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1.
超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟和体外受精的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
以ＴＣＭ１９９＋１０ｍｍｏｌ／ＬＨＥＰＥＳ＋青霉素（６ｍｇ／Ｌ）＋链霉素（５ｍｇ／Ｌ）为基础培养液（ＢＭ），再分别加入不同成分，配成５种卵母细胞成熟液：（Ａ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ；（Ｂ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ（２．５ｍｇ／Ｌ）；（Ｃ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２（１ｍｇ／Ｌ）；（Ｄ）ＢＭ＋１０％ＦＣＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２；（Ｅ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２＋颗粒细胞（１．５×１０６～３．０×１０６个／ｍＬ）。在３８．５℃、５％ＣＯ２下培养２６ｈ，排卵后第１天卵巢卵母细胞体外成熟率分别为６７．６７％（２０／３０），６０．４２％（２９／４８），８３．６７％（４１／４９）和８０．８２％（５９／７３），排卵后第５天卵巢卵母细胞，在培液Ｄ中体外成熟率为７１．４３％（４５／６３）。排卵后第１天的９８枚卵巢卵母细胞，体外成熟体外受精卵裂率为２１．４３％，２１枚２细胞胚移植５头受体获２头羔羊。研究表明，超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟卵母细胞，并可通过体外受精获得试管山羊 相似文献
2.
ＡＭＭＳ／１３近交系小鼠由本中心用ＡＭＭＳ／１与Ｃ３Ｈ／ＨｅＭｓ２种近交系小鼠杂交育成，现已繁殖至Ｆ４０多代。毛色为桂皮色，毛色基因为ＡＡｂｂＣＣＤＤ；经组织相容性基因、生化基因及染色体组型分析等遗传检测，符合近交系标准。其初孕期产仔数为６．５２±１．４３，离乳率为８８．８１％（１～６胎），成年雌鼠体重为（２２．８０±１．４７）ｇ，雄鼠为（２４．７７±１．６５）ｇ，经产母鼠乳腺癌发病率为５６．７％。血清ＩｇＧ含量随日龄而增加，相同条件下，雌性比雄性高。该系小鼠可作为莱姆螺旋体病的模型动物。 相似文献
3.
鸡肝脏β—羟—β—甲戊二酸单酰辅酶A还原酶的提纯和性质 总被引：5，自引：0，他引：5
采用超速离心、热变性处理、硫酸铵沉淀和亲和层析方法，从鸡肝脏中分离提纯了β－羟－β－甲戊二酸单酰辅酶Ａ（ＨＭＧ－ＣｏＡ）还原酶。提纯倍数为２０９倍，比活力１８８．５Ｕ／ｍｇ，Ｋｍ值１．８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量为３．２×１０４。温度对该酶活性影响较大，３７℃时活性最高。最适反应ｐＨ为７．２。甘氨酸在１０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度以上时对该酶呈现明显抑制作用，ｌ－组氨酸、ｌ－精氨酸则无明显抑制作用。Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋离子对该酶有明显抑制作用，Ｚｎ２＋在１．５ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｃｕ２＋和Ｍｇ２＋在２．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度以上时抑制作用明显。中药山楂（ＣＨＳ）和决明子（ＣＨＺ）的水煎液对酶的抑制作用明显 相似文献
4.
抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与中和效应 总被引：2，自引：0，他引：2
用提取的 Ａ 型产气荚膜梭菌 α毒素包涵体免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠后， 取小鼠脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 骨髓瘤细胞进行融合和克隆化，经间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 筛选，共获得 １ Ａ８、１ Ｃ３、１ Ｄ５、１ Ｄ８、１ Ｆ１、１ Ｈ１ 和 ２ Ｅ３ ７ 株稳定分泌单克隆抗体（ Ｍ ｃ Ａｂ）的杂交瘤细胞株。经鉴定，７ 株 Ｍ ｃ Ａｂ 的 Ｉｇ 亚类有 Ｉｇ Ｇ１（１ Ｄ８）、 Ｉｇ Ｇ３（１ Ａ８、１ Ｃ３ 和 ２ Ｅ３）和 Ｉｇ Ｍ（１ Ｄ５、１ Ｆ１ 和 １ Ｈ１）。细胞培养上清和腹水抗体效价分别为 １∶５１２～１∶１ ０２４ 和 １∶１０６ ～１∶１０８ 。尤为重要的是，２ Ｅ３ 杂交瘤细胞株分泌的 Ｍ ｃ Ａｂ 不仅能够中和 α毒素的磷脂酶 Ｃ活性和溶血活性，而且能够对致死性腹腔感染小鼠产生良好的被动保护作用。 相似文献
5.
ABC—Dot—ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒 总被引：4，自引：0，他引：4
建立了ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的方法,其最佳反应条件是：包被液为０．０５ｍｏｌ／ＬｐＨ９．６的碳酸钠－碳酸氢钠缓冲液（ＣＢＳ）,免疫ＩＢＶ ＩｇＧ的最佳工作浓度为１：８０;抗原的最佳浓度为１：８００;封闭剂选用０．０１ｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．４含３０ｍＬ／Ｌ白明胶的ＰＢＳ,Ｂ－ＡｇＧ和ＡＢＣ－ＨＥＰ的最佳工作浓度为１：２００。用ＡＢＣ－ＨＥＰ的最佳工作浓度为１：２０ 相似文献
6.
有丝分裂原对离体boPBMC增殖和分泌Ig的作用 总被引：2，自引：1，他引：1
应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，ＥＬＩＳＡ和ＦＡＣＳ研究了离体奶牛外周血单核细胞（ｂｐＰＢＭＣ）对有丝分裂原的免疫应答。ＰＷＭ和ＣｏｎＡ能不同程度地诱导ｂｏＰＢＭＣ增殖和分泌Ｉｇ；而ＳＥＢ只能使ｂｏＰＢＭＣ高度增殖而不分泌Ｉｇ（Ｐ〉０．０５）。ＰＷＭ诱导的ｂｏＰＢＭＣ经１２ｄ培养，其中ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞的比率为２．９：１；而ＳＥＢ诱导的细胞为０．３：１。离体ｂｏＰＢＭＣ主要分泌ＩｇＭ和ＩｇＧ１，只有 相似文献
7.
ＡＭＭＳ／１３近交系小鼠由本中心用ＡＭＭＳ／１与Ｃ３Ｈ／ＨｅＭｓ２种近交系小鼠杂交育成，现已繁殖至Ｆ４０多代。毛色为桂皮色，毛色基因为ＡＡｂｂＣＣＤＤ；经组织相容性基因、生化基因及染色体组型分析等遗传检测，符全中近交系标准，其初孕期产仔数为６．５２±１．４３，离乳率为８８．８１％（１～６胎），成年雌鼠体重为（２２．８０±１．４７）ｇ，雄鼠为（２４．７７±１．６５）ｇ，经产母鼠乳腺癌发病率为５６．７ 相似文献
8.
用取自 ３～５ ｍ ｍ 卵泡的处于减数分裂阻抑状态的猪卵丘卵母细胞复合体（ｐ Ｃ Ｅ Ｏ），培养 ４８ ｈ，用 Ｆ Ｓ Ｈ（１００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）或 ｈ Ｃ Ｇ（０、５０、１００、２００、５００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）刺激 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌甾体激素；用放射受体测定法（ Ｒ Ｒ Ａ）比较 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 的卵丘细胞及壁层颗粒细胞（ Ｍ Ｇ Ｃ）上促黄体激素受体／人绒毛膜促性腺激素受体（ Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ）的数量； Ａ Ｍ ｅ Ｘ 石蜡切片、免疫组织化学染色，检测 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 以及 Ｍ Ｇ Ｃ 的分布情况。在 Ｆ Ｓ Ｈ 作用下，ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌的孕酮明显高于 ｈ Ｃ Ｇ 作用组和对照组 （ Ｐ ＜ ００５）； 平均每个壁层颗粒细胞上的 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ是每个卵丘细胞的 １０５ 倍； Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在基膜两侧分布较多，且卵母细胞上没有 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ，临近卵母细胞的卵丘细胞膜上较少被染色。以上结果表明，在体外试验中，可能由于 Ｃ Ｅ Ｏ 上 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 的数量不足或生理活性降低， Ｌ Ｈ／ｈ Ｃ Ｇ 不能促进卵母细胞恢复减数分裂。 相似文献
9.
本文选用１０株ＮＤＶ疫苗、１０株ＮＤＶ／ＩＢＶ联苗，察接种２周龄雏鸡后对头部相关淋巴组织（ＨＡＬＴ）的影响。通过对接种鸡进行一系列体内试验，检测了哈德氏腺（ＧＨ）对布氏杆菌灭活抗原滴眼的反应情况。根据这一结果，对ＨＡＬＴ的几个部位和支气管进行组织学检查，并见到有微观变化。本研究表明：３种ＮＤＶ／ＩＢＶ联苗（１株Ｂ１／Ｍａｓｓ＆Ｃｏｎｎ、２株ＬａＳｏｔａ／Ｍａｓｓ＆Ｃｏｎｎ）可干扰ＧＨ对布氏抗原的反 相似文献
10.
日粮烟酸水平对肉鸭后期生产性能和脂肪代谢的影响 总被引：15，自引：0，他引：15
７２只２１日龄樱桃谷鸭平均分成４组,分别添加０、３０、６０、９０ｍｇ／ｋｇ烟酸进行３周饲养试验。测定平均日采食量（ＡＤＦＩ）、平均日增重（ＡＤＧ）、料重比（Ｆ／Ｇ）、血清总胆固醇（ＴＣＨ）、血清总甘油三酯（ＴＧ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）。结果表明：①日粮烟酸水平不影响ＡＤＦＩ、ＡＤＧ、Ｆ／Ｇ（Ｐ＞０．０５）,但与ＡＤＦＩ、ＡＤＧ、Ｆ／Ｇ存在显著（Ｐ＜０．０５）或极显著二次曲线关系（Ｐ＜０．０１）。②日粮烟酸水平可能影响ＴＣＨ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ,但差异不显著（Ｐ＞０．０５）。当基础日粮烟酸和色氨酸水平分别为３５ｍｇ／ｋｇ和０．１６％时,建议肉鸭后期烟酸添加水平为６０ｍｇ／ｋｇ。 相似文献
11.
中国家畜伊氏锥虫主要流行株对安锥赛的抗药性检测 总被引：1，自引：0，他引：1
用生长繁殖抑制试验测定伊氏锥虫ＡＨＢ、ＧＤＢ１、ＧＤＢ２、ＧＤＨ、ＧＸＭ、ＨＢＭ、ＨＮＢ、ＪＳＢ１、ＪＳＢ２、ＸＪＣＡ、ＹＮＢ和ＺＪＢ株的ＩＣ５０植分别是０．０１６４００、０．０６６９４０、０．０２２５００、０．０５３５００、０．００７３９０．０．００８４３６、０．０３７６００、０．０１６２００、０．０５９０６、０．００１５１１和０．０１２４６０μｇ／ｍＬ。为检验生长繁殖抑制试验的准确性，用ＸＪＣ 相似文献
12.
用ＥｏｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ双酶解含鸡α－珠蛋白基因５′端核基质附着区（ＭＡＲ）、小鼠金属硫蛋白基因启动子（ＭＴ－１）和人胰岛素样生长因子１－（ｈＩＧＦ－１）基因的ｐＭＴＳＭＣＡＧ质粒，０．６％琼脂糖凝胶电泳，玻璃乳回收纯化ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１片段（３．９ｋｂ），用该片段制备转基因兔。利用水平显微注射系统注射１－细胞兔胚胎４６８枚，移植到３６中受体兔，获得８只阳性兔（显示出约６００ｂｐ外源ＤＮＡ 相似文献
13.
应用电灼烧和强酸腐蚀的方法成功地对１０ 周龄公雏鸡实行了肾上腺去除术。在此基础上对完全去肾上腺雏鸡给以外源性糖皮质激素（ Ｇ Ｃ）地塞米松（ Ｄｅｘ）２ ｍ ｇ／ｋｇ·ｄ可以逆转由于 Ｇ Ｃ 缺失造成的血糖降低和水盐代谢紊乱。对去除１ ２３肾上腺雏鸡并给以 Ｒ Ｕ４８６ Ｐ Ｖ Ａ ５０ ｍ ｇ／ｋｇ·ｄ，雏鸡血糖、血清钠，血清钾维持正常水平；虽然其血清 Ａ Ｃ Ｔ Ｈ 浓度升高至（１４６． ９４±７．５６） Ｉ Ｕ／ Ｌ（ Ｐ＜ ０．０１），但血清皮质酮并没有在高浓度 Ａ Ｃ Ｔ Ｈ 刺激下大量分泌而维持于９０．４８～１０３．１４ ｎｍ ｏｌ／ Ｌ 的生理范围内。为在不受内源性 Ｇ Ｃ干扰下建立鸡糖皮质激素受体（ Ｇ Ｒ）阻断提供了实验动物模型。 相似文献
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二甲苯胺噻唑对绵羊血液及脑脊液中乙酰胆碱的影响 总被引：3，自引：1，他引：2
用荧光分光光度计的方法研究了二甲苯胺噻唑（静松灵）对乙酰胆碱（ＡＣＨ）的影响，肌注２．５ｍｇ／ｋｇ该药后，血液及脑脊液中ＡＣＨ浓度呈上升趋势，于２．５小时达峰值，血液ＡＣＨ由０时７．９６５±０．４１８ｎｇ／ｍｌ２．５小时的４３．９３９±１．３０７ｎｇ／ｍｌ（ｎ＝５，Ｐ＜０．０１），ＡＣＨ浓度增加了４．５倍，脑脊液ＡＣＨ则由０时的１２．７２２±１．３４７ｎｇ／ｍｌ增７１、９５４±２．２５７ｎｇ／ｍｌ 相似文献
15.
猪核移植重组胚胎的发育能力 总被引：1，自引：0，他引：1
以ＭｃＧｒａｔｈ－Ｓｏｌｔｅｒ（１９８３）提供的去（注）核方法，将猪胚胎的单个卵裂球细胞注入去核的次级成熟卵母细胞，借助电融合的方法（ＡＣ；５Ｖ，１．５ＭＨｚ，１２－１５ｓ；ＤＣ：２ｋＶ／ｃｍ，４０μｓ。电激活／融合液：０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋－．１ｍｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４＋０．１ｍｍｏｌＣａｃＬ２＋７．５ｍｇ／ｍｌＣＣＢ）融入受体胞质构成重级胚，体外培养（培养液为改衣ＴＣＭ－１９９；培养条件为５％ 相似文献
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大蒜油中大蒜素等含硫化合物的气相色谱-质谱法测定 总被引：6，自引：0，他引：6
三硫醚化合物ＣＨ２＝ＣＨ－ＣＨ２－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（二丙烯基三硫醚，俗称大蒜素或大蒜新素）、ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ２（甲基丙烯基三硫醚）和ＣＨ３－Ｓ－Ｓ－Ｓ－ＣＨ３（二甲基三硫醚），除了对各种病菌具有很强的杀灭和抑制作用外，还可以提高饲料适口性，增加采食量，提高饲料报酬。本研究利用气相色谱－质谱（ＧＣ－ＭＳ）联用仪对大蒜油中的大蒜素等部分组分进行了测定，方法简便快速、准确可靠。１ 方法 １．１ 仪器与试剂 ＧＣ－ＭＳ ＱＰ－５０００气相色谱－质谱联用仪（日本岛津公… 相似文献
17.
对聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增犬细小病毒（ＣＰＶ）衣壳基因的诊断方法与用Ｇｒａｎｄｅｌｌ猫肾细胞（ＣＲＦＫ）或Ｍａｄｉｎ－Ｄａｒｂｙ犬肾细胞（ＭＤＣＫ）分离病毒和能被ＣＰＶ特异性抗血清抑制的粪便血凝（ＨＡ）试验进行了比较；ＰＣＲ检测的５９例粪样中有１例假阴性（１．７％）。它与用ＭＤＣＫ细胞分离病毒同样敏感，而比用ＣＲＦＫ细胞分离病毒或ＨＡ试验更敏感。这些结果表明，ＰＣＲ可作为粪样ＣＰＶ检测的常 相似文献
18.
青海细毛羊生化遗传多态性的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和火焰光度法对５０９只青海细毛羊细血液和乳汁中ＨＢ，ＥＰ－１，ＥＰ－２，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ１，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ，Ｈｐα－ＬＡ和β－ＬＧ总共１３个位点的多态性进行了研究。结果为：（１）在青海细毛羊的ＨＢ，ＫＥ，ＴＦ，ＡＭＹ２，ＥＳ，ＡＬＰ，ＲＢＣ－ＬＤＨ１，Ｈｐ，β－ＬＧ总共９个位点上发现多态性，多态性位点的比例为６９．２３％；（２）每个位点实有的平均等位 相似文献
19.
囊虫病循环抗原酶联免疫试剂检测盒的研制 总被引：7，自引：1，他引：6
以部分纯化囊虫抗原免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠,取其脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 细胞融合制备抗囊虫循环抗原（ Ｃ Ａ） Ｍｃ Ａｂ ,共获得 ８ 株分泌抗囊虫 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ 细胞株。经鉴定,筛选出组合后能获得最佳检测效果的 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ细胞株 Ｍ ｃ Ａｂ １ Ｃ７（包被）和 Ｈ Ｒ Ｐ１ Ｂ５ 作为检测用的 Ｍ ｃ Ａｂ,用其建立了检测囊虫 Ｃ Ａ 的双抗体夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法,并研制了囊虫病 Ｃ Ａ 检测试剂盒。试剂盒用于检测囊虫病 Ｃ Ａ,敏感、特异、快速、简便,囊虫病血清 Ｃ Ａ的检出率为 ９１．４３％ ,脑脊液 Ｃ Ａ 的检出率为 ９４．４４％ 。 相似文献
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将火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗接种于鸡胚卵黄囊、然后检查绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）上病毒痘斑（以下简称“痘斑”）生长情况,以此作为ＨＶＴ疫苗免疫前效力检测的手段,得到满意效果。１材料与方法１．１ＭＤ强毒（ｖＭＤＶ）分离自本公司某鸡场严重感染ＭＤ鸡的血液,经原北京农业大学鉴定为一株ｖＭＤＶ。历年采购的国产和进口ＨＶＴ疫苗３０批次,分甲、乙、丙３组进行观察。１．２经血清学检查（ＭＤ-ＡＧＰ）并证明无ＭＤ抗体的种鸡所产种蛋,按常规方法,孵育到４～５ｄ的鸡胚用于接种;卵黄囊接种已稀释好的ＨＶＴ疫苗,每份ＨＶＴ疫苗分１,２… 相似文献