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1.
Pti基因不但在植物的抗病信号传导中起着非常重要的作用,而且玉米中一个类Pti1基因——ZmPti1还参与了植物抗盐的信号传递。为了研究ZmPti1 在植物体内亚细胞水平上的分布情况,利用绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因,分别构建了以35S 为启动子表达ZmPti1-GFP 融合蛋白和GFP游离蛋白的植物表达载体pGreen0029-35S∷ZmPti1-GFP 和pGreen0029-35S∷GFP, 通过花浸蘸法转入拟南芥中进行过量表达。在共聚焦激光扫描显微镜下观察ZmPti1在植物细胞中的定位。研究结果表明: ZmPti1是一个可溶性蛋白,定位在细胞质内。 相似文献
2.
棉花耐盐相关基因GhVP的表达及功能分析 总被引：3，自引：2，他引：1
为了研究Gh VP基因在棉花中的表达特性和功能,克隆了棉花Gh VP基因,构建p BI121-Gh VP∷GFP荧光表达载体,采用基因枪技术转化洋葱内表皮细胞,结果显示Gh VP基因编码蛋白定位于细胞质膜上。将构建的p BI121-Gh VP∷GFP荧光表达载体转化棉花花粉,花粉荧光明显增强,说明该基因可以在棉花中表达,为Gh VP基因可以在棉花中表达提供了依据,为培育棉花耐盐新材料奠定了基础。 相似文献
3.
pCB-zeolin-GFP表达载体的构建及瞬时表达 总被引：1，自引：1，他引：0
为利用荧光蛋白基因GFP检测外源基因在转基因植株中的表达和定位,构建含有GFP基因的植物表达载体pCB-zeolin-GFP。在目的基因的开放阅读框（ORF）两端设计引物,并引入酶切位点和保护碱基,用PCR方法从pDHA扩增得到zeolin基因的全长,克隆到中间载体pMD18-T,分别用NcoⅠ和BglⅡ2种限制性内切酶酶切重组质粒和经过改良的pCAMBIAI1302植物表达载体,经回收、连接、转化、鉴定后,利用基因枪转化法将重组载体转入洋葱表皮细胞,通过共聚焦显微镜检测绿色荧光蛋白在洋葱表皮细胞中的瞬时表达。构建了zeolin基因与绿色荧光蛋白（GFP）融合的植物表达载体pCB-zeolin-GFP,并在洋葱中得到了表达。构建的融合植物表达载体pCB-zeolin-GFP正确,该载体的成功构建为今后进行基因转移、基因功能研究及培育新品种奠定了基础。 相似文献
4.
《华北农学报》2021,36(4)
为了方便快速地鉴定RNA的移动性,研究RNA参与植物生长发育以及生理响应过程的胞间运输机制,减少试验成本,将含有24个茎环串联重复的RNA结构(SL24)连入双元载体pUbiK成功构建了表达载体pSL24UbiK,再利用同源重组的方法将可移动性RNA FT和不可移动性RNA GUS片段分别连入表达载体pSL24UbiK成功构建了重组载体pSL24UbiK-FT、pSL24UbiK-GUS。利用农杆菌介导法,将pSL24UbiK-FT、pSL24UbiK-GUS分别与p1390-35S-MS2_(FD)-GFP共同在烟草叶片中瞬时表达。在Ubiquitin启动子驱动下,SL24和目标RNA形成融合片段。MS2/SL24系统的另一组分MS2蛋白与绿色荧光蛋白融合形成MS2-GFP,噬菌体外壳蛋白MS2可识别SL24 RNA结构,在共聚焦显微镜下观察烟草叶片中GFP的细胞定位情况。结果显示,可移动RNA FT在细胞质附近显示出点状信号,不可移动RNA GUS在细胞质附近没有检测到荧光信号,只在细胞核位置有荧光信号的出现。结果表明,利用该系统将目标RNA连接到表达载体pSL24UbiK上,通过与p1390-35S-MS2_(FD)-GFP共侵染烟草叶片,在共聚焦显微镜下观察GFP的细胞定位情况就能够确定RNA在细胞内是否可以移动,为研究RNA的移动性提供了新的技术方法。 相似文献
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6.
适于植物转基因体系优化的绿色荧光蛋白表达载体构建及其瞬时表达验证 总被引：1，自引：1，他引：0
在建立和优化植物的转基因体系时,通常期望转化载体同时具有适用植株范围广、尺寸较小、具有多重选择标记或报告基因等优点。为此,通过Gateway技术,构建了含有绿色荧光蛋白基因GFP的植物表达载体pGWB14-GFP,并经PCR鉴定和测序验证了序列的准确性。利用基因枪转化法,将该载体转入洋葱表皮和小麦叶片中,通过荧光显微镜检测,发现绿色荧光蛋白在洋葱表皮细胞和小麦叶片表皮细胞中均能瞬时表达,表明pGWB14-GFP在双子叶和单子叶植物中都能正常发挥功能。本载体在双子叶和单子叶植物植物中都可使用,大小低于17 kb,含有GFP报告基因,具有两套卡那霉素和潮霉素选择标记基因,用于在细菌和植物中筛选,为植物转基因体系的构建和优化提供了功能强大的转化载体。 相似文献
7.
通过构建盐角草的液泡型Na /H 反向转运蛋白SeNHX1基因的酵母表达载体,研究该基因对酵母耐盐性的影响.将SeNHX1基凶与荧光报告基因GFP融合,分别构建酵母表达载体pYES2.SeNHX1-GFP、pYES2-SeNHX1和pYES2-GFP,转化酵母W303,诱导3个载体表达,并测定含有不同表达载体的酵母生长曲线.结果表明.荧光显微镜下观察到带有报告基因GFP的2个转化子W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-GFP)均可发出绿色荧光,而没有报告基因的转化了W303(pYES2-SeNHX1)不发出荧光;在含有0.8 mol/L NaCl培养基中培养0～48 h内,W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-SeNHX1)菌株前期生长比对照菌株W303(pYES2-GFP)慢,但在培养48 h后则大大超过对照菌株.表明所构建带有目的基因SeNHX1的酵母表达载体已表达,且证实SeNHXl基因可提高酵母的耐盐性. 相似文献
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马铃薯损伤诱导型启动子Wun1基因的克隆及其GFP表达活性 总被引：1，自引：0，他引：1
通过聚合酶链式反应(PCR),以马铃薯基因组DNA为模板,根据已报道Wun1序列设计了一对特异引物,在优化的PCR反应条件下扩增出了Wun1基因片段,通过序列分析与文献报道的碱基序列有96.86%的同源性,该基因已登录到GenBank(No.AY803296)。以pBIPG(携带GFP基因)的质粒DNA为模板,通过PCR技术亚克隆到了源自水母(Aequorea)大小为756bp的绿色荧光蛋白(GFP)基因,与已知序列同源率为100%。利用GFP基因作为报告基因,构建了用于比较鉴定所克隆启动子活性的pBIG(35S-GFP)和pBIWG(Wun1-GFP)两个植物表达载体,采用基因枪法进行对洋葱表皮细胞的遗传转化,检测Wun1启动子在受体细胞中调控基因表达的活性,结果表明克隆到的Wun1启动子活性强于组成型表达的35S启动子,GFP瞬时表达的分析方法也让我们有效的筛选到用于进行马铃薯抗病育种的调控元件。 相似文献
9.
分析白桦BpERF1.1基因不同组织部位以及低温胁迫后的表达模式,定位基因表达部位,并为获得转基因白桦做初步准备.通过实时荧光定量PRC技术测定BpERF1.1基因的相对表达量;利用基因枪法在洋葱表皮细胞瞬时表达35S::BpERF1.1-GFP,激光共聚焦显微镜观察GFP发光情况,获得BpERF1.1基因表达产物的亚细胞定位信息;此外,利用双酶切法将BpERF1.1基因连接到pRokⅡ过表达载体,以及热激法转化到大肠杆菌感受态细胞中.BpERF1.1基因在叶片中相对表达量最高;低温胁迫后的24 h内,白桦BpERF1.1基因持续上调表达;BpERF1.1基因的表达产物定位在细胞核;pRokⅡ-BpERF1.1植物过表达载体菌液PCR的目的 条带位置正确,测序结果BLAST比对后与序列吻合.白桦BpERF1.1基因主要表达部位在叶片,其可以响应低温逆境,且过表达载体pRokⅡ-BpERF1.1构建成功. 相似文献
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湖羊myogenin重组基因表达及其亚细胞定位的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
摘 要： [目的]构建湖羊肌细胞生成素（myogenin,MyoG）与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的融合蛋白真核表达载体,分析EGFP-MyoG融合蛋白在NIH-3T3细胞的表达及亚细胞定位。[方法]利用PCR技术扩增出MyoG基因完整的CDS,克隆至真核表达载体pEGFP-C1,转染NIH-3T3细胞,荧光显微镜下观察EGFP-MyoG融合蛋白的亚细胞定位,并通过RT-PCR、western blot检测蛋白的表达。[结果]酶切鉴定和DNA序列分析均证实,MyoG基因已正确插入pEGFP-C1中,获得融合蛋白表达载体pEGFP-C1-MyoG,转染NIH-3T3细胞48h后,RT-PCR检测到约680bp的特异性条带,western blot检测出相对分子量约为53kD的融合蛋白,荧光显微镜分析表明,MyoG蛋白定位于细胞核。[结论]融合蛋白EGFP-MyoG在NIH-3T3细胞中成功表达,并定位于细胞核。 相似文献
11.
氮肥水平对强筋小麦产量和氮素利用的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为明确强筋小麦产量与效率相协同的最优施氮量,试验选用‘济麦20’和‘洲元9369’ 2个优质强筋小麦品种为试验材料,设置0、120、180、240、300 kg N/hm 2等5个施氮水平,用烘干法和凯氏定氮法分别测定小麦成熟期干物质量积累和含氮量,用以计算小麦氮素积累及氮素利用相关指标。结果表明,随氮肥投入量的增加,小麦产量呈现先升高后降低的变化趋势,其中‘济麦20’在N180和N240下达最高产量7.28 t/hm 2和7.26 t/hm 2,其较高的产量主要源于相对平衡的产量构成因素以及较高的干物质积累量（平均18.54 t/hm 2）;‘洲元9369’在N180下产量最高达7.75 t/hm 2,其较高的产量主要源于较高的单位面积穗数(970.65万/hm 2)、穗粒数（30.83粒）、较高的干物质积累量(20.77 t/hm 2)和收获指数(37.33%)。虽然氮肥偏生产力随着氮肥施用量的增加逐渐下降,但两品种的氮肥回收效率、氮肥农学利用率和氮肥生理利用效率均可在N180条件下达到最高值,其中,‘济麦20’最高值分别为62.67%、5.71 kg/kg、9.11 kg/kg,‘洲元9369’的最高值分别为63.65%、7.33 kg/kg、11.55 kg/kg。综合产量水平和氮素利用相关指标,本区域强筋小麦生产中产量与氮素利用效率相协同的施氮量为180 kg/hm 2。 相似文献
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辽宁春季界限温度发生日期的预报方法研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为了在春季气候预测工作中,尽可能准确地预测辽宁春季稳定通过5℃的日期,采用1961—2010年辽宁省53站逐日气温资料和NCEP/NCAR再分析的月平均位势高度场、海平面气压场资料以及由NOAA重构的月平均海温场资料,通过相关分析方法并开展物理因子的普查工作,寻找辽宁春季稳定通过5℃日期的影响因子,并利用多元线性回归方法建立预报方程。结果表明：1961—2010年辽宁春季气温稳定通过5℃日期随时间有提前出现的趋势;稳定通过5℃日期与2月北大西洋海温、1月西北太平洋海温、2月北极涛动、1月印度洋海温、10月阿留申低压强度和1月北大西洋涛动关系密切;建立的预报稳定通过5℃日期的多元线性回归方程具有显著意义。 相似文献
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David Stuligross 《Asia Pacific viewpoint》2008,49(1):83-97
Abstract: Jharkhand is at the centre of India's struggles to define ‘the environment’ and ‘economically relevant natural resources’. Although cultural labels are applied by leaders who seek influence in these struggles as well as by many of those people who listen, an ethnonational analytic frame does not help answer the questions: How, why and when has the political idea of environment changed in India? When and why has the Jharkhand movement chosen violent tactics? When and why has the Jharkhand statehood movement realised electoral success? Or, why was Jharkhand state formed? To address such questions, a long range historical‐institutional approach is much more fruitful. 相似文献
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Fouad M. Basiouny 《Journal of Agronomy and Crop Science》1986,157(1):31-35
Sensitivity of different agronomic crops to UV-B radiation was studied under environmentally controlled conditions. UV-B radiation reduced plant height, fresh weight, dry weight and ash contents. The reduction varied among the different species tested. Narrow-leaved plants (mainly C4 ) were less sensitive to UV-B than broad-leaved plants (mainly C3 ). 相似文献
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YUAN Zheng-qiang 《保鲜与加工》2000,(5):107-110
This paper presents the class of high effective locations and its addition, subtraction, multiplication, division, involution and factorial by the object-oriented programming. 相似文献
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The origin,evolution, cultivation,dissemination, and diversification of Asian and African rices 总被引：28，自引：0，他引：28
Te-Tzu Chang 《Euphytica》1976,25(1):425-441
Summary Available evidences drawn from biosystematics, evolutionary biology, biogeography, archaeology, history, anthropology, paleo-geology and paleo-meteorology are pooled to reconstruct the series of events that led to the cosmopolitan cultivation of the Asian cultivated rice (O. sativa) and the regionalized planting of the African cultigen (O. glaberrima) in West Africa. The genus Oryza originated in the Gondwanaland continents and, following the fracture of the supercontinent, became widely distributed in the humid tropics of Africa, South America, South and Southeast Asia, and Oceania. The two cultivated species have had a common progenitor in the distant past. Parallel and independent evolutionary processes occurred in Africa and in Asia, following the sequence of: wild perennialwild annualcultivated annual. The weed races also contributed to the differentiation of the cultivated annuals. The corresponding members of the above series are O. longistaminata
Chev. et Roehr., O. barthii
A. Chev., O. glaberrima
Steud., and the stapfii forms of O. glaberrima in Africa; O. rufipogon
Griff., O. nivara
Sharma et Shastry, O. sativa L., and the spontanea forms of O. sativa in Asia.The differentiation and diversification of the annuals in South Asia were accelerated by marked climatic changes following the last glacial age, dispersal of plants over latitude or altitude, human selection, and manipulation of the cultural environment.Cultivation of rice began in many parts of South and Southeast Asia, probably first in Ancient India. Cultural techniques such as puddling and transplanting were first developed in north and central China and later transmitted to Southeast Asia. Wetland culture preceded dryland culture in China, but in hilly areas of Southeast Asia, dryland cultivation is older than lowland culture. The planting method progressed from shifting cultivation to direct sowing in permanent fields, then to transplanting in bunded fields.Widespread dispersal of the Asian cultigen led to the formation of three eco-geographic races (Indica. Sinica or Japonica, and Javanica) and distinct cultural types in monsoon Asia (upland, lowland, and deep water). Varietal types changed readily within the span of a millenium, largely due to cultivators' preferences, socio-religious traditions, and population pressure. Genetic differentiation developed parallel to the ecologic diversification process.The African cultigen developed later than the Asian cultigen and has undergone less diversification. The wild races in South America and Oceania retain their primitive features mainly due to lack of cultivation pressure or dispersal.Both the African and Asian rices are still undergoing evolutionary changes at habitats where the wild, weed, and cultivated races co-exist. 相似文献
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借助GIS空间数据获取、分析与管理能力,基于农用地分等方法的应用和改进,建立了重庆市耕地质量评价模型。评价模型通过分功能模块从机理上实现评价质量控制,就光温/气候潜力加和算法,采用以能值为基础确定标准产量折算系数 ,引入光温潜力协调系数 ;就自然质量分模型,指标区之间因素－分级－分值进行了统一,但保留了因素权重的区域差异性。采用2004-2005年重庆市分区县统计的平均粮食播面单产对自然质量等和利用等进行独立检验,线性相关系数分别达83％和87％,相关性显著。研究得出结论,评价模型有效实现了重庆市耕地质量评价区域间的可比性。 相似文献