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珍稀濒危鸟类微量取样及DNA提取的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
为解决珍稀濒危鸟类分子生物学研究中存在的取样局限性,采用非伤害性取样和非损伤性取样,对大鸨10~70μL的血液和羽毛的不同部位(羽根、羽髓、羽鞘、实心羽茎和羽毛上脐周围绒羽)的DNA提取进行了研究。结果表明,鸟类血液样本与哺乳动物样本极为不同,两者相同体积的血液中,鸟类样本DNA含量是哺乳动物样本的几百倍,研究发现,大鸨可以从微量的血液中(10μL)提取出较多的DNA(45.75μg)。对于羽毛的不同部位,羽髓、羽鞘和羽根可以提出一定纯度的核DNA和mtDNA;实心羽茎可以提出一定纯度的mtD-NA。因此该研究将拓宽珍稀濒危鸟类采样的范围,为珍稀濒危鸟类的分子生物学研究提供了更广阔的样品来源。 相似文献
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褐马鸡是中国特有的国家Ⅰ级保护濒危鸟类,为了解决野生褐马鸡分子生物学研究中存在的取样局限性,采用非伤害性取样和非损伤性取样,对褐马鸡微量血液、皮、脚垫、指甲、羽毛、陈旧标本的皮以及粪便的DNA提取进行了初步研究。结果表明,从褐马鸡微量血液（10μL）中可以提取到浓度和纯度高的基因组DNA（41.85μg）;从褐马鸡的皮、脚垫、指甲、羽毛中可以提取出基因组DNA并扩增出目标片断;陈旧标本的皮能够提取到基因组DNA。该研究将拓宽褐马鸡分子生物学研究的采样范围,并可以提高野外非损伤性取样在保护遗传学中的应用。 相似文献
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《养禽与禽病防治》2006,(11)
1马立克氏病与羽根的病毒基因组繁殖时间过程之间的关系从一个白色来航鸡商品杂交系的三个公鸡系取114只公鸡,在21日龄时分别与接种过MDV RB-1B株的鸡接触感染。通过检测羽毛根、羽髓和MDV抗体表明所有试验鸡只均受到MDV感染。在接触后(dpe)12天时即观察到第1只病毒阳性鸡,在27dpe时检测率达到高峰,随后检测率下降。到80dpe试验结束时,存活鸡(82%)的羽髓中未检测到病毒DNA。因MD引起的鸡只死亡首见于27dpe,到试验结束时有18%试验鸡死亡,其病变主要在脾脏。有MD病变的鸡脾脏提取物中的病毒基因组滴度与其死亡时间呈负相关,并且没有一… 相似文献
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一、羽毛的毛型分类及其特性羽毛是禽类皮肤特有的衍生物。根据羽毛的生长部位以及形态不同,鹅鸭羽毛一般可分为羽片、绒子、大翅及各种亚型毛和亚型绒等。一个完整的正羽,由羽根、羽轴、羽片三部分构成。羽根是具有椭圆形的横切面,羽根向外延伸部分为羽轴,每条羽轴上长着成平面的两张羽片,这种羽片由许多羽支和羽小支购成。 相似文献
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对血液中提取基因组DNA的方法加以改进,获得了一种提取猪肾组织中DNA的有效方法.试验表明,利用SDS裂解,氯仿、异戊醇抽提母猪肝脏中基因组DNA,得到的DNA纯度较高,可用来进一步进行RAPD分析和PCR扩增,用于各种分子生物学实验. 相似文献
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为了建立一种适合禽类血液的廉价、高效、通用的基因组DNA提取方法,试验采用鸡、鸭、鹅、鸽、火鸡、麻雀6种禽类血液为材料,提取的禽类血液DNA经微量分光光度计分析、基因组DNA凝胶成像分析以及PCR扩增效果检测。结果表明:提取的6种禽类血液DNA质量较好(OD260/OD280值范围为1.80~1.84,OD260/OD230值范围为2.21~2.30),基因组DNA电泳主条带和PCR扩增产物条带清晰、整齐、无拖带。说明本方法能够完全适用于大批量禽类血液基因组DNA的提取,且DNA纯度较好,满足后续相关分子生物学试验要求。 相似文献
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为确定一种稳定高效的鸡血液DNA提取方法,满足基因组检测对DNA的要求,研究应用磁珠法、酚-氯仿法和试剂盒法。分别对抗凝血和凝血状态的鸡血液样品进行基因组DNA提取,通过超分光光度计和1%琼脂糖凝胶电泳评价所获得的DNA质量,并对三种提取方法所需成本进行估算和比较。结果显示：三种方法均能从两种不同状态血液样本中提取出基因组DNA,酚-氯仿法最为经济,但耗时长且需要使用危险化学品,磁珠法与试剂盒法具有耗时短和环保的优点,且磁珠法较试剂盒法更经济。研究表明磁珠法使用的试剂量少、操作简单、耗时短、日提取样本数目远大于其他两种方法,是三种方法中最为快捷的方法,可以满足实际生产中大批量鸡血液基因组DNA提取的要求。 相似文献
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鹅血液基因组DNA的简单快速提取方法研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究针对家禽血液红细胞有细胞核的特点,研究适合鹅血液基因组DNA的廉价、简便、快速的DNA提取方法,并为其它禽(鸟)类相关操作提供参考。通过裂解细胞,利用简便快速的操作方法将蛋白质和核酸分离,去除杂质,沉淀核酸,获得大量基因组DNA,并通过基因扩增检测其质量和效果。该方法提取的基因组DNA电泳检测条带明量,无拖尾,含量及纯度均较高,能够用于分子生物学实验研究。与传统的酚-氯仿DNA抽提方法相比,本实验建立的血液基因组DNA提取方法具有成本低、操作步骤简便和快速的特点,特别是对大量样品的提取更为实用。 相似文献
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为建立双向电泳方法研究鸡羽髓蛋白组学,以进一步了解病毒与宿主相互作用的新机制,从SPF鸡羽根挤出羽髓,提取其中蛋白进行双向电泳,并对不同裂解液、IPG胶条pH值范围、一向等电聚焦条件、二向SDS-PAGE凝胶浓度等影响因素进行优化.结果显示,采用17cm,pH 5～8 1PG胶条,400μg羽髓蛋白进行的双向电泳,图谱用PDQuest8.0.1分析,可分辨的蛋白点约为700左右,不同样本间的匹配率大于80%.可见,本研究建立的双向电泳方法分辨率及重复性均较高. 相似文献
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本文应用琼脂扩散试验(AGP)对两组54和32只鸡的三种样品进行了鸡白血病病毒gs抗原的检测。两组卵清、羽髓和血液的检出率合计分别为50%、33.7%和19.8%。两组羽髓与血液的阳性符合率均为100%,而且羽髓还可以从血液阴性中分别检出阳性11.1%(5/45)和29.2%(7/24),羽髓阳性分别是血液的155.6%(14/9)和107.5%(15/8)。两组卵清与羽髓的阳性符合率分别为92.9%(13/14)和66.7%(10/15),而且卵清还可以从羽髓阴性中分别检出阳性20%(6/40)和70.6%(12/17),卵清阳性分别是羽髓的150%(21/14)和146.7%(22/15)。此外,还对卵清一次与三次冻融的符合情况进行了比较,阳性符合率分别为g4.1%(16/17)和95.5%(21/22)。结果是卵清敏感性高于羽髓,羽髓敏感性高于血液,卵清样品一次冻融即可。 相似文献
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为了探讨苯酚/氯仿抽提法中加入血液和红细胞裂解液(PBS)的量对DNA提取效果的影响以及找到针对牛血和鸡血最合适的DNA提取条件,试验以安格斯牛和静原鸡为研究对象,采用苯酚/氯仿抽提法提取血液基因组DNA。结果表明:在试验第1步加入200μL鸡血1次,用1 500μL PBS重复裂解2次,可以得到高质量鸡的基因组DNA。当加入鸡血的量过大时,提取的DNA浓度过高且不纯,蛋白质等外源核酸的污染较严重。在试验第1步加入500μL牛血1次,用1 500μL PBS裂解,重复2次,可以得到高质量牛的基因组DNA。苯酚/氯仿抽提法可以节省时间,还可以避免血液的浪费。 相似文献
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本试验采集蒙古马新鲜粪便样品,采用酚－氯仿抽提法和2种细菌基因组DNA提取试剂盒法进行样品中细菌基因组DNA的提取。通过DNA浓度和纯度的测定,并将其作为模板扩增细菌16S rDNA V3区特异性片段对提取效果进行比较,从而找出更适合蒙古马粪便中细菌基因组DNA的提取方法。结果显示,3种提取方法得到的基因组DNA均能用于PCR扩增的模板,其中B试剂盒法提取的DNA数量较多,且纯度高,更适合用于提取蒙古马肠道微生物细菌基因组DNA及后续的蒙古马肠道微生物多样性等分子生物学试验。 相似文献
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本人在实践中试用羽根管埋植法治疗鸡皮下气肿,其法简单易行,一次可愈,且不需任何药物,效果较好。施术方法:1.在主、副翼羽中拔下一根羽毛,用剪刀剪掉羽根管端部、剔除羽根管髓,使其形成畅通管道,剪口应形成马耳形(如注射针头状),长1～1.5厘米。2.视气肿程度决定施术部位,一般在气肿部位上方,以利空气逸出为原则。如属严重气肿,且气肿已达背部时,可选背部稍下一些的部位,约肋端三分之一处施术;如属一般气肿,可选去势创口偏前、偏上处的气肿边缘。3.确定施术部位后,在预定施术点拔掉一根羽毛,将剪制好的羽根管之尖锐部对准羽孔插入,空气即随之逸出。一般术后无需拔除羽根管及进行特殊治疗,羽根管可自行脱落而告痊愈。 相似文献
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<正> 前言用组织病理学方法,检查15—35周龄患马立克淋巴瘤鸡的羽髓,发现92.2％羽髓有淋巴细胞增生症(T—型),在病鸡的全身羽毛中都出现T—型羽髓病变(FPL),但羽髓近端常见。某些淋巴细胞增生性病变(T—型FPL)能退化成炎症,炎症由坏死组成,或是正常组织结构细胞减少、水肿和小淋巴细胞、浆细胞、异嗜细胞浸润。退 相似文献
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鸡羽虱为鸡的永久性寄生虫。寄生于鸡的体表羽毛中,以吸食血液为主,使鸡发生奇痒而骚动不安。因啄痒而伤及皮肉、羽毛脱落、食欲不佳、消瘦,严重影响鸡的生长发育,甚而造成抵抗力减弱和产蛋率下降。 相似文献