禽鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因N端区的克隆与表达     

袁吉磊  何诚  蒋毅  凌勇  杨君敬  张发明  李应超  陈曦 《中国农业大学学报》2010,15(1):62-66

为探讨禽鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因的生物学功能,本实验根据禽类鹦鹉热嗜性衣原体Cal-10株全基因序列设计引物,用PCR法扩增禽嗜性衣原体PmpD基因N端区,将特异性目的基因片段克隆入PBS-TII载体,经测序后确认为目的基因,并提交GenBank。试验扩增的禽鹦鹉热嗜性衣原体Cal株PmpD基因与禽鹦鹉热衣原体6BC株的PmpD基因和氨基酸序列的相似性均达99%,与流产衣原体成员嗜流产衣原体S26/3株、嗜豚鼠衣原体(GPIC)、嗜猫衣原体(Fe/C-56)核苷酸相似性分别为89%、82%和77%。PmpD基因N端区基因亚克隆到pET-32a(+)载体上,重组表达载体转化BL21(DE3)表达宿主菌,以IPTG诱导该重组菌,结果表达了约63 ku大小的融合蛋白;分别用禽鹦鹉热嗜性衣原体多克隆抗体、猪、羊流产嗜性衣原体多克隆抗体与表达出的重组蛋白进行Western blotting检测,结果表明该蛋白与禽源衣原体多克隆抗体呈阳性反应,与猪、羊源衣原体多克隆抗体呈阴性反应,显示该重组蛋白具有种属特异性。本研究首次表达了禽类鹦鹉热嗜性衣原体PmpD基因的N端区的重组蛋白,为进一步研究其生物学功能提供依据。  相似文献   

肺炎衣原体感染和检测   总被引：3，自引：0，他引：3  

许香广  李涛  张国良 《湛江医学院学报》2003,21(3):297-299

肺炎衣原体是 1989年正式命名的一种病原体。已知衣原体科 (Family)只有一个属 (Chlamydia) ,该属迄今发现共有 4个种 (species) :沙眼衣原体 (Chlamydiatrachomatis)、鹦鹉热衣原体 (C .psittaci)、肺炎衣原体 (C .pneumoniae)和牲畜衣原体 (C .Pecorum )。前 3种衣原体对人类有致病性。肺炎衣原体 (Cpn)对人类的致病性非常广泛[1 ] 。文献报道有呼吸系统的咽喉炎、哮喘、支气管炎和肺炎等 ;心血管系统的心肌炎、心内膜炎、动脉硬化和冠心病等 ;其它系统如有虹膜炎、肝炎、脑膜炎、结节性红斑和关节炎等。急性感染和慢性感染率均高 ,特…  相似文献   

流产嗜性衣原体1B株pomp18基因β折叠区的克隆与表达     

杨君敬  凌勇  何诚  秦秀慧  栗绍文  袁吉磊 《中国农业大学学报》2009,14(1)

为探索POMP18蛋白的生物学功能、揭示其在流产衣原体病诊断和防治中的作用,本试验依据流产嗜性衣原体S26/3株全基因序列设计引物,用PCR法扩增流产衣原体pomp18基因β折叠区,将特异性扩增片段克隆入pMD18-T载体,测序比较分析序列后确认为目的基因,提交GenBank(Accession EU326104).与GenBank中流产嗜性农原体S26/3株的pomp18基因和氨基酸序列的相似性均达99%,与其他各型衣原体代表株的相似性为79%～80%.将pomp18基因β折叠区亚克隆到pET-32a(+)表达载体上,重组表达载体转化BL21(DE3)表达宿主菌,以IPTG诱导该重组菌,结果显示该重组菌表达了59 kD大小的融合蛋白;用羊流产嗜性衣原体多克隆抗体对表达的重组蛋白进行Western blotting试验,结果显示该重组蛋白具有免疫原性.本研究首次克隆、表达了流产衣原体pomp18基因β折叠区,原核表达获得了59 kD重组蛋白,为进一步探讨其生物学功能奠定基础.  相似文献   

鹦鹉热嗜衣原体PCR检测体系的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

柳陈坚  龚福明  蔡燕  李海燕  张忠华 《上海交通大学学报(农业科学版)》2009,27(6):554-560

鹦鹉热是由鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,C. psittaci)引起,并可由带病鸟类传染给人类的一种人畜共患传染病.虽然有巢式PCR和多重PCR被开发用于C.psittaci的检测,但是这些方法较为繁琐.本研究应用了32株衣原体和嗜衣原体菌株,24株来自鸟类及人的肠道与呼吸道的细菌菌株,此外还使用606个禽鸟粪便、泄殖腔棉拭子及人体气管分泌物的临床样本.笔者以C.psittaci的MOMP基因(major outer membrane protein gene)为靶基因而开发了PCR检测方法.该最低能检测到100fgDNA(相当于10个衣原体)相当的鹦鹉热嗜衣原体.该靶基因区域涵盖了除C.pneumoniae、C.pecorum、C. trachomatis、C.suis和C.muridarum以外的鹦鹉热嗜衣原体所有的菌株及其他部分嗜衣原体菌株.606例临床样本中有29例鸟类粪便样本、25例泄殖腔棉拭子样本和2例人源样长检测为阳性.结果表明,该PCR检测法是检测鸟源鹦鹉热嗜衣原体的快速、敏感、有效的方法.  相似文献   

羊流产衣原体的PCR检测方法研究     

张莉  王英珍  鄢明华  李秀丽 《天津农业科学》2009,15(2):14-16

根据羊流产衣原体16SrRNA基因保守序列,设计合成一对引物,通过优化PCR反应条件,成功地扩增出预期的523bp片段,而沙眼衣原体、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及健康鸡胚的卵黄囊膜均未扩增出相应的片段。敏感性试验表明,该体系可检测到2pg的衣原体DNA。  相似文献   

禽衣原体病的防治     

黄生莲  王学红  李芝姐  许生仓  王光华 《中国畜禽种业》2010,6(1):26-26

<正>1病因禽衣原体病是由嗜性鹦鹉热衣原体感染禽类而引起的一种疾病。目前该病被称为"鹦鹉病"或"鹦鹉热",该病最早被认为与鹦鹉以及与这些鹦鹉接触的人相关联。后来发现非鹦鹉类也是衣原体病原的自然宿主。禽衣原体病是一种全球性疫病,几乎所有的禽种均可自然感染衣原体。本病一年四季均可发生,饲养管理不良可以促进本病的发生。  相似文献   

青海省互助县牛衣原体病的血清学调查     

《天津农学院学报》2017,(4)

牛衣原体病是由流产嗜性衣原体所引起牛的一种地方性传染病,主要症状包括发热、怀孕母牛繁殖障碍、肺炎、肠炎、多发性关节炎和脑脊髓炎等。流产嗜性衣原体可感染羊和与之密切接触的人,是一种重要的人畜共患病病原。本研究对青海省互助县12个采集点共765份送检血清采用间接血凝试验(IHA)检测衣原体抗体。结果发现,阳性检出率为26.1%(200/765);其中牦牛血清阳性检出率为32.3%(20/62);乳牛血清阳性检出率为25.6%(180/703)。调查结果显示,该地区养殖场的乳牛和牦牛均存在有不同程度的衣原体感染。这些数据为该地区牛衣原体病防制提供了参考依据。  相似文献   

四川地区猪群中鹦鹉热衣原体的分离及鉴定     

刘宗秀  李继祥  曹三杰  文心田 《四川农业大学学报》2000,18(3):201-204

用鸡胚分离法成功地从四川地区的猪群中分离出 5株鹦鹉热衣原体。用血清学试验 ,药敏试验 ,碘染试验 ,电镜检查 ,动物致病性试验等方法对 5株衣原体进行鉴定。试验表明 :5株衣原体均对青霉素、四环素敏感 ,对磺胺嘧啶不敏感 ;碘染试验均为阴性。 5株衣原体抗原分别能与标准阳性血清反应。电镜观察 5株衣原体均有大小两种颗粒 (即网状小体RB和原生小体EB) ,具有与标准株衣原体相同的结构。结果表明 :本研究分离的 5株衣原体均为鹦鹉热衣原体  相似文献   

一起猪衣原体病的诊疗报告     

《中国畜禽种业》2017,(8)

猪衣原体病是由鹦鹉热亲衣原体中某些菌株引起的一种慢性接触性传染病,该病的发生会对新生仔猪、母猪以及公猪均产生严重影响,在大型养殖场中,猪衣原体病的发生会造成较大的经济损失,造成病情的不断传播,因而应及时采取措施对其进行防治。本文介绍一起猪衣原体病的诊疗过程,通过基本情况分析、猪衣原体病的临床症状表现、实验室检查、病理检查以及预防措施等方面对该起病症进行阐述。  相似文献   

邓州市奶牛衣原体病血清学调查     

唐清军 《中国畜禽种业》2018,(7)

为了初步掌握衣原体病在河南邓州市奶牛群的感染情况,本试验于2017年6~9月对该地区6个奶牛场共390份血清样品进行实验室检测,为该病的防治提供借鉴。结果显示,112份奶牛血清样品检测为衣原体病阳性,平均阳性率为28.71%,规模化奶牛场阳性率低于散养场,分别为20.42%和42.0%;不同生长发育阶段奶牛阳性率存在一定差异,其中以经产奶牛阳性率最高,为34.82%,后备青年牛次之,为22.53%,犊牛最低,为8.33%。表明该地区奶牛衣原体病流行情况较严重,需引起养殖户的重视。  相似文献