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1.
本试验旨在通过研究谷氨酰胺对过氧化氢(H_2O_2)诱导氧化应激人结肠癌HT-29细胞损伤和凋亡的影响,阐明谷氨酰胺的抗氧化效果和作用机理。HT-29细胞经不同浓度[0(对照组)、0.5、2.0、10.0 mmol/L]谷氨酰胺和0.35 mmol/L H_2O_2分别处理12、24、32 h后,测定细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并采用荧光定量PCR方法分析谷氨酰胺对H_2O_2诱导的细胞凋亡相关基因的mRNA相对表达量,以及采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法对HT-29细胞染色,并用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果表明:1)处理24 h后,0.5、2.0 mmol/L Gln组SOD活性显著高于对照组(P0.05);处理32 h后,0.5、2.0 mmol/L Gln组SOD活性显著高于对照组(P0.05),MDA含量显著低于对照组(P0.05)。2)处理12 h后,各组天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)mRNA相对表达量无显著差异(P0.05)。与对照组比较,0.5 mmol/L Gln组核转录因子κB(NF-κB)mRNA相对表达量显著降低(P0.05),0.5与2.0 mmol/L Gln组B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA相对表达量显著提高(P0.05)。处理24 h后,与对照组比较,0.5、2.0和10.0 mmol/L Gln组Caspase-3、NF-κB和Bax mRNA相对表达量均显著降低(P0.05),Bcl-2mRNA相对表达量显著升高(P0.05)。处理32 h后,与对照组比较,2.0 mmol/L Gln组细胞表面诱导凋亡分子(FAS)、Caspase-3、NF-κB、Bax mRNA相对表达量均显著降低(P0.05),Bcl-2mRNA相对表达量显著升高(P0.05);10.0 mmol/L Gln组FAS、Caspase-3、NF-κB、Bax mRNA相对表达量均显著升高(P0.05)。3)处理24 h后,与对照组比较,Gln处理使活细胞数量提高了5.32%~11.97%,坏死细胞数量降低了6.75%~12.66%。处理32 h后,与对照组比较,Gln处理使活细胞数量提高了1.39%~7.63%,坏死细胞数量降低了3.40%~4.57%。由此可见,谷氨酰胺可抑制氧化应激反应,降低H_2O_2诱导的HT-29细胞凋亡。 相似文献
2.
谷氨酰胺(GlutamineGln)是L-谷氨酸的γ-羧基酰胺化物,是体液中最丰富的氨基酸之一,在生命活动中起着重要的作用,如可增强免疫功能、维持酸碱平衡、增加细胞体积、增强肌肉细胞内蛋白质的合成等。近年来的医学和动物营养学的发现表明,Gln的缺乏会引发多种疾病或导致动物生长发育的滞缓,现已普遍认为Gln是一种条件性必需氨基酸。所以,Gln是一种极有发展前景的新型药物和动物营养性饲料添加剂。1谷氨酰胺在动物营养中的作用机理动物胃肠道正常的免疫功能包括两个方面:一是非特异性的,如胃酸、粘液、消化酶、正常菌群以及巨噬细胞、肥大细胞… 相似文献
3.
《中国兽医杂志》2017,(1)
为了探讨温和热应激、脂多糖(LPS)和谷氨酰胺(Gln)诱导牛睾丸支持细胞(b SCs)HSP72的时效表达规律,本试验将传至第3代b SCs分成热应激、LPS和Gln处理组,用CCK-8试剂盒检测细胞活性,用RT-PCR和Western-Blot方法分别检测处理后0、2、4、6、8、12、14h和16 h时细胞内HSP72 mRNA和蛋白表达。结果显示,3种方式均能诱导HSP72表达,且HSP72蛋白分别在热应激、Gln和LPS预处理后2、4h和12 h时表达量最高。结果表明,热应激或Gln均比LPS诱导牛睾丸支持细胞HSP72表达的时间早,提示可考虑用Gln减少由LPS诱导的细胞损伤。 相似文献
4.
紧密连接是上皮细胞顶端连接复合体的重要组成部分,对维持上皮细胞的屏障功能、门控功能和细胞间联系等具有重要意义。Ras同源蛋白(Rho)A-Rho激酶(ROCK)信号转导途径在紧密连接的形成和功能发挥中起着重要的作用,如:RhoA的活化是保证紧密连接功能正常发挥的重要起始过程,而RhoA失衡、RhoA过度活化则会导致紧密连接的解聚;RhoA-ROCK信号转导途径能通过影响紧密连接蛋白的合成与定位从而调节上皮细胞间隙通透性;另外,RhoA信号能通过调节肌动蛋白细胞骨架收缩、直接调节连接膜蛋白等机制影响上皮细胞间隙通透性。本文拟就上皮细胞紧密连接结构、功能及RhoA-ROCK信号转导途径对其调控作用进行综述。 相似文献
5.
本试验旨在研究饲粮中添加谷氨酰胺(Gln)对断奶仔猪不同阶段生长性能的影响,以及其对脂多糖(LPS)诱导肠道损伤后断奶仔猪血清生化指标和生长性能的影响。选用24头28日龄健康的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为3组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组和LPS组饲喂基础饲粮,Gln+LPS组饲喂添加了1%的外源性Gln的基础饲粮;在试验第22、25、28、30天,LPS组和Gln+LPS组腹腔注射100μg/kg BW LPS,对照组则注射相同剂量的生理盐水。试验期30 d。结果表明:1)LPS处理前(试验第1~21天),与对照组相比,Gln+LPS组显著提高了试验第1~7天断奶仔猪的平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)(P0.05),显著提高了试验第8~14天和第1~21天断奶仔猪的ADFI(P0.05)。2)LPS处理后(试验第22~30天),对照组断奶仔猪的ADFI、ADG、第30天体重均显著高于LPS组和Gln+LPS组(P0.05),Gln+LPS组断奶仔猪的ADFI、ADG、第30天体重均高于LPS组(P0.05)。3)LPS组断奶仔猪的小肠长度显著低于对照组和Gln+LPS组(P0.05),而对照组和Gln+LPS组之间无显著差异(P0.05)。4)与对照组相比,Gln+LPS组断奶仔猪的血清高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量和碱性磷酸酶(ALP)活性显著降低(P0.05),而Gln+LPS组与LPS组之间无显著差异(P0.05);Gln+LPS组和LPS组断奶仔猪的血清免疫球蛋白M(Ig M)含量显著提高(P0.05)。由此可见,饲粮中添加1%的Gln能够显著提高仔猪断奶后第1~7天的生长性能,之后效果不明显。饲粮中添加1%的Gln能够调节应激仔猪的血清生化指标,改善其生长性能和小肠长度,从而缓解仔猪断奶应激。 相似文献
6.
本文旨在研究胰高血糖素样肽-2(GLP-2)对离体培养的断奶仔猪空肠上皮紧密连接蛋白相关基因表达的影响,探讨GLP-2调节肠道黏膜屏障的可能机制。将断奶仔猪空肠组织块置于含0、1×10-8、1×10-7mol/L的GLP-2的细胞培养液中进行培养,考察不同GLP-2添加水平对断奶仔猪空肠上皮丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路细胞外调节蛋白激酶丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2(MEK1/2)、p90核糖体S6蛋白激酶(p90RSK)以及紧密连接蛋白ZO-1、Oc-cludin、Claudin-1基因表达的影响,待确定出GLP-2能有效促进紧密连接蛋白相关基因表达的剂量后,再向培养液中添加MEK1/2的特异性阻断剂U0126,考察阻断MAPK经典通路后紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因表达的变化。结果表明,与对照组相比,将空肠组织块置于含1×10-7和1×10-8mol/L GLP-2的培养液中培养72 h均能显著促进MEK1/2、p90RSK以及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因mRNA相对表达量(P<0.05),除ZO-1的基因之外,上述各蛋白的基因mRNA相对表达量还随着GLP-2浓度的增高而升高(P<0.05);向1×10-7mol/L的GLP-2组添加U0126阻断p90RSK、ERK1/2的基因表达后,紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因mRNA相对表达量也显著下降(P<0.05)。由此可知,GLP-2能够促进断奶仔猪空肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因表达,而MAPK通路可能是GLP-2调控肠道紧密连接蛋白基因表达的重要信号通路之一。 相似文献
7.
谷氨酰胺及其前体物对松浦镜鲤组织抗氧化能力及血清生化指标的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验旨在探究谷氨酰胺及其前体物对松浦镜鲤组织抗氧化能力及血清生化指标的影响。试验选用平均体重为(40.27±3.96)g的松浦镜鲤幼鱼1 050尾,随机分成7组,每组5个重复,每个重复30尾鱼。在基础饲料中分别添加1.5%的葡萄糖(对照)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)、α-酮戊二酸(AKG)、L-鸟氨酸-α-酮戊二酸(OKG)、L-精氨酸-α-酮戊二酸(AAKG)、α-酮戊二酸钠(2Na-AKG),配制成等氮等能的7种饲料,分别投喂7组试验鱼。养殖试验为期8周。结果表明:肠道中,Gln和Glu组超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P0.05),Gln组谷胱甘肽(GSH)含量显著高于对照组(P0.05),Glu、AKG、OKG和2 Na-AKG组丙二醛(M DA)含量显著低于对照组(P0.05);肝脏中,Gln和Glu组SOD活性显著高于其他各组(P0.05),GSH含量各组间无显著差异(P0.05),Gln、Glu、AKG、2Na-AKG和OKG组MDA含量显著低于对照组(P0.05);血清中,OKG和2Na-AKG组SOD活性显著高于对照组(P0.05),2Na-AKG组GSH含量显著低于对照组(P0.05),MDA含量各组间差异不显著(P0.05)。与对照组相比,Gln、Glu、AKG组血清总蛋白(TP)含量显著升高(P0.05),2 Na-AKG组显著降低(P0.05);AAKG组血清谷丙转氨酶(ALT)活性显著升高(P0.05),OKG和2 Na-AKG组血清谷草转氨酶(AST)活性显著升高(P0.05),AKG组血清AST活性显著降低(P0.05);AAKG组血清总胆固醇(TCHO)含量显著降低(P0.05);AKG组血清葡萄糖含量显著降低(P0.05)。综上所述,Gln及其前体物对松浦镜鲤的组织抗氧化能力均有一定影响,从机体对脂质过氧化产物的清除能力看,以Glu、AKG、OKG和2Na-AKG的效果较佳;Gln、Glu和AKG可提高机体的蛋白质利用率和免疫力,AKG还可降低血清葡萄糖含量。 相似文献
8.
目的在于建立一种准确、简便、快速的高效液相色谱法,测定乳中Gln的含量;研究猪乳中游离Gln水平的动态变化规律。反相C18柱为固定相,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,50mmol/L醋酸缓冲液(pH6.50)-乙腈(97.7∶2.3)为流动相,进行单泵洗脱,在波长254nm处检测Gln的含量。结果:线性范围25~500μmol/L,相关系数r=0.9987,批内变异系数为3.64%,高低2种浓度的回收率分别为(104.6%)和(99.9%)。猪乳中游离Gln含量在产后第1天为29.22μmol/L,随时间推移呈上升趋势,至产后27d(593.74μmol/L)达到高峰。结论:本法简便、快速、无需梯度洗脱,分离效果好,适用于有关动物的乳中Gln的检测和研究;缺乏Gln可能是仔猪断奶后腹泻的一个重要原因。 相似文献
9.
《畜牧兽医学报》2020,(5)
本试验旨在研究中国蜂胶乙醇提取物(ethanol extract of Chinese propolis,EECP)对细菌脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激下体外培养奶牛乳腺上皮细胞炎症相关基因mRNA转录水平和紧密连接渗透性的影响。EECP中总酚酸和总黄酮含量测定采用福林酚法和硝酸铝法,并建立LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,MAC-T)炎症模型,采用CCK-8法测定EECP对MAC-T相对增殖率的影响,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)评估EECP对LPS诱导的MAC-T细胞炎症相关因子(IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β)相对mRNA转录水平;以及对紧密连接蛋白(occludin、ZO-1)相对mRNA转录水平进行检测,并进一步利用免疫荧光技术对紧密连接膜蛋白进行定位,确定EECP对LPS诱导MAC-T细胞炎症紧密连接渗透性的影响。结果显示:EECP中总酚酸含量为106.35 mg没食子酸当量(GAE)·g~(-1)、总黄酮含量为320.85 mg芦丁当量(RE)·g~(-1);CCK-8结果显示EECP的安全浓度为0～15μg·mL~(-1),并可有效提高LPS刺激下MAC-T的活力;LPS刺激显著增加了细胞炎症相关因子IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1βmRNA的转录量(P0.001);但2.5～15.0μg·mL~(-1) EECP预处理显著降低了IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1βmRNA的转录量;与此类似,LPS刺激显著抑制了紧密连接蛋白基因(occludin、ZO-1)mRNA的转录量(P0.01),而EECP预处理后紧密连接蛋白基因(occludin和ZO-1) mRNA的转录量显著增加(P0.05);免疫荧光染色试验也证实EECP能通过上调紧密连接蛋白(occludin、ZO-1)的表达,缓解LPS诱导的乳腺上皮细胞屏障功能紊乱。该结果证实,EECP对细菌脂多糖诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症具有良好的保护作用,这为利用中国蜂胶预防奶牛乳腺炎提供了试验基础。 相似文献
10.
采用体外淋巴细胞转化试验研究谷氨酰胺(Gln)及丙氨酰谷氨酰胺(Ala-Gln)对早期断奶仔猪肠系膜淋巴结细胞增殖的影响。摘取28日龄断奶仔猪肠系膜空、回肠淋巴结,分离淋巴细胞,接种于含不同浓度Gln或Ala-Gln的培养液中37℃培养72h后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖。Gln浓度为2mmol/L时,淋巴细胞刺激指数最大;Ala-Gln浓度为1mmol/L时,淋巴细胞刺激指数最大。增加Gln或Ala-Gln浓度并没有增加其效应。本试验表明Gln和Ala-Gln均可以促进丝裂原植物凝集素(PHA)刺激的淋巴细胞增殖,在一定浓度范围内Ala-Gln与Gln具有相似的作用。 相似文献
11.
本试验旨在研究母鸽饲粮中添加不同剂量谷氨酰胺(Gln)对母鸽月产蛋数、孵化率、乳鸽数的影响,并测定母鸽产蛋后不同时间段内血清中的Gln值。试验分为4组,每组100对种鸽,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组每天分别饲喂0.1、0.2、0.3g/d的Gln,对照组饲喂基础饲粮。生产模式各组均为自然孵化。试验结果表明:在同一组不同产蛋时间段内,Ⅰ组母鸽血清Gln值产蛋后17d较产蛋后1d提高26.18%(P<0.01);Ⅱ组产蛋后17d较产蛋后8d降低18.01%(P<0.05);Ⅲ组和对照组产蛋后各时间段差异不显著(P>0.05)。其生产性能上,Ⅰ组母鸽月产蛋总数较对照组、Ⅱ组、Ⅲ组提高16.7%(P<0.01)、22.5%(P<0.01)、17.1%(P<0.01)。Ⅰ组母鸽月孵化率较对照组、Ⅱ组提高8.7%(P<0.01)、8.2%(P<0.01),Ⅲ组较对照组、Ⅱ组提高8.8%(P<0.01)、8.3%(P<0.01)。Ⅰ组母鸽月产乳鸽数较对照组、Ⅱ组、Ⅲ组提高25.9%(P<0.01)、32.7%(P<0.01)、17.3%(P<0.01),Ⅱ组较对照组、Ⅲ组降低4.9%(P<0.05)、11.4%(P<0.01);Ⅲ组较对照组提高了7.3%(P<0.01)。产双蛋、单蛋及间歇产蛋母鸽血清Gln值进行对比分析表明,母鸽只在产第1枚蛋后血清Gln与产蛋相关,产双蛋Gln值[(3.12±0.24)mmol/L]为正常生产值,Gln值高于2.89mmol/L(3.12-0.24=2.89mmol/L)的可以在48h内产第2枚蛋。综上,母鸽血清中Gln的含量与其生产性能有关,在饲料中添加一定量的Gln,可改善肉种鸽的生产性能,每只种鸽每日添加Gln0.1g最佳。 相似文献
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谷氨酰胺对断奶仔猪抗菌肽PR-39 mRNA的表达调控 总被引：1，自引：1，他引：0
本文旨在探讨谷氨酰胺(Gln)对断奶仔猪抗菌肽PR-39 mRNA表达的影响.选取64头胎次相同、28日龄断奶、体重(7.50±0.67)kg的三元杂交仔猪(杜×长×大),随机分为2个组,即基础日粮对照组和1.0%Gln添加组,每组设4个重复,每个重复8头猪(公母各1/2).于试验第28天,进行细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的分析.于第30天,采用半定量RT-PCR研究日粮中添加Gln对PR-39 mRNA的影响.试验结果表明:Gln添加显著提高仔猪血清中IL-1β含量(P<0.05),但对血清IL-6和TNF-α及空肠黏膜TNF-α、IL-2无显著影响(P>0.05);显著促使骨髓,空肠黏膜中PR-39 mRNA的表达(P<0.05),与对照组相比,骨髓和空肠黏膜中PR-39 mRNA分别提高50.5%(P<0.05)和24.0%(P<0.05).由结果可知,断奶仔猪日粮中添加Gln能显著促使骨髓及空肠黏膜PR-39 mRNA表达上调. 相似文献
13.
【目的】研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对小肠类器官生长、紧密连接蛋白及各种功能细胞标记基因的影响,以建立小肠类器官的疾病损伤模型。【方法】取小鼠小肠,用温和细胞解离试剂(GCDR)消化液分离小鼠隐窝细胞并用肠道类器官培养基培养。选取0(对照组)、50、250、500 ng/mL TNF-α刺激小肠类器官48 h,光学显微镜下观察类器官生长情况,Edu染色示踪细胞增殖的情况,利用实时荧光定量PCR检测细胞增殖、屏障功能和肠道功能细胞标记基因mRNA表达水平。【结果】(1)与对照组相比,50和250 ng/mL TNF-α显著降低小肠类器官的出芽率(P<0.05),而对类器官形成率无影响(P>0.05);250和500 ng/mL TNF-α导致小肠类器官坏死率显著升高(P<0.05)。(2)与对照组相比,250 ng/mL TNF-α显著降低小肠类器官紧密连接蛋白Occludin mRNA表达量(P<0.05);500 ng/mL TNF-α显著提高小肠类器官紧密连接蛋白Claudin-1 mRNA表达量(P<0.05)。(3)与对照组相比,50、250... 相似文献
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谷氨酰胺的生理功能及在动物营养中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
谷氨酰胺 (Gln)是动物体内一种重要的营养素 ,是动物体内含量最丰富的游离氨基酸 ,具有重要的生理作用。据报道 ,Gln所含的酰胺氮是所有细胞的生物合成所必需的 ,体内细胞利用 Gln可合成嘌呤、嘧啶、氨基糖及其他氨基酸。研究表明 ,Gln在健康状态下是非必需氨基酸 ,但在饥饿、化疗、辐射等导致小肠粘膜受损或 Gln严重耗竭的情况下是必需氨基酸。对肠道而言 ,Gln在正常状况下是非必需氨基酸 ,但在某种疾病或应激情况下是必需氨基酸。因此 ,NRC(1998)《猪的营养需要》中将 Gln定义为“条件性必需氨基酸”。1 Gln的结构与生化特性Gln是 … 相似文献
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试验旨在研究谷氨酰胺(Gln)对灌服大豆分离蛋白(SPI)仔猪肝脏和肌肉抗氧化功能及肝脏形态结构的影响。将24头7日龄健康仔猪(杜×长×大)随机分为3组:对照组、SPI组、SPI+Gln组,每组8个重复,每个重复1头猪。试验第1～5 d各组仔猪均饲喂人工乳,试验第6～7 d SPI组和SPI+Gln组每头仔猪饲喂含大豆分离蛋白(10 g/kg BW)的人工乳,对照组饲喂含酪蛋白(7.8 g/kg BW)的人工乳。试验第8～10 d SPI+Gln组灌服Gln(250 mg/kg BW),其余2组灌服丙氨酸(305 mg/kg BW)。试验第11 d屠宰仔猪,取肝脏、腓肠肌、背最长肌组织样品,检测抗氧化酶活性和氧化产物的含量,并制作苏木素-伊红染色肝脏切片。结果表明,SPI可诱导肝脏脂肪变性、细胞空泡化和细胞排列无序,并提高了仔猪肝脏MDA(P<0.05)、腓肠肌H_2O_2及背最长肌MDA的含量,但显著降低了腓肠肌、背最长肌CAT和GSH-Px活性。Gln处理缓解了SPI仔猪肝细胞形态的异常与脂肪变性,提高了肝脏GSH-Px活性,并显著降低了SPI仔猪肝脏MDA和腓肠肌的H2O2的含量(P<0.05)。因此,SPI诱导仔猪肝脏形态结构异常、肝脏和肌肉抗氧化能力下降,而Gln可有效缓解肝细胞损伤,提高仔猪肝脏与腓肠肌抗氧化能力。 相似文献
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谷氨酰胺(G1utanline，Gln)是动物体内含量最丰富的游离氨基酸，具有重要的营养生理作用。NRC(1998)《猪的营养需要》中将Gln定义为“条件性必需氨基酸”。本综述了Gln在动物体内的合成代谢、营养生理功能及其在早期断奶仔猪生产中的作用机理及效果研究现状. 相似文献
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《畜牧兽医学报》2017,(4)
本试验旨在研究日粮中添加谷氨酰胺(Gln)对大肠杆菌型脂多糖(LPS)诱导肠道黏膜损伤后断奶仔猪免疫性能的影响。选取28日龄健康断奶仔猪24头,随机分为3组,每组8个重复。其中,空白对照组和LPS组饲喂常规基础日粮,Gln组饲喂添加1%谷氨酰胺的基础日粮。试验期30d,于试验期第22、25、28、30天对LPS组和Gln组腹腔注射LPS(按体重以100μg·kg-1给予),空白对照组腹腔注射等体积的无菌生理盐水。第30天对仔猪进行前腔静脉采血并屠宰采取所需样品,检测血清中免疫球蛋白、相关炎症因子浓度及各肠段中这些炎症因子基因的表达丰度。与空白对照组相比,LPS组和Gln组血清IgM水平显著提高40.00%和62.86%(P0.05);LPS组血清IL-8含量显著提高7.11%(P0.05),而Gln组则无明显变化。不论在LPS攻毒前还是攻毒后,日粮添加Gln均可显著提高仔猪血清IL-17含量(P0.05)。与空白对照组相比,LPS组和Gln组十二指肠中IL-8mRNA表达水平显著降低了35.06%和44.16%(P0.05)。对于IL-12βmRNA的表达水平,在空肠和回肠中Gln组中的表达水平较LPS组高,但在十二指肠中有所降低(P0.05)。在十二指肠与空肠中,IL-17αmRNA的表达丰度在三组间存在差异(P0.05),特别是在十二指肠和回肠中,Gln组的表达丰度达到最高;LPS组和Gln组空肠中IL-17αmRNA相对表达量显著降低58.16%和56.07%(P0.05)。结果提示,日粮中添加1%的谷氨酰胺能够在一定程度上改善LPS诱导肠道损伤后断奶仔猪的免疫力,减轻应激反应造成的机体损伤。 相似文献
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本试验以谷氨酰胺作为热休克蛋白70(HSP70)诱导剂,从细胞凋亡线粒体信号转导途径探讨HSP70对热应激猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)凋亡相关因子的影响。试验以体外培养的猪小肠上皮细胞为模型,分别加入不同浓度(1、2、4、6、8、10 mmol/L)谷氨酰胺的培养基中培养24 h,提取总RNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR和Western blot检测HSP70 mRNA和蛋白的相对表达量,筛选出谷氨酰胺诱导HSP70表达的最佳浓度。取对数生长期的细胞分为3组,分别为对照组(Con组,37℃培养12 h)、热应激组(Hs组,42℃培养12 h)、谷氨酰胺组(Gln组,6 mmol/L谷氨酰胺、42℃培养12 h)。采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测HSP70、凋亡酶激活因子-1(Apaf-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的mRNA和蛋白的相对表达量。结果表明:谷氨酰胺对HSP70上调表达呈先上升后下降的趋势,6 mmol/L的谷氨酰胺诱导时HSP70 mRNA和蛋白相对表达量最高,显著高于其他浓度(P<0.05),作为后续试验中Gln组的诱导条件。与Con组相比,Hs组细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),HSP70、Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01),而Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量极显著降低(P<0.01)。与Hs组相比,Gln组细胞凋亡率极显著降低(P<0.01),但仍极显著高于Con组(P<0.01);Gln组HSP70 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01);Gln组Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的相对表达量极显著降低(P<0.01),但极显著高于Con组(P<0.01);Gln组Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01),但极显著低于Con组(P<0.01)。由此可见,上调HSP70的表达可有效缓解热应激导致的猪小肠上皮细胞凋亡。 相似文献
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谷氨酰胺及其二肽与动物肠道营养免疫 总被引：1，自引：0，他引：1
谷氨酰胺(Glutamine，Gln)是哺乳动物体内含量最丰富的游离氨基酸。Gln不仅是快速分裂增殖细胞如肠上皮细胞和淋巴细胞的主要能量来源，而且可促进淋巴细胞增殖，在促进受损肠道的修复以及维持正常的局部免疫功能中发挥重要的作用。 相似文献