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1.
为了探索鸡IL-18在禽多杀性巴氏杆菌H基因DNA疫苗中的免疫佐剂作用，分别用共表达鸡IL-18基因和禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗、鸡IL-18真核表达质粒pcDNA3／cIL-18与禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗混合物、禽多杀性巴氏杆菌C48-1H基因的DNA疫苗肌肉注射5周龄鸡，首免后每周采取外周血及外周抗凝血，应用ELISA和MTT法分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。二免后第2周用10 LD50禽多杀性巴氏杆菌强毒菌株C48-1进行攻击。结果鸡IL-18能够明显增强禽多杀性巴氏杆菌H基因DNA疫苗的免疫原性，显著提高免疫鸡的体液免疫和细胞免疫水平，并且鸡IL-18与禽多杀性巴氏杆菌H基因共表达时的免疫佐剂作用最强，能强有力地抵抗强毒菌株C48-1的致死性攻击。结果表明，鸡IL-18可作为DNA疫苗的一种理想的免疫佐剂。 相似文献
2.
根据禽巴氏杆菌5：A C48-1株OmpH全长基因序列设计一对特异性引物，经PCR扩增获得成熟外膜蛋白H基因（OmpmH），将OmpmH片段非定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中，构建重组表达质粒pGEX—OmpmH。转化大肠杆菌BL21（DE3），在IPTG诱导下表达融合蛋白GST—OmpmH。SDS—PAGE结果显示．GST—OmpmH约为63Ku，与预期的大小一致。Westernblot检测结果表明，GST—OmpmH能与C48-1外膜蛋白免疫血清发生特异性反应，证明C48-1 ompmH原核融合表达成功。其可溶性蛋白经亲和层析纯化，得到了纯度较高的目的蛋白OmpmH。为进一步研究禽巴氏杆菌C州OmpmH的免疫原性奠定了基础。 相似文献
3.
本文报告了用2.5％食盐溶液从多杀性巴氏杆菌C48-1菌株提取一种粗荚膜抗原(CCA)和用溴化十六烷基三甲铵沉淀法从CCA提取纯多糖抗原(PPA),并用鸡检测了其免疫原性。对12～16周龄鸡进行一次肌肉或皮下免疫接种,接种后14天用同源的C48-1强毒菌株肌内注射攻击。结果表明,使用不同剂量的CCA对鸡具有不同程度的保护,当以5,800微克剂量组时免疫力最高,攻击后试验鸡分别获得80～100％的保护,未接种鸡出现100％死亡率。PPA几乎无保护作用。结果证明,用盐类从多杀性巴氏杆菌胞壁荚膜分离提取的表面抗原对鸡具有良好的免疫原性。 相似文献
4.
禽霍乱组织灭活油佐剂苗的研制 总被引：2，自引：1，他引：1
选用分离自急性禽霍乱病鸭的多杀巴氏杆菌，通过鸡（鸭）胚培养，制备组织灭活油佐剂苗。免疫接种后７－９天可产生免疫力，用同型或异型强毒禽多杀巴氏杆菌攻击，其保护率均在８０％以上，保护期不少于４个月，疫苗保存期为半年。 相似文献
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选用分离自急性禽霍乱病鸭的多杀巴氏杆菌,通过鸡(鸭)胚培养,制备组织灭活油佐剂苗。免疫接种后7～9天可产生免疫力,用同型或异型强毒禽多杀巴氏杆菌攻击,其保护率均在80％以上,保护期不少于4个月,疫苗保存期为半年。 相似文献
6.
《中国预防兽医学报》2017,(8)
为评价禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因壳聚糖纳米DNA疫苗的免疫效果,本实验以壳聚糖为佐剂制备ptfA基因的壳聚糖纳米DNA疫苗,检测其形态及抗DNA酶降解的能力,随后进行动物免疫实验,检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平、免疫小鼠脾淋巴细胞增殖、IFN-γ分泌情况和抵抗强毒菌株攻击和免疫保护率。实验结果显示,ptfA基因壳聚糖纳米DNA在透射电镜下呈现较为规则的圆球型,粒径约为200 nm,可以有效抵抗DNAaseⅠ的降解。间接ELISA检测结果显示,壳聚糖纳米DNA疫苗组和裸DNA组的血清抗体水平均呈现上升趋势,明显高于空载体对照组和PBS对照组,且壳聚糖纳米DNA疫苗组的抗体水平稍高于裸DNA疫苗组。淋巴细胞增殖试验和IFN-γ分泌试验结果也显示,壳聚糖纳米DNA疫苗组和裸DNA疫苗组的SI值与IFN-γ分泌水平极显著高于两对照组(p0.01),但两种DNA疫苗组之间差异并不显著(p0.05)。强毒菌株攻击后壳聚糖纳米DNA疫苗组的保护率优于裸DNA疫苗组,在一定程度上增强了禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因裸DNA疫苗的免疫效果。从而为禽多杀性巴氏杆菌新型DNA疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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选择禽多杀性巴氏杆菌Ｃ４８－１强毒株（血清１型），接种鸡胚，收集死胚制备组织灭活油乳苗，分别免疫鸡和鸭，设肉汤培养的Ｃ４８－１菌株灭活乳化苗作免疫对照。免疫后４周用异源血清型禽多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（血清３型）攻击。经组织灭活油乳苗免疫的鸡保护率达９３．３％，鸭保护率达１００％，而经肉汤培养的灭活苗对鸡和鸭均无保护作用，说明鸡胚培养的多杀性巴氏杆菌具有交叉保护作用。 相似文献
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禽多杀性巴氏杆菌ＥＬＩＳＡ三种抗原比较研究刘云同郑星道金仁哲顾万钧黄伟（吉林省通化县家畜繁改站·１３４１００）（吉林农业大学动物科学系关于检测禽多杀性巴氏杆菌血清抗体的研究，国外学者是应用凝集反应、间接血凝、酶联免疫吸附试验检测禽多杀性巴氏杆菌弱毒免... 相似文献
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禽霍乱鸡胚组织灭活油乳苗的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
选择禽多杀性巴杆菌Ｃ４８－１强毒株（血清１型）接种鸡胚，收集死胚制备组织灭活油乳苗，分别免疫鸡和鸭，设肉汤培养的Ｃ４８－１菌株灭活乳化苗免疫对照，免疫后４周用异源血清型禽多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（血清３型）攻击。经组织灭活油乳免疫的鸡保护率达９３．３％，鸭保护率达１００％，而经肉汤培养的灭活苗对鸡和鸭均无保护作用，说明鸡胚培养的多杀性巴氏杆菌具有交叉保护作用。 相似文献
11.
表达Ⅰ群Ⅳ型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-2(knob)蛋白,以制备Fiber-2(knob)蛋白亚单位疫苗并对其免疫效力进行评价。将FAdV-4 Fiber-2的knob基因克隆至原核表达载体pET28a,构建重组质粒pET28a-Fiber-2(knob)。将重组质粒转化至大肠杆菌BL-21(DE3),以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,采用镍离子亲和层析柱纯化,SDS-PAGE检测纯化后的目的蛋白。将蛋白抗原与佐剂1∶3乳化,分组免疫100,50,25,0 mg/0.5 L FAdV Fiber-2(knob)蛋白亚单位疫苗,攻毒剂量为104.5 ELD50/只,免疫后24 d攻毒,比较不同免疫剂量攻毒保护效果。又制备4批蛋白含量为24 mg/0.5 L FAdV Fiber-2(knob)蛋白亚单位疫苗,比较不同批次间免疫效力差异。结果显示,成功构建pET28a-Fiber-2(knob)重组质粒,纯化后的蛋白纯度达到90%,质量浓度为3 269 mg/L。当攻毒剂量为104.5 ELD 相似文献
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重组鸡IL-2对禽流感灭活苗免疫增强作用试验 总被引：3，自引：0，他引：3
使用重组鸡白介素-2作为免疫佐剂,检测chIL-2对禽流感病毒H9亚型灭活疫苗的免疫增强作用。将1日龄的AA肉雏鸡,随机分为7组,每组10只,采用胸部肌肉注射方式进行免疫,对照组仅接种H9亚型禽流感灭活疫苗,试验组分别同时接种H9亚型禽流感灭活疫苗O．5mL和不同剂量（0．01mg-1mg）的鸡IL-2。每7d静脉采血,采用血凝和血凝抑制方法检测机体中抗体水平变化情况。结果表明,接种重组鸡IL-2的试验组动物能在2月内保持高抗体水平,且在免疫后第10周,其平均抗体水平仍高于疫苗对照组3．6个～4．5个滴度,表明了重组鸡IL-2蛋白对H9亚型禽流感灭活疫苗具有免疫增强作用。 相似文献
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Pose AG Gómez JN Sánchez AV Redondo AV Rodríguez ER Seguí RM Ramos EM Moltó MP Rodríguez ES Cordero LR Mallón AR Nordelo CB 《Veterinary microbiology》2011,152(3-4):328-337
World Health Organization has a great concern about the spreading of avian influenza virus H5N1. To counteract its massive spread, poultry vaccination is highly recommended together with biosecurity measures. In our study, a recombinant vaccine candidate based on the fusion of extracellular segments of hemagglutinin (HA) H5 of avian influenza virus and chicken CD154 (HACD) is tested with the aim of enhancing humoral and cellular immune responses in chickens. Protein expression was carried out by transducing several mammalian cell lines with recombinant adenoviral vectors. HACD purification was assessed by three distinct purification protocols: immunoaffinity chromatography by elution at acidic pH or with a chaotropic agent and size exclusion chromatography. Humoral and cellular immune responses were measured using the hemagglutination inhibition assay and the semiquantitative real time PCR, respectively. The results showed that humoral response against HACD was significantly higher than the obtained with HA alone after booster (P<0.01, P<0.05). From HACD molecules purified by distinct protocols, only the obtained by size exclusion chromatography generated hemagglutinationin-inhibition activity. IFN-γ levels indicated that cellular immune response was significantly higher with HACD, in its pure or impure form, compared to its counterpart HA (P<0.01). These data demonstrate that HACD is able to significantly enhance humoral and cellular immune responses against HA antigen, which make this fusion protein a promising subunit vaccine candidate against H5N1 virus outbreaks. 相似文献
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禽痘病毒感染对禽流感重组禽痘病毒疫苗免疫效力的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
表达禽流感病毒 (AIV)HA和NA基因的重组禽痘病毒rFPV_HA_NA能够诱导鸡体产生 10 0 %抵抗高致病性禽流感病毒 (HPAIV)H5N1的攻击。而当鸡群已进行禽痘疫苗免疫或者感染了禽痘病毒的情况下 ,此重组疫苗的免疫效力如何 ?首先用禽痘病毒S_FPV_0 17人工感染SPF试验鸡 ,既而在感染后的不同间隔时间接种重组疫苗 ,免疫后检测鸡群的HI抗体水平 ,同时用 10 0LD50 的HPAIVH5N1进行攻击。结果重组疫苗免疫与禽痘病毒人工感染时间间隔在 4周 (或以上 )时 ,预先感染禽痘病毒对重组疫苗的免疫效力不构成影响 ,对禽流感的保护力为 10 0 % ,而间隔时间在 1、2、3周时 ,重组疫苗的免疫保护效力则受到不同程度的影响。 相似文献
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Arunee THANASARASAKULPONG Pichayanut POOLPERM Pallop TANKAEW Takuo SAWADA Nattawooti STHITMATEE 《The Journal of veterinary medical science / the Japanese Society of Veterinary Science》2015,77(3):321-326
Recombinant outer membrane protein H (rOmpH) is a potential fowl cholera vaccine
candidate. The present study was aimed at developing rOmpH formulations for intranasal
administration. The rOmpH was purified and formulated with either Escherichia
coli enterotoxin B (LTB) or CpG oligodeoxynucleotides (ODN) as an adjuvant.
Antibody responses in chickens intranasally immunized with rOmpH in combination with 2
different adjuvants were significantly increased (P<0.05) post
immunization. Chicken survival rates showed that rOmpH formulated with ODN and LTB
elicited 90% and 70% protection, respectively. Our findings indicated that rOmpH
formulated with ODN elicited protection better than that formulated with LTB. Therefore,
the vaccines formulations in the present study can be considered new intranasal vaccine
formulations for fowl cholera in chickens. 相似文献
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设计不同的免疫程序,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡,通过对ND、IB、H9抗体滴度监测,探讨ND、IB、H9抗体消长规律及鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)的免疫程序。试验结果表明,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡后,其诱导产生的ND、IB、H9抗体的消长规律基本同步;仅于10日龄免疫一次三联灭活苗,其抗体水平较低,于20、40日龄二免、三免或10日龄先用鸡新城疫病毒(La Sota株)、禽流感病毒(H9亚型,SS/94株)二联灭活疫苗作基础免疫,20或40日龄再用三联灭活苗作加强免疫,则上述3种抗体均快速上升,且维持时间长。根据试验结果,建议按照正常免疫程序作基础免疫的健康肉鸡,饲养期较短的可于20日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.3 mL/只;饲养期较长的则于40日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.5 mL/只。 相似文献
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Pasteurella multocida inhibits the uptake and killing of Candida albicans and P. multocida by avian mononuclear phagocytic cells. The toxic outer membrane protein of P. multocida, which has been previously described, also inhibited the uptake and killing of C. albicans. Antibody specific for the toxic outer membrane protein reversed this effect resulting not only in an increase in uptake of C. albicans and P. multocida, but also in intracellular killing of P. multocida. This antibody, however, only partially restored killing of C. albicans. These data support the hypothesis that P. multocida is capable of intracellular survival in avian mononuclear phagocytic cells and that the toxic outer membrane protein is totally or partly responsible for this occurrence. 相似文献