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许泽永 《中国油料作物学报》1990,(4)
由国际半干旱热带地区作物研究所和中国农科院油料作物研究所共同举办的花生病毒检测和鉴定技术培训班于1990年10月15—26日在武昌开班,该培训班讲授花生病毒检测和鉴定技术,重点传授酶联免疫血清试验(ELISA)中应用青霉素酶系统、蛋白质A包被以及点免疫(DIBA)等八十年代先进植物病毒检测技术。国际半干旱热带作物所豆科病毒室主任、高级植物病毒专家D.V.R.Reddy博士亲临培训班讲授试验原理、传授试验技术。学习期 相似文献
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NCM-ELISA检测马铃薯Y病毒(PVY)技术的研究及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
血清学方法是病毒检测的主要手段。本试验通过对马铃薯Y病毒(PVY)的提纯,免疫家兔制备PVY抗血清,并提取PYV免疫球蛋白IgG作为NCM-ELISA反应为一抗,以市售羊抗兔抗血清为二抗,在硝酸纤维素膜(NCM)上进行NCM-ELISA反应检测PVY,建立PVY NCM-ELISA检测反应体系。试验结果显示,NCM-ELISA具有反应特异性强,灵敏度高的优点,检测植物叶片样品的最高稀释度可达到1:250。通过对田间40份样品的NCM-ELISA和DAS-ELISA检测比较,其检测结果吻合率达到100%。由于NCM-ELISA方法可以将样品点在硝酸纤维素膜上,并且可贮存几个星期或将膜送到其他实验室进行检测,因此具有操作简单,使用方便,检测成本低等优点。 相似文献
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<正>马铃薯病毒毒源是马铃薯病毒检测中抗血清制备及ELISA检测中必备的材料,也是马铃薯抗病育种和马铃薯病毒学研究所需的材料。我国1987年以来就开展了采用试管封闭保存毒源法的研究,结果表明利用烟草、洋酸浆、番茄等植物做为马铃薯不同病毒试管保毒植物,其试管小植株可单节切断繁殖,均可正常成长发育,移栽到土壤中小植株发育正常,并仍具有浸染力,此法一直沿用至今。 相似文献
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应用多聚酶链式反应法和酶联免疫吸附法对块茎中马铃薯Y病毒做比较测定H.Barker等植物受侵染组织中的病毒可以用多种方法来检测。除依赖于显微镜和侵染鉴定之外,还可以粗略地分为两个组:一组是根据病毒外壳蛋白质的检测;另一组则是根据病毒核酸的检测。前者包... 相似文献
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马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是危害马铃薯的重要病毒之一,在全球广为传播,并造成了严重经济损失。因此深入研究PVY及其与马铃薯的相互作用有助于控制病毒,减轻危害。根据初始寄主植物,PVY可分为以马铃薯为初始寄主的株系群体和以非马铃薯物种为初始寄主的株系群体。以马铃薯为初始寄主的株系群体,依据指示寄主植物(马铃薯品种,烟草)反应,进一步分为PVY^O、PVY^N、PVY^NTN及PVY^C等几种类型。依据血清学反应,PVY分成PVY^O/C血清型和PVY^N血清型。依据基因序列和基因组学,PVY分为PVY^O,PVY^N,PVY^C及一系列PVY^O/PVY^N重组型如PVY^NTN和PVY^N:O症状是寄主与病毒之间复杂的相互作用的结果。一些病毒蛋白和寄主蛋白的相互作用已被证实或逐渐认识到。证据显示HC-Pro起到转录后基因沉默抑制子的作用,从而提高病毒复制能力。马铃薯对PVY的抗性分为极端抗性和高敏抗性两类,多个极端抗性基因(即Ry基因)和过敏抗性基因(即Ny基因)被定位在第9,11和12号染色体上。PVY与植物的分子互作和抗PVY基因资源挖掘与利用将是今后几年的研究重点。 相似文献
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海南香蕉花叶病的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
鉴定结果表明,海南香蕉花叶病的病原病毒为黄瓜花叶病毒(CMV)。该病毒可通过莴苣指管蚜、玉米蚜和豆蚜传播。首次发现假败酱、白落葵、鸡蛋果三种植物是人工接种的新寄主。该病毒可制备抗血清,效价达1:128。抗血清与提纯病毒进行琼脂双扩散反应,出现肉眼可见的特异沉淀带。制备的抗血清可用于检测香蕉种苗及繁殖材料的带毒情况。 相似文献
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1996年7月,从湖南长沙市郊赤豆病株上得到一病毒分离物RB1。人工摩擦接种9科27种植物,RB1能侵染7科25种,在赤豆上引起花叶症状。提纯病毒粒体为球形,直径28nm。在琼脂双扩散试验中,RB1与CMV抗血清具有密切的血清学关系。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其衣壳蛋白亚基分子量为28kDa,分析植物组织中dsRNA,发现有4条dsRNA条带,长分别为33,30,22和09kb。根据以上结果,RB1被鉴定为黄瓜花叶病毒(CMV)。 相似文献
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对兰科3个属的25个热带兰杂交亲代和22个子代种子瓶苗和移栽筐苗进行病毒传播相关性的抗血清学检测(酶联免疫吸附技术),结果表明,参测的兰花子代种子瓶苗和筐苗均不传毒,兰花病菌应在后天传染发生的。 相似文献
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《中国马铃薯》2015,(4):222-227
马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)和马铃薯A病毒(PVA)是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒,因此,建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对保障马铃薯种薯质量具有非常重要的意义。试验筛选了6种病毒的特异引物、优化了PCR部分的试剂以及确定了退火温度。结果表明,当Mg2+浓度为2.6 mmol/L、d NTPs浓度为0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.03 U/μL,以及退火温度为55.5℃时反应体系最稳定。最终,建立了一套通用RT-PCR检测体系,只需要变换每种病毒的引物,就可以实现对PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA病毒的RT-PCR检测。每种病毒检测灵敏度均能达到pg以上。 相似文献
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烟草花叶病毒(TMV)和马铃薯X病毒(PVX)的提纯及抗血清的制备 总被引:6,自引:1,他引:5
在温室内将提纯的TMV和PVX病毒,通过摩擦接种在普通烟(Nicotiana tabacumL.)上做为繁毒植物。通过PEG沉淀和差速离心,获得提纯病毒。病毒含量分别为21.42mg/100g鲜重和24.50mg/100g鲜重。在紫外分光灯下测定OD值,分别在248nm(TMV)和246nm(PVX)为最低,260nm为最高。消光系数OD260/280分别为1.20和1.22。提纯抗原进行回接试验,指示植物产生明显症状,用Freund佐剂分三次肌肉免疫家兔,所得抗血清效价为1:2048,然后利用(NH_4)_2SO_4提取球蛋白,并利用HRP进行酶标记,制备出的抗血清现已应用于生产。 相似文献
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本研究首次制备了花生丛枝病(PWB)植原体的专化性鼠腹水抗体,效价为1:1280,比较了5种间接ELISA方法检测植原体的效果,并对6种植原体病原提纯物进行了血清学研究。结果表明,鼠腹水抗体除与PWB有血清学反应外,还与豇豆从枝病原(CoWB)具有一定的血清学关系,而与TWB、ChWB、SWB和BWB无血清关系。 相似文献