相似文献
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番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究 总被引：3，自引：1，他引：3
在ＴＭＶ外壳蛋白（ＣＰ）基因的５′和３′端分别合成寡聚核苷酸引物Ｐ１和Ｐ２，并分别引入ＣｌａＩ和ＢａｍＨＩ位点，采用ＰＣＲ技术扩增ＴＭＶＣＰ基因，用ＣｌａＩＢａｍＨＩ消化后重组到ｐＢｌｕｅ ｓｃｒｉｐｔＫＳ＋中，并将该基因与ＣＭＶＣＰ基因重组在同一个表达载体ｐＥ３上获得双价ＣＰ基因表达载体ｐＥＴＣ２，转化番茄，获得再生植株。通过点杂交、ＰＣＲ检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，证实２、１２和１３号为转ＴＭＶ和ＣＭＶＣＰ基因的工程植株。工程植株在温室中表现正常，比对照植株表现出明显的抗性。 相似文献
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《新疆农业大学学报》1998,(Z1)
ＧｅｎｕｓＳＣＨＡＣＨＴＩＣＲＡＳＰＥＤＯＮＤｉｌｌｅｒ,１９８４．ＳｃｈａｃｈｔｉｃｒａｓｐｅｄｏｎＤｉｌｅｒ,Ｅ．,１９８４．Ｅｎｔｏｍｏｆａｕｎａ５（９）：１１２．Ｇｅｎｏｔｙｐｅ：ＳｃｈａｃｈｔｉｃｒａｓｐｅｄｏｎｄｒｏｓｏｌｉｔｕｓＤｉｌｅ... 相似文献