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鸡贫血病毒DNA的PCR扩增及其分子克隆 总被引：4，自引：0，他引：4
用ＰＣＲ方法扩增了国内分离的鸡贫血病毒（ＣＡＶ）ＳＪ１株的含ＶＰ２、ＶＰ３以及部分ＶＰ１的１５００ｂｐＤＮＡ片段。经限制性内切酶酶切分析，该片段与Ｃｕｘ－１株的酶谱相似。同时，以ｐＵＣ１１９质粒载体克隆了这一ＤＮＡ片段。 相似文献
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PRV特异性糖蛋白gp50基因片段的克隆探针制备 总被引：1，自引：0，他引：1
在ＢＨＫ２１细胞中增殖伪狂犬病病毒（ＰＲＶ），提纯ＰＲＶＤＮＡ，选编码特异性糖蛋白ｇｐ５０基因中的２６２ｂｐ片段进行ＰＣＲ扩增。扩增产物经ＫｐｎⅠ和ＳａｌⅠ双酶切后，将２２２ｂｐ片段与质粒ｐＵＣ１９连接构成重组子ｐＵＰ。通过转化大肠杆菌ＪＭ８３、Ａｍｐｒ和α互补效应筛选后，扩增、提纯重组子ｐＵＰ，用ＫｐｎⅠ和ＳａｌⅠ酶切，电泳回收克隆的２２２ｂｐ片段。用光敏生物素标记２２２ｂｐ片段和重组子ｐＵＰ制备的探针，分别检出４６．８ｐｇ和９３．６ｐｇ的ＰＲＶＤＮＡ，且ｐＵＰ探针只与ＰＲＶ呈杂交阳性反应，与ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２及ＣＭＶ呈阴性反应。 相似文献
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利用ＰＳｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切及低熔点琼脂糖凝胶电泳技术，从重组质粒ＰＵＰ中回收３．０ｋｂ猪细小病毒ＤＮＡ片段。以地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ）标记后制备探针。运用该探针对作者分离并鉴定的７株猪细小病毒及ＰＰＶ－ＢＭ１株、四川株、Ｚ株、广西株、天津株进行打点杂交，并以具有相同临床症状的猪病毒性疾病的猪瘟病毒、日本乙型脑炎病毒、伪狂犬病病毒以及ＰＵＰ质粒、ＰＫ－１５为对照。结果探针与猪细小病毒ＤＮＡ、ＰＵＰ质粒的杂交呈阳性反应，而对照病毒、ＰＫ－１５呈阴性反应，探针的最低检出限量为４０ｐｇＤＮＡ。结果表明，该探针具有特异性强、敏感性高，可用于猪细小病毒的检测 相似文献
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猪瘟病毒石门株基因组cDNA片断的扩增与克隆测序 总被引：4，自引：0，他引：4
以猪瘟病毒（ＨＣＶ）中国石门株强毒的血毒、细胞毒及Ｃ系兔化弱毒的细胞毒中提取的总ＲＮＡ为模板，应用逆转录─聚合酶链式反应（ＲＴ一ＰＣＲ），在合成的两对ＨＣＶ特异引物引导下，扩增出与预计大小一致的４４１和３００ｂｐ两个核酸片断。寡核苷酸探针杂交证实确为ＨＣＶＰ_８０和ｇｐ４４／４８蛋白编码区特异性的ｃＤＮＡ片断。扩增片断克隆入ｐＵＣ_１９和ｐＢＳＫ（＋）中，并对ＨＣＶ石门株Ｐ_８０区ｃＤＮＡ片断进行测序分析，其与国外Ａｌｆｏｒｔ、Ｂｒｅｓｃｉａ株同源性分别为９０．６％和９４．６％。氨基酸水平上同源性高达９８．４％。为抗猪瘟病毒Ｐ_８０区核酶的设计和应用提供了依据。 相似文献
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牛传染性鼻气管炎病毒TK基因缺失株与野毒株PCR鉴别诊断方法的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
根据已发表的牛传染性敢管炎病毒（ＩＢＲＶ）ＴＫ基因和ｇＢ基因序列，应用Ｏｌｉｇｏ４．１程序设计两对引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２及ＰＢ１和ＰＢ２，分别对已构建的ＴＫ基因缺失（ＴＫ）ＩＢＲＶ以及ＩＢＲＶＬＡ株、洛精、美精、ＢａｒｔｈａＮｕ／６７株、Ｂ７株、云南－１和云南－２分离株进行了ＰＣＲ扩增，结果显示７株ＩＢＲＶＤＮＡ用引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２扩增产生４５７ｂｐ的特异性片段，而ＴＫＩＢＲＶ只出现１１０ｂｐ 相似文献
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本研究根据Ｂａｒｒｅｔｔ．Ｔ报道的犬温热病毒（ＣＤＶ）Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ株融合蛋白（Ｆ）的基因序列，设计合成了一对可扩增出穿膜区基因的引物（Ｐ８和Ｐ１８），引对引物扩增的ｃＤＮＡ长度应为６２０ｂｐ。 相似文献
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伪狂犬病病毒鄂A株TK基因的克隆及其鉴定 总被引：6，自引：0，他引：6
合成了 １ 对能对伪狂犬病病毒（ Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ ｖｉｒｕｓ, Ｐ Ｒ Ｖ） Ｔ Ｋ（ｔｈｙｍ ｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ）基因＋ １１９～＋ １ ０７１区进行特异扩增的引物,用猪 Ｐ Ｒ Ｖ 鄂 Ａ 株细胞培养物提取的基因组作模板,扩增出 ９５３ ｂｐ 长的片段,用地高辛标记该片段作探针,通过 Ｓｏｕｔｈ ｅｒｎ 杂交,从克隆有 Ｐ Ｒ Ｖ 鄂 Ａ 株的 Ｂａｍ Ｈ Ｉ片段的重组质粒中钓出含 Ｔ Ｋ 基因的重组质粒 ｐ Ｓ Ｔ Ｋ。对 ｐ Ｓ Ｔ Ｋ 进行酶切分析,绘制了含 Ｔ Ｋ 基因的 Ｂａｍ Ｈ Ｉ片段的图谱,通过测序得出了 Ｔ Ｋ 基因的全序列。将该序列与 Ｐ Ｒ Ｖ Ｎ Ｉ Ａ３ 株 Ｔ Ｋ 基因进行比较,发现鄂 Ａ 株的 Ｔ Ｋ 基因存在变异。 相似文献
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参考Ｃｕｌ株核酸序列自行设计一对２０ｂｐ序列为引物，经反转录和ＰＣＲ扩增传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）核酸高度保守的Ｖｐ４编码区中１５０ｂｐ的片段，用于检测ＩＢＤＶ。对德国Ｃｕｌ株、美国标准强毒ＳＴＣ和变异株１０８４Ｅ、中国ｑ８０１以及７个国内野外分离株分别进行扩增，同时对新城疫病毒（ＮＤＶ）、马立克氏病毒（ＭＤＶ）、禽呼肠孤病毒（ＲＥＯＶ）、禽腺病毒（ＨＡＡ）、Ｖｅｒｏ细胞、ＳＰＦ鸡法氏囊组织进行扩增后，２％琼脂糖凝胶电泳分析，１１株ＩＢＤＶ都出现分子量大小与设计相符合的ＤＮＡ扩增带，４种其他病毒、囊组织和Ｖｅｒｏ细胞都未出现任何扩增带。建立了直接采用细胞毒或组织毒进行ＰＣＲ的快速简便的核酸提取方法，应用二级ＰＣＲ扩增出了与一级ＰＣＲ相符的更加清晰的扩增带。 相似文献
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概述了昆虫信息激素的种类。着重就桑蚕信息激素(桑蚕醇、桑蚕醛)的结构和理化性质，信息激素的感受机制，电生理反应和嗅觉感受的学说，以及对桑蚕信息激素的扩散和雄蛾最终找到雌蛾的机制作了论述。 相似文献
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引言 工业配合饲料产业是动物源食品产业链的重要一环,良好管理规范对于生产安全饲料和安全食品这一产业链的每个阶段--从上游生产到最后加工阶段的都至关重要.因此,饲料和食品链的生产企业有责任推行良好的操作规范以确保所生产的产品安全性. 相似文献
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上接2003,342:96信息激素的电生理反应Schneider(1956、1957、1959)曾详细地研究了桑蚕雄虫触角对于性外激素(蚕醇)的电生理效应。他们用刚切下的一段触角,插入一个微小的、涂氯化银的电极,通过一个放大器连接到一个示波器上,记录下触角在受雌虫性外激素(及其他化合物)的作用下的作用电位。这个典型的反应就是触角电位图(Electroan-tennogram简称EAG),而其它的嗅觉刺激物或药品则引起不同形状的EAG。EAG的振幅和该引诱剂的浓度直接相关。当嗅觉刺激物是雌性蚕蛾性引诱剂的提取物时,在雄蛾触角中的电活性提高,但在雌蛾中则没有。当刺激… 相似文献
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含LacZ报告基因的传染性喉气管炎病毒TK基因转移载体质粒的构建 总被引：2，自引：0，他引：2
在传染性喉气管炎病毒北京Ｅ２株ＴＫ基因克隆,鉴定的基础上,进一步构建转移载体质粒,为ＩＬＴＶ ＴＫ基因缺失毒株的构建作准备,先用ＰｓｔＩ将ｐＳＶ－ｇａｌ线性化,再经ＥｃｏＲｉ不完全酶切,分离含ＳＶ４０立即早期启动子和增强子的４．２Ｋｂ的ＬａｃＺ报告基因片段,并用Ｋｌｅｎｏｗ大片段补平,将克隆ＴＫ基因的载体ｐＴＫ用ＳｎａＢＩ处理,后用Ｔ４ＤＮＡ连接酶将以上两个片段平端连续成重组质粒,转化 ＪＭ１０９ 相似文献
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The first case of Entamoeba of the 1-nucleate mature cyst group in birds is described. Trophozoites and cysts of Entamoeba have been found in ostriches (Struthio camelus) from farms located all over Spain. The cysts are large (13.47microm mean diameter); they possess one nucleus when mature, with a large endosome and peripheral chromatine arranged in small granules; chromatoid bodies, when present, are large and elongated. Trophozoites are large (19. 88microm mean diameter), with a clear differentiation between ecto- and endoplasm, this containing numerous vacuoles; the nucleus is large and diffuse. The characteristics of this amoeba resembles but do not completely fulfill those of E. suis and E. chattoni; also, these species are from mammals. 相似文献
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Wobeser G Mitcham SA Saunders JR Hunt HM 《The Canadian veterinary journal. La revue veterinaire canadienne》1983,24(10):316-317
Six mule deer (Odocoileus hemionus) with dermatomycosis are described. Trichophyton verrucosum was isolated from four. All infections were mild and were not debilitating. The lesions involved the legs in five animals and the face in two. This is the second report of ringworm in a wild ungulate in North America. 相似文献
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大肠杆菌肠毒素ST1-LTB融合基因的高效表达 总被引：13，自引：0，他引：13
用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１,回收０８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因,再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切,然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒,得到了理想重组质粒ｐＸＥＴＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后,其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测,结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的３３２１％,而且无天然ＳＴ１生物毒性。 相似文献
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