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1.
《畜牧兽医学报》2015,(9)
为探讨不同毒力结核分枝杆菌(MTB)感染巨噬细胞后不同时间点细胞凋亡情况与其分泌的几种主要细胞因子转录与表达之间的关系,建立THP-1体外巨噬细胞模型,用不同毒力MTB(强毒株H37Rv、弱毒株BCG)感染细胞,应用流式细胞术检测巨噬细胞在六个时间点的凋亡情况,应用荧光定量PCR检测细胞因子TNF-α、IL-10、IL-6的转录水平,应用ELISA方法检测细胞上清液中三种细胞因子的分泌量。结果显示:BCG组和H37Rv组的早期凋亡率均显著高于对照组(P0.05)。巨噬细胞细胞因子TNF-α、IL-6的转录水平与分泌水平相符,弱毒菌株巨噬细胞凋亡情况随时间延长成上升趋势,其分泌的细胞因子TNF-α表现为相同趋势,IL-6表现为相反趋势。强毒株巨噬细胞凋亡情况低于弱毒株,细胞因子分泌情况复杂,一般表现为一种先增强后抑制的情况。本试验通过对不同时间点细胞因子与凋亡情况关系的研究为结核分枝杆菌对巨噬细胞凋亡机制提供新思路。 相似文献
2.
《中国兽医杂志》2019,(10)
为了研究非结核分枝杆菌对巨噬细胞凋亡的影响,采用胞内分枝杆菌和偶发分枝杆菌分别感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA法检测TNF-α及IL-10的表达,检测这2株菌在小鼠巨噬细胞中的增殖。结果显示:胞内分枝杆菌引起的细胞凋亡水平低于偶发分枝杆菌组(P0.05),这2株菌所引起的TNF-α的表达量在4 h、12 h较高,与空白对照组相比差异显著(P0.05),在24 h、48 h下降明显,而IL-10的表达整个感染过程都比较高。并且还观察到胞内分枝杆菌的吞噬率较高(P0.05);增殖能力较强(P0.01)。表明菌体毒力与凋亡率、细胞因子的表达、增殖率有着直接关系。 相似文献
3.
《畜牧兽医学报》2016,(6)
为研究基因A型鸭甲肝病毒(DHAV-A)MY弱毒株对雏鸭细胞因子表达的影响,阐明细胞因子在DHAV-A弱毒疫苗免疫中的作用,利用荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,检测DHAV-A MY弱毒株接种1日龄SPF雏鸭后0.25、0.5、1、2、3和5d共6个时间点肝、脾和脑组织中IFN-α、IFN-β、IFN-γ,以及IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8和TNF-α共8种细胞因子的mRNA转录水平,并结合各时间点DHAV-A的荷载量进行分析。结果表明:肝和脑组织中2d时间点以及脾组织中3d时间点病毒荷载量达到最高;三种组织中,8种细胞因子的转录水平均随着病毒荷载量的增加而升高,且在各组织病毒荷载量最高时间点,8种细胞因子的转录水平均极显著升高(P0.01),结果证明DHAV-A MY弱毒株可刺激雏鸭抗病毒细胞因子IFN-α、IFN-β、IFN-γ和TNF-α以及炎性细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6和IL-8mRNA的转录,本研究丰富了DHAV-A MY弱毒株的免疫机制。 相似文献
4.
非结核分枝杆菌与结核杆菌同属分枝杆菌属,在自然环境中分布广泛,是一种环境致病菌。本研究将分离的浅黄分枝杆菌感染C57BL/6J小鼠,应用病理切片分析肝脏的病理变化,并采用荧光定量PCR检测肝脏中细胞因子IFN-γ,IL-12b,TNF-α,IL-10,NLRP3和TGF-β表达量的变化。结果发现,肝脏组织出现少量的炎性细胞浸润,而且感染组小鼠肝脏IFN-γ,IL-12b的表达量明显高于对照组,IL-10只有微弱的表达。上述结果表明,抗浅黄分枝杆菌感染免疫反应主要以Th1免疫反应为主。 相似文献
5.
《中国预防兽医学报》2017,(10)
为研究布鲁菌侵染巨噬细胞过程中,对后者不同分化类型细胞中JAK-STAT6信号通路和细胞因子表达变化的影响,本研究利用小鼠巨噬细胞系RAW264.7,经40 ng/m L的IL-4体外作用24 h将其诱导为M2型巨噬细胞,采用细胞免疫荧光方法,检测M2巨噬细胞极化状态;通过荧光定量PCR(q RT-PCR)方法,检测布鲁菌疫苗株M5侵染不同类型(M0和M2型)巨噬细胞中JAK1、STAT6基因mRNA转录情况;采用ELISA方法检测M5侵染不同类型巨噬细胞上清中IL-10、INF-γ的表达情况。细胞免疫荧光检测结果显示,IL-4诱导24 h后,巨噬细胞表面标志CD206荧光表达量超过90%,表明巨噬细胞极化为M2型;q RT-PCR结果显示,M5侵染M0型巨噬细胞后能够引起JAK1、STAT6 mRNA转录水平持续降低,在24 h和48 h时其转录水平最低,二者差异极显著(p0.01);而M5侵染M2型巨噬细胞后,与未极化组(M0型)相比,JAK1、STAT6的mRNA转录水平增高,同时存在时间差异性,侵染8 h时,二者mRNA转录水平最高,差异极显著(p0.01)。ELISA结果显示,M5侵染巨噬细胞后,极化组(M2型)与未极化组(M0型)巨噬细胞相比,INF-γ的表达量差异不显著(p0.05),而IL-10的表达量上调且在侵染48 h达到最大值,差异显著(p0.05)。上述结果表明,在IL-4的诱导下巨噬细胞可以从未极化的M0型极化为M2型;布鲁菌M5侵染M0型巨噬细胞中JAK1、STAT6的转录水平下调,但上调M2型巨噬细胞JAK1、STAT6的转录水平并促进下游细胞因子IL-10的分泌。本研究为探究布鲁菌引起持续感染的机制研究奠定了基础,同时为布鲁菌病药物靶标开拓了新的研究方向。 相似文献
6.
IP-10作为牛结核病诊断标志物的初步探究 总被引：1，自引：0，他引：1
为评价细胞因子IL-12 p40、IP-10和TNF-α转录水平与牛分枝杆菌感染之间的关系,及其在牛结核病诊断中的应用潜力。采集田间筛选的结核病阳性牛、结核病阴性牛以及牛分枝杆菌68002人工感染牛的外周血淋巴细胞,经牛结核菌素(PPDB)、重组蛋白CFP-10-ESAT-6(CE)、MPT63、PET和PBS分别刺激6 h,提取细胞总RNA,用荧光定量PCR检测IL-12 p40、IP-10、IFN-γ和TNF-α的转录水平。结果显示结核病阳性牛的外周血淋巴细胞经PPDB和CE刺激后,其IP-10的m RNA转录水平显著高于结核病阴性牛,且与IFN-γ的m RNA转录水平具有良好的相关性;初步建立牛结核病IFN-γ和IP-10的Real-time PCR检测方法,其对临床阳性样本的检出率分别为71.45%和78.57%。因此,IP-10的m RNA转录水平与牛分枝杆菌的感染相关,有作为牛结核病诊断标志物的潜力。 相似文献
7.
小鼠IL-1β、TNF-αTaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及脑心肌炎病毒感染小鼠的检测 总被引：3，自引：1，他引：2
为探讨脑心肌炎病毒(EMCV)感染后促炎细胞因子的表达水平、从分子水平深入研究EMCV的致病机制,本研究分别建立了检测小鼠IL-1β、TNF-α和管家基因β-actin的TaqMan real-time PCR检测方法.该方法标准曲线的相关系数均达到0.998以上,检出下限均达到10 copies/μL质粒标准品,组内与组间的变异系数均小于2％.应用该方法对猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠的脑、心、脾中IL-1 β、TNF-α mRNA的转录水平进行检测,发现感染后第4d IL-1β、TNF-α mRNA的转录水平达到峰值,并且与小鼠发病死亡高峰存在明显的时间相关性.本研究所建立的TaqMan real-time PCR检测方法为小鼠促炎细胞因子的检测及定量分析提供了技术手段. 相似文献
8.
《中国预防兽医学报》2019,(1)
为了解旋毛虫ES抗原对宿主巨噬细胞NOD1受体通路的影响,本研究通过体外实验将旋毛虫ES抗原作用于小鼠腹腔巨噬细胞,观察NOD1受体及其信号通路中关键分子及相关细胞因子的表达动态。应用荧光定量PCR监测细胞内NOD1、RIP2和NF-κB m RNA的转录水平,western blot测定NOD1、RIP2、NF-κBp65、NF-κB p-p65蛋白表达量,ELISA测定细胞培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量变化。结果显示,在一定的ES抗原作用浓度和时间范围内,巨噬细胞中各目的基因的转录水平均先增高,当作用时间和作用浓度超过一定值时则开始下降,作用24 h时NOD1 m RNA转录水平显著低于对照组(p0.01);ES抗原浓度15μg/mL作用时间9 h时,巨噬细胞中NOD1、RIP2和NF-κB p-p65蛋白量显著增加(p0.01),此时巨噬细胞培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著增高(p0.01)。结果表明,旋毛虫ES抗原在一定的作用时间和浓度范围内,可以激活并调节小鼠腹腔巨噬细胞中NOD1受体通路,上调NOD1受体通路中关键分子RIP2和下游分子NF-κB的表达,可以促进细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌;并且超过一定时间和浓度的ES抗原刺激可以导致小鼠腹腔巨噬细胞出现免疫耐受。本研究证明了宿主NOD1受体参与了旋毛虫引起的宿主免疫应答,为旋毛虫病防治和理解旋毛虫对宿主的感染机制提供新的思路。 相似文献
9.
《中国预防兽医学报》2016,(12)
为研究母牛分枝杆菌感染鼠的细胞免疫应答变化,本研究将母牛分枝杆菌分离株感染C57BL/6J小鼠,通过病理组织学检查肝脏的病理变化,并采用荧光定量PCR检测肝脏中细胞因子IFN-γ、IL-12b、TNF-α、IL-10、NLRP3和TGF-β表达量的变化。结果发现,肝脏组织出现明显的炎性细胞浸润,而且实验组小鼠肝脏IFN-γ、IL-12b、TNF-α的表达量显著高于对照组,IL-10和TGF-β仅有微弱的表达。上述结果表明,抗母牛分枝杆菌感染免疫反应主要以Th1免疫反应为主。本研究为母牛分枝杆菌免疫机制研究提供实验依据。 相似文献
10.
本研究对具核梭杆菌(F.nucleatum)感染鼠巨噬细胞进行共同培养之后,分别在10个时段采取上清液和巨噬细胞,用ELISA、qRT-PCR法和扫描电镜检测TNF-α、 IL-1α、 IL-6和IL-8细胞因子,并观察巨噬细胞的超微形态变化。结果显示,4种细胞因子均有高水平表达;IL-8在共培养6～72 h呈高水平表达;IL-6和TNF-α表达水平也较高;IL-1从3 h表达,12 h达最高值,48 h后无表达。qRT-PCR检测结果显示,TNF-α的RNA表达呈波浪式,分别于6,60 h各出现1个高峰值;IL-1α和IL-6呈现正态表达,从3 h开始明显表达至60 h达峰值,此后缓慢下降;IL-8从6 h逐渐上升,至72 h仍呈高水平表达。超微形态观察显示,在F.nucleatum感染的前24 h,巨噬细胞呈收缩状,其表面和周围有大量发育良好F.nucleatum,并呈团块状黏附,巨噬细胞逐渐伸出伪足。30 h后F.nucleatum逐渐发育不良,小而细,而巨噬细胞表面粗糙,有许多大小不一的结节,伪足变粗大。48 h巨噬细胞表面出现胞吐孔,少量细小的F.nucleatum仍然黏附于... 相似文献
11.
饲料加工厂的内部会孳生虫害,因为饲料厂内存在着促使虫害发生的条件.在冬季,饲料加工厂可为害虫提供暖和的环境、食物(尤其是生的和加工过的谷物)和水.这些仓储害虫可对饲料的安全性和质量带来多重危害.饲料厂要有效地执行"危害分析与关键控制点方案(HACCP)",那么虫害管理是一个必不可少的先决条件.鉴别出厂内害虫种类和数量,是制订虫害管理方案的首要步骤. 相似文献
12.
采用随机区组设计,以20个紫花苜蓿品种作为研究对象,对头茬草在现蕾期、初花期、盛花期取样,分别测定了各生育期的粗蛋白、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维、粗脂肪、粗灰分含量。结果表明:同一紫花苜蓿材料的营养成分含量在不同生育期差异显著(P0.05),在现蕾期、初花期、盛花期等不同生育期,粗蛋白含量最高的品种分别为:北极星(22.06%),哥萨克(18.81%),陇东苜蓿(16.41%);酸性洗涤纤维含量最低的品种分别为:甘农1号(22.18%),陇中苜蓿(31.16%),苜蓿王(36.97%);各生育期中性洗涤纤维含量最低的品种分别为:甘农7号(27.59%),苜蓿王(38.10%),苜蓿王(44.35%);粗灰分含量最低的品种分别为:陇东苜蓿(9.40%),皇后(9.00%),甘农8号(6.02%);粗脂肪含量最高的品种分别为:中苜1号(2.91%),哥萨克(2.78%),甘农7号(3.04%)。粗蛋白含量和粗灰分含量随着生育期的推进明显下降;中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量随着生育期的推进呈明显上升趋势;粗脂肪含量随着生育期的推进出现小幅上升。苜蓿王各营养指标在不同的生育期表现最好,在武威地区的黄羊镇有较高的推广利用价值。 相似文献
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Desrosiers R 《Animal health research reviews / Conference of Research Workers in Animal Diseases》2011,12(1):1-13
There seems to be two main types of pathogens that cause diseases in swine: those that are mainly introduced through direct pig contacts, and those that are often, and in some situations mainly introduced by indirect transmission means. In this review, the mange mite (Sarcoptes scabiei), toxigenic Pasteurella multocida and Brachyspira hyodysenteriae will be used as examples of the first type, and foot and mouth disease virus, Mycoplasma hyopneumoniae and porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus as examples of the second. It is now clear from various epidemiological studies as well as experimental and field data that aerosol transmission of some swine pathogens plays an important role in their epidemiology. As previous biosecurity programs did not take this factor into consideration, it can at least partially explain why many of these programs suffered frequent failures and why air filtration is now becoming increasingly popular in North America. Identifying and quantifying transmission means should be a priority for every important infectious disease for which it has not been done. 相似文献
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施氮对紫花苜蓿生长特性的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
通过随机区组试验,研究了不施氮(N0)、施氮51.75kg/hm2(N1)和103.5kg/hm2(N2)3个氮水平对"甘农3号"紫花苜蓿生长第1年及第2年产量和再生性能的影响。结果表明:"甘农3号"紫花苜蓿生长第2年产量显著高于第1年,在N2处理下两年干草产量均最高,第1年为14 717kg/hm2,第2年为31 092kg/hm2;从株高和再生速度看,两年均以处理N2下紫花苜蓿的再生性能最强,并且第2年的明显优于第1年。综上,试验区"甘农3号"紫花苜蓿在N2处理下再生性能最好,株高和产量达最高,且两年均能进行4次刈割。 相似文献
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不同时期毛苔草对不同水文情势的生长响应研究 总被引：2，自引：2，他引：0
通过幼苗移植、水位控制试验,研究毛苔草对不同水文情势的生长响应,以及不同水文经历下的响应差别。结果表明,毛苔草对不同水文情势及水文经历存在显著生长响应。毛苔草地上、地下以及根茎生物量均在干湿交替条件下最大;鲜重根／茎随水分的增加而降低,干重根／茎则总体上随水分的增加而升高;根茎生物量比重在干旱处理下最大。不同水文经历的毛苔草,其生物量以有干湿交替经历的较大,根／茎及根茎占总生物量的比重则以经历干旱处理的较大;淹没水文情势下,毛苔草生长缓慢,但淹没抑制消除后,其生长过程可以通过根茎萌发得以延续。各生长指标极值的出现,要求在不同的生长阶段提供其所需的水文条件。在湿地恢复与管理过程中,针对生长季内优势植物水文需求的变化,采取不同的水文措施,有助于达到最佳的恢复及管理目标 相似文献