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相似文献
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1.
提取基因组DNA是开展芍药分子生物学研究中一项最为基础的工作。本研究通过常规CTAB法和近几年应用较为普遍的试剂盒法,对芍药基因组DNA进行了提取,并对2种方法所提取的DNA进行了浓度、程度、琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增比较。结果表明,常规CTAB法提取的DNA浓度较高,为128.08-253.63 ng/ul,但纯度较低,而试剂盒法提取的DNA虽平均浓度较低,为3.51ng/ul,但纯度较高;电泳和PCR结果均表明,试剂盒法提取的DNA能扩增出目的片段,是较好的一种提取方法。  相似文献   

2.
以绿绒蒿属(Meconpsis Vig.)3种植物叶片为试材,采用研钵手动研磨和电动匀浆马达研磨器2种研磨方式处理叶片,采用改良的CTAB法、国产天根试剂盒、德国Qiagen试剂盒法3种提取方式从绿绒蒿属植物叶片中提取DNA,研究了不同提取方式对绿绒蒿属植物DNA提取效果的影响,以期为绿绒蒿属植物的分子遗传学研究奠定基础。结果表明:几种不同提取方法均能获得较为完整的DNA,研钵手动研磨的植物叶片提取的DNA无论是从质量、纯度还是得率均好于电动匀浆马达研磨器研磨。3种提取方式提取的DNA均可直接用于下游PCR反应,改良的CTAB法提取的DNA纯度和得率均很高;天根试剂盒法和Qiagen试剂盒法提取的DNA得率不高;Qiagen提取的DNA纯度和质量均比较好,但成本较高。  相似文献   

3.
为选择一种快速、简单、有效的山楂总DNA的提取方法,分别应用改良CTAB法、改良SDS法和QIAGEN试剂盒法提取山楂幼嫩叶片的总DNA,用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和RAPD对所提取的总DNA进行检测。QIAGEN试剂盒法简单省时,提取的山楂总DNA产量高、纯度高、杂质少、DNA碎片少。以该法提取的总DNA为模板进行RAPD扩增,谱带清晰,多态性、稳定性、重复性好。QIAGEN试剂盒法是较为理想的山楂总DNA提取方法,该法提取的总DNA适用于PCR扩增和其他分子生物学研究。  相似文献   

4.
石蕊 《北方园艺》2007,(4):203-205
以不同梨品种为材料,分别采用改良CTAB法、改良SDS法、SDS-CTAB和高盐低pH值法对梨基因组DNA进行了提取.结果表明:采用改良CTAB法在提取各种梨基因组DNA过程中表现最好且纯度最高;SDS法提取的基因组DNA产率最高,但纯度较低;高盐低pH值法产率和纯度均最低.  相似文献   

5.
一种快速提取南瓜大群体基因组DNA的方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
基因型鉴定是作物分子标记辅助育种和基因功能遗传分析中十分重要的环节,此项技术的应用正日渐频繁,因而迫切需要一种高通量筛选的方法。本试验以南瓜中筛选到的互补型SSR引物为验证手段,在种子阶段比较了钻孔法和萌芽法采用碱煮法提取DNA的效果,并且在成熟植株阶段验证了各组织部位采用碱煮法提取DNA的效果。结果表明:使用萌芽的南瓜种子根尖以碱煮法提取DNA是可用于种子纯度测定的快速方法;成熟植株各部位采用碱煮法提取DNA均可用于植株基因型筛选。  相似文献   

6.
不同方法提取野生荔枝基因组DNA效果的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
以广东、广西地区的3个野生龙眼的幼嫩叶片为试材,采用SDS法、常规CTAB法和改良2× CTAB法提取荔枝叶片基因组DNA,比较研究从富含多酚、多糖和色素等次生代谢物质的野生荔枝叶片中获得高质量DNA的提取方法.结果表明:采用改良的2×CTAB法提取的荔枝叶片基因组DNA纯度最高、质量最佳,可直接用于荔枝叶绿体DNA trnL-F基因的PCR扩增分析,且扩增后条带清晰.表明改良的2×CTAB方法获得的DNA纯度和产率较高,符合进行野生分子标记的实验要求.  相似文献   

7.
核桃内果皮RNA提取方法研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
唐燕  徐龙  王新建  张锐 《北方园艺》2012,(12):117-119
以核桃果壳硬化期的内果皮为试材,针对核桃内果皮木质化程度高且富含多酚多糖的特点,比较CTAB法Ⅰ、CTAB法Ⅱ和试剂盒3种方法提取核桃内果皮RNA的效果。结果表明:3种方法提取的RNA均可见3条带。CTAB法Ⅰ提取的RNA略微拖带,OD_(260)/OD_(280)为1.540,RNA产率为75.9μg/g,RNA完整性差,质量低;CTAB法Ⅱ的RNA图谱较完整,但亮度较弱,OD_(260)/OD_(280)为1.801,产率为86.1μg/g,但RNA提取过程耗时太长;试剂盒法提取的RNAOD_(260)/OD_(280)为2.055,RNA产率96.4μg/g,RNA图谱清晰、稳定、明亮,证明得到的RNA多糖及酚类等去除较彻底,纯度、完整性和产率均较高。因此,应用复杂植物总RNA提取试剂的试剂盒法可获得高质量与高产率的核桃内果皮总RNA,完全满足后续分子生物学研究。  相似文献   

8.
采用改良CTAB法、改进的高盐SDS法及两种植物基因组DNA提取试剂盒法等4种方法提取菊芋基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测。结果表明,改良CTAB法优于其他3种方法,提取的DNA质量较好、纯度较高,能够满足ISSR-PCR扩增要求。  相似文献   

9.
南瓜DNA提取方法比较分析   总被引:1,自引:1,他引:0  
DNA提取是基因克隆、PCR扩增、分子杂交以及遗传多态性分析等实验的基础。Whatman FTA卡已广泛应用于DNA的保存和提取,具有简便和高效的特点。采用煮沸法和FTA法分别提取南瓜(Cucurbita moschata Duch.)根、茎、叶DNA,以常规CTAB法为对照,以期寻找一种简便快捷的DNA提取方法。结果表明,CTAB法适用于南瓜各组织部位的DNA提取,DNA质量最高,PCR扩增的条带清晰,亮度高,但实验操作也最复杂;用煮沸法从叶片中提取的DNA质量相对较好,从根和茎提取的DNA不宜用于PCR反应,实验操作相对简单;FTA法提取的DNA质量较好,PCR扩增的条带清晰,亮度较高,实验操作最简单,是一种最佳的DNA简化提取方法。  相似文献   

10.
为筛选一种快速、简便且可获得高质量辣椒DNA分子的提取方法,比较了用SDS法和CTAB法提取辣椒总DNA的效果.研究结果表明,SDS法提取的DNA产率高于CTAB法,而CTAB法在纯度上高于SDS法,2种方法在2个品种上的效果一致.  相似文献   

11.
辣椒叶片基因组DNA提取方法的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
本项研究采用SDS法、CTAB1法、CTAB2法及CTAB3法对辣椒叶片基因组DNA进行提取,通过琼脂糖凝胶电泳法与紫外吸收检测法对DNA的纯度进行检测。试验证明几种提取方法均能提取出辣椒叶片的基因组DNA,其中CTAB3法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测得到一条迁移率很低的整齐清晰的DNA条带,所提取DNA的质量和纯...  相似文献   

12.
越橘基因组DNA的快速提取及分析   总被引:4,自引:0,他引:4  
为了从富含多酚、多糖及色素的越橘叶片中提取适用于分子生物学研究的高质量基因组DNA。以越橘幼叶为实验材料,比较了CTAB、SDS、高盐低pH值3种提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、RAPD-PCR、酶切等方法对获得的DNA进行了分析,结果表明,快速CTAB法所提取的DNA产量高、质量好,完全能够满足RAPD、PCR等分子生物学实验的要求。  相似文献   

13.
采用经过改良的SDS法和CTAB法对不同品种花椒进行基因组DNA提取,用核酸蛋白分析仪测量DNA浓度,将提取的基因组DNA进行ISSR分析,以期找到一种提取花椒总DNA提取的最优方法。结果表明:改良的CTAB法更适合花椒基因组DNA的提取,CTAB法比SDS法提取的DNA纯度好,所获得DNA样品的OD260/OD280比值在1.8~2.0范围内,琼脂糖凝胶电泳图谱显示条带清晰。  相似文献   

14.
不同方法提取牛心朴子基因组DNA效果的比较研究   总被引:2,自引:1,他引:1  
贝盏临  张欣  杜进  罗禄军 《北方园艺》2011,(18):135-137
以牛心朴子的叶片、茎段、根为试材,采用改良的CTAB法Ⅰ、CTAB法Ⅱ和SDS法对其进行了基因组DNA提取效果的比较分析.结果表明.CTAB法Ⅰ从3个部位都能提出较高浓度的DNA,电泳条带完整清晰;CTAB法Ⅱ从3个部位都能提出DNA,条带明亮,但有明显拖尾现象;SDS法从叶片中能提出较高的DNA,但从茎和根中所提的DNA含量较小,电泳条带暗;3种方法所提的DNA其RAPD扩增效果以CTAB法Ⅰ最好,CTAB法Ⅱ次之,SDS法最差.叶片提取的DNA平均纯度、浓度和得率为最高,RAPD扩增效果最好,茎次之,根最低.说明CTAB法工是牛心朴子DNA的高效提取方法,不同部位以牛心朴子叶子提取的DNA得率高,扩增效果最好.  相似文献   

15.
银杏RNA的提取   总被引:19,自引:0,他引:19  
采用CTAB法提取银杏叶的RNA,结果表明:抽提的RNA经电泳检测,可见28SrRNA和18SrRNA两条主带;紫外吸收值测量,A260/A280接近2.0;反转录合成的cDNA经RAPD扩增,出现清晰的条带,这些说明提取的RNA纯度高,质量好。此方法简便易行,成本也较低,适合于富含多糖、多酚植物材料的RNA提取。  相似文献   

16.
香蕉种质资源的AFLP鉴别与分类中DNA模板的制备   总被引:19,自引:1,他引:18  
在运用AFLP技术进行香蕉种质资源的鉴别与分类时,成功的关键之一是HMW基因组DNA的成功制备和避免降解,为了获得高纯度的HMW香蕉模板DNA和清晰的AFLP指纹图谱,以粉蕉为试材进行了用不同方法从不同植物体部位提取香蕉DNA的研究。结果表明,以香蕉未展开的幼叶、成熟叶、新根为材料提取的DNA量足以进行AFLP分析,但考虑到取材的方便性,最好选用未展开的幼叶或成熟叶;用改进后的SDS、CTAB法均可以获得HMW基因组DNA和AFLP指纹图谱,SDS法(用氯仿异-戊醇溶液抽提3次)提取的DNA量将近是CTAB法提取的DNA量的2倍,但SDS法提取的DNA纯度不如CTAB法提取的高。两种方法提取的DNA片段大小一致,大约在16kb左右。  相似文献   

17.
分别采用SDS法、CTAB法及碱裂解法对甜菜干种子基因组DNA进行提取.并利用1%琼脂糖判断DNA的纯度,λDNA判断DNA的含量,结果表明,SDS法和CTAB法提取的甜菜基因组DNA含量较高,提取的DNA总量接近,碱裂解法提取的DNA含量较低。3种方法提取的DNA均能够满足SSR—PCR的要求,并且扩增务带没有差异,由于碱裂解法提取DNA快速和简单,因此适合大群体DNA的提取及对模板要求不高的PCR反应中,而SDS法及CTAB法适合一次性大量提取甜菜基因组DNA以及对于DNA纯度要求较高的PCR反应中。  相似文献   

18.
徐美隆  章雨  倪细炉 《北方园艺》2011,(15):172-174
针对葡萄组织中多酚、多糖类物质含量较高的特点,对比研究了利用植物总DNA提取试剂盒和改良CTAB法提取葡萄总DNA.结果表明:改良的CTAB法能够从不同葡萄品种和不同生长时期的叶片中获得高质量、完整性好的总DNA,其OD260/OD260介于1.7~1.9之间,无降解现象,RNA去除干净,完全适于进行PCR和酶切等研究.  相似文献   

19.
以南瓜、蜂蜜为主要原料,经选料、预处理、软化、打浆等生产工序,添加各种辅料进行配方,采用正交试验设计,确定南瓜保健饮料生产的最佳配方和工艺条件。结果表明:复合稳定乳化剂的最佳组成为单甘酯0.06%,蔗糖酯0.06%,海藻酸钠0.10%,CMC-Na0.10%。饮料的最佳配方为南瓜汁30%,蜂蜜6%,豆奶粉1.0%,柠檬酸0.03%。  相似文献   

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