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1.
适于AFLP分析的核桃幼叶DNA提取方法 总被引：19，自引：0，他引：19
以核桃幼叶为材料,采用改良CTAB法对核桃DNA提取进行了研究。经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测,在CTAB提取液中添加3%PVP40、50mmol/Lβ-巯基乙醇和10mmol/LNa2S2O5,能得到高纯度的总DNA,OD260/OD280在1 8～2 0之间,蛋白、多糖、RNA等去除较彻底,适于AFLP分析。 相似文献
2.
适于AFLP分析的柿树DNA提取方法研究 总被引：3，自引：0，他引：3
对柿基因组DNA的提取方法进行了研究,结果表明,采用提取液中含100mmol/LTris-HCl(pH8 0),20mmol/LEDTA,1 4mol/LNaCl,2%CTAB,1%PVP-40,10mmol/LNa2S2O5及100mmol/Lβ—巯基乙醇(用前加入)的改良CTAB法,可有效去除单宁、酚类、色素等,提取的柿叶片DNA质量和纯度较高,可用于AFLP分析。 相似文献
3.
[目的]研究适于AFLP分析用的桃韧皮部DNA提取方法,为冬季无法获得幼叶和其他幼嫩材料时从事桃基因组研究打下了基础。[方法]以8种野生桃冬季1年生休眠枝的韧皮部为试验材料,采用改进的CTAB法提取基因组总DNA,与其相应幼叶DNA的提取效果进行了比较分析,并进行了AFLP验证分析。[结果]从野生桃韧皮部提取的DNA除产量低于幼叶外,DNA纯度和完整性都较好,OD260/OD280均为1.8~2.0,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化,其AFLP分析条带清晰,多态性好。[结论]该法提取的野生桃韧皮部基因组总DNA完全适于AFLP分析。 相似文献
4.
蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量DNA,采用改良CTAB法,以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素进行了试验。结果表明,用改良的CTAB法提取的蚕豆DNA质量较好,纯度高,OD260/OD280平均值为1.915,变幅在1.81~2.08之间,绝大多数集中在1.9左右。β-巯基乙醇和PVP对蚕豆DNA纯化具有替代作用,其中在CTAB提取液中加入1%β-巯基乙醇和0.5%的PVP或直接加入1%PVP后,提取的DNA纯度较高,OD260/OD280平均值分别为1.868、1.865,而且电泳谱带最清晰,最适于AFLP技术的要求。 相似文献
5.
改进DNA提取方法,利用含2%CTAB、1%SDS、2%PVP、100mmol/LTris-Cl(pH8.0)、20mmol/LEDTA(pH8.0)和1.4mol/LNaCl的DNA提取缓冲液,提取了不同种属12种植物的DNA,并对其进行了PCR检测.结果显示,所提取的DNA符合PCR试验要求,用真核生物ITS4/ITS5通用引物均能扩增出清晰的条带.该方法无需酚仿抽提,简单、高效、环保,特别适合大规模植物DNA的提取. 相似文献
6.
β-巯基乙醇和PVP对蚕豆DNA质量的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量的DNA,采用CTAB法提取蚕豆DNA,以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素,研究了β-巯基乙醇和PVP时蚕豆DNA质量的影响.结果表明,用CTAB法提取蚕豆DNA的质量较好、纯度高,λ=260nm/280nm的平均OD值为1.915,变幅在1.81～2.08之间,绝大多数集中在1.9左右,同时,两种抗氧化剂去除蚕豆DNA中酚类物质、防止褐变具有替代作用,但不会影响DNA扩增结果.其中,在CTAB提取液中添加1%的β-巯基乙醇和0.5%的PVP或直接加入1%PVP的纯度较高,k=260nm/280nm的平均OD值分别为1.868、1.865,电泳谱带最清晰,无明显拖尾现象,DNA的质量和纯度满足于AFLP技术的要求. 相似文献
7.
改进DNA提取方法，利用含2%CTAB、1%SDS、2% PVP、100 mmol/L Tris-Cl (pH8.0)、20 mmol/L EDTA (pH8.0)和1.4 mol/L NaCl的DNA提取缓冲液，提取了不同种属12种植物的DNA，并对其进行了PCR检测．结果显示，所提取的DNA符合PCR试验要求，用真核生物ITS4/ITS5通用引物均能扩增出清晰的条带．该方法无需酚仿抽提，简单、高效、环保，特别适合大规模植物DNA的提取． 相似文献
8.
[目的]探索基于AFLP的拮抗链霉菌DNA模板制备方法及其扩增体系,为AFLP技术在链霉菌乃至放线菌资源分析中的应用提供依据。[方法]以改进的CTAB法提取DNA,利用Pst I／Mse I型AFLP试剂盒及其反应体系进行扩增,采用5％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析扩增结果。[结果]提取了10个拮抗链霉菌菌株的基因组DNA,0.8％琼脂糖凝胶电泳检测显示其主带清晰,片段大小为37.64-40.86Kb,无降解现象,亦无RNA残留;其OD260/OD280为1.625-1.833;Pst I／Mse I双酶切产物琼脂糖电泳呈弥散荧光长带,说明酶解充分;筛选出的3对引物对DNA模板的扩增谱带清晰,多态性丰富。[结论]该研究建立的DNA模板制备方法及其扩增反应体系可用于链霉菌的AFLP分析。 相似文献
9.
一种快速高效适于橡胶树叶片AFLP分析的DNA提取方法 总被引：1，自引：0，他引：1
以近200个巴西橡胶树种质材料（品种及无性系）幼嫩叶片为材料．采用改良的cTAB法对其基因组总DNA的提取进行了研究。结果表明,该方法提取的DNA溶液无色透明,DD260／DD280的比值均为1．8～2．0,1％琼脂糖凝胶电泳为清晰的一条带,无降解现象,KNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其AFLP分析（引物EcoRI-TA／MseI—CTT）条带清晰,多态性好,说明此方法提取的巴西橡胶树幼嫩叶片基因组总DNA较适于AFLP分析。 相似文献
10.
梅花基因组AFLP银染反应体系的建立和优化 总被引：13，自引：7，他引：13
采用改进的SDS DNA提取方法从梅花的嫩叶和老叶中提取获得总DNA .所得DNA样品的OD2 6 0 OD2 80 值在1 7～ 1 9之间 ,琼脂糖凝胶上主带清晰、较少降解、样品纯度高、蛋白去除干净且得率高 .该体系对原提取程序作了多处简化 ,使操作简便、快捷、高效 ,适合于梅花DNA提取 ,所提取的DNA样品不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂 ,可被限制性内切酶MseⅠ和EcoRⅠ完全酶切 ,适合AFLP PCR反应应用 ,得到清晰的指纹式样 . 相似文献