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相似文献
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1.
胡萝卜遗传转化体系的建立   总被引:1,自引:1,他引:1  
以新黑田五寸胡萝卜下胚轴为外植体,研究对胡萝卜抗性植株的影响因素及目的基因的整合情况,建立了较为完善的转化体系。实验结果表明:以胡萝卜下胚轴为材料,用苗龄7d,共培养2d,浸染15min的体系,Kan抗性芽的分化频率可达52%。获得抗性愈伤培养基:B5+0.1mg/L2,4-D+0.2mg/LKT+75mg/LKan+500mg/LCef,抗性芽诱导培养基:B5+100mg/LKan+500mg/LCef;抗性植株生根培养基:B5+0.1mg/LIBA+75mg/LKan+300mg/L:Cef;对转基因植株进行了PCR分子学检测,初步证明外源基因已整合到胡萝卜基因组中。  相似文献   

2.
以全叶苦苣菜种子和植株为材料,进行外植体的灭菌、植株再生体系建立研究。结果表明,全叶苦苣菜的种子和茎段经过灭菌,接种到1/2MS培养基上可获得无菌苗。用于愈伤组织诱导最佳的材料为无菌苗下胚轴,最佳培养基为MS+0.5 mg/L BA+1.5 mg/L 2,4-D,愈伤组织分化最佳培养基为MS+ZT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L,分化出的不定芽在培养基1/2MS+IAA0.2 mg/L上生根效果较好,可以获得健壮再生植株。试管苗移栽到温室,成活率可达到95%以上。移栽后植株的植物学性状和野生植株基本一致。  相似文献   

3.
以嫩叶和茎段为外植体对龙翅海棠进行离体培养与植株再生研究,结果表明:嫩叶和茎段的最适芽诱导分化培养基为MS KT 0.5 mg/L IAA 0.2~1.0 mg/L,接种培养30~40 d;最适继代增殖培养基为MS KT 0.5 mg/L IAA 0.2 mg/L,培养时间为25 d;壮苗生根培养基为1/2 Ms NAA 0.2 mg/L IBA 0.2 mg/L 2%蔗糖 琼脂3 g/L,培养时间为15~20 d.  相似文献   

4.
本研究以膜荚黄芪的子叶、下胚轴、幼茎、幼叶为外植体,诱导愈伤组织及再生芽,建立膜荚黄芪组织培养再生体系。结果表明,子叶是最佳的外植体。在6-BA与2,4-D或NAA培养基组合中,以MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织及芽诱导培养基。黄芪再生植株较难生根,在IAA、IBA和NAA激素培养基组合中,以1/2MS+IBA 2.0mg/L或1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率50%左右。  相似文献   

5.
[目的]利用生物技术手段提高盖杨抗寒性并扩大其栽培区域。[方法]以盖杨叶片为外植体,研究不同激素组合对盖杨叶片分化及生根的影响,建立盖杨叶片高频植株再生体系。[结果]盖杨不定芽分化最适培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.20 mg/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.0 g/L,p H 6.5,不定芽再生频率为96.67%,平均分化芽数20.3个;最适生根培养基配方为1/2MS+IBA0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.0 g/L,p H 6.0,生根率可达100%,平均生根数15.8条。[结论]该研究建立了盖杨高效组织培养再生系统,为该杨树品种的快速无性繁殖和基因的遗传转化提供了依据。  相似文献   

6.
以地被菊花2个品种‘铺地金’和‘北林红’的叶片为外植体,以MS为基本培养基,以不同浓度配比的6-BA,NAA为生长调节物质进行离体培养,直接分化出不定芽获得再生植株.试验表明:‘铺地金’叶片外植体再生的最适培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 1.0 mg/L,再生率高达96%,其叶柄在此培养基上的再生率为90%;‘北林红’再生的最适宜培养基为MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L,再生率为96%,但其茎段和叶柄在此培养基上不能高效再生.‘铺地金’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.01 mg/L,每腋芽外植体平均增殖不定芽数达到5.5个.‘北林红’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05mg/L和MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.01mg/L,腋芽外植体平均增殖不定芽数达到6.3个和5.6个,二者之间的差异不显著.  相似文献   

7.
番茄子叶、下胚轴植株再生体系的建立   总被引:4,自引:0,他引:4  
本研究以番茄(Lycopersicon esculentumM ill.)栽培品种“中杂9号”、“毛粉802”和“合作908”为试材,通过对番茄子叶、下胚轴的离体培养,研究不同基因型以及不同激素配比对植株再生的影响。结果表明:以下胚轴为外植体时3种材料均可诱导再生植株,其中中杂9号和毛粉802最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908最适宜诱导愈伤组织和芽分化的培养基为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.4 mg/L。以子叶为外植体时毛粉802和合作908均可诱导出再生植株,其中毛粉802诱导愈伤组织及芽分化的最适宜培养基为MS 6-BA1.0mg/L IAA0.2mg/L和MS 6-BA1.0mg/L IAA0.5mg/L,合作908诱导愈伤组织及芽分化的培养基为MS 6-BA0.5mg/L IBA0.5mg/L。两种外植体适宜的生根培养基均为MS IAA0.5 mg/L。  相似文献   

8.
为了获得银白杨离体再生体系的优化方案,通过对离体再生体系中银白杨无菌苗的获得、生芽培养基激素组合及诱导出芽、生根培养基激素组合及诱导生根进行了一系列优化试验。结果显示:影响银白杨植株再生的最主要因素是激素浓度和类型,其次是培养基种类和外植体类型;最利于银白杨再生植株的培养基条件为:芽增殖培养基以MS 6-BA1.0mg/L NAA0.3mg/L IBA0.6mg/L为宜,生根培养基以1/2MS NAA0.05mg/L IBA0.2mg/L为宜。  相似文献   

9.
以茎段为外植体,建立了报春石斛Dendrobium primulinum的离体培养再生体系。结果表明:愈合组织诱导以培养基MS(Murashige and Skoog) + 5.0 mg·L-1 6-苄氨基嘌呤(6-BA) + 1.5 mg·L-12,4-D为最优,诱导率达33.33%;分化和增殖培养基均以MS + 1.0 mg·L-16-BA + 0.1 mg·L-1萘乙酸(NAA) +体积分数10%椰子水为佳,分化率最高可达83.20%,增殖倍数达3.82,外源物质椰子水可促进不定芽的形成及增殖。形成的无根苗转移到1/2MS + 0.5 mg·L-16-BA + 1.0 mg·L-1 NAA + 0.5 g·L-1活性炭培养基上诱导生根发育形成完整植株。图1表4参12  相似文献   

10.
对丽格海棠幼嫩叶片和叶柄离体培养与植株再生过程进行了研究,建立了丽格海棠的再生体系.该体系是以1 cm2左右带叶脉的幼嫩叶切片为外植体;丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L或MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+4%芦荟原汁,接种培养30~40 d;丛生芽继代培养基为MS+6-BA 0.05 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养时间20 d;生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L,培养时间30 d.该体系的建立对丽格海棠种苗快速繁殖和规模化生产将有着重要的指导意义.  相似文献   

11.
徐春波  王勇  赵海霞  米福贵 《安徽农业科学》2012,(12):7161-7163,7170
[目的]建立苜蓿植株再生体系和农杆菌遗传转化体系。[方法]以"猎人河"苜蓿品种为受体材料,对影响苜蓿植株再生和遗传转化的相关因素进行了研究。[结果]最佳愈伤诱导培养基为改良SH+4.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA,最佳继代培养基为MSO+0.5mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L AgNO3,而最佳分化培养基为MS,苜蓿植株再生的最佳外植体是下胚轴。苜蓿农杆菌遗传转化的选择压确定为60 mg/L卡那霉素(Kan),最适宜的抗菌素为350 mg/L羧苄青霉素(Carb),农杆菌菌液的最适OD600为0.6,最佳侵染时间为10 min。[结论]该研究为今后苜蓿的基因工程研究奠定了基础。  相似文献   

12.
研究了外植体种类、植物激素以及水解酪蛋白(casein hydrolysate,CH)浓度等因素对紫云英体细胞胚诱导及植株再生的影响,建立了紫云英体细胞胚的再生体系。结果表明:子叶柄在MS+4 mg/L 2,4-D+1 000 mg/L CH的培养基上,体细胞胚诱导率最高,达到58.3%;体细胞胚分化和植株再生培养基为1/2MS+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L 6-BA+1 g/L CH,再生率达到60.0%。研究结果为紫云英品种的选育及改良提供了新思路。  相似文献   

13.
[目的]建立苜蓿植株再生体系和农杆菌遗传转化体系.[方法]以“猎人河”苜蓿品种为受体材料,对影响苜蓿植株再生和遗传转化的相关因素进行了研究.[结果]最佳愈伤诱导培养基为改良SH +4.0 mg/L 2,4-D +0.5 mg/L 6-BA,最佳继代培养基为MSO+0.5mg/L NAA+ 1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L AgNO3,而最佳分化培养基为MS,苜蓿植株再生的最佳外植体是下胚轴.苜蓿农杆菌遗传转化的选择压确定为60 mg/L卡那霉素(Kan),最适宜的抗菌素为350 mg/L羧苄青霉素(Carb),农杆菌菌液的最适OD600为0.6,最佳侵染时间为10 min.[结论]该研究为今后苜蓿的基因工程研究奠定了基础.  相似文献   

14.
【目的】为唐菖蒲的遗传转化研究建立高效快速的再生体系。【方法】以4~6叶期唐菖蒲花序的不同部位(花茎、花柄、花托、雌蕊、雄蕊、花瓣)为外植体,以附加不同质量浓度6-BA和NAA的MS为诱导、增殖和继代培养基,探讨唐菖蒲愈伤组织的诱导及植株再生情况。【结果】所用外植体中,雌雄蕊分化效果不明显,花瓣基本无分化,而花茎、花柄、花托的切块接种在MS+1 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA培养基上,可直接诱导愈伤组织和丛生芽的生成。丛生芽继代增殖在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA培养基上,增殖效果最好;生根培养时以MS+0.1mg/L NAA的培养效果最佳。【结论】用幼嫩花茎作外植体可高效地建立起唐菖蒲的再生体系。  相似文献   

15.
采用正交试验设计,研究不同培养基和不同激素质量浓度配比对大青杨无菌苗叶片植株再生体系的影响,优化大青杨植株再生体系。结果表明:对大青杨不定芽诱导的影响最大为激素NAA,其次是培养基类型,最后是激素6-BA;不定芽增殖的影响最大是NAA,其次是培养基类型,最后是6-BA;对丛生苗生根的影响最大是激素类型,然后是培养基类型;培养基类型和激素的质量浓度对大青杨再生体系有着较明显的影响。最适宜大青杨分化的培养基为:WPM+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,诱导率达100%;最适宜大青杨丛生芽增殖的培养基为:MS+0.05 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA,芽健壮;最适宜大青杨生根的培养基为:1/2MS+0.1 mg/L IBA,经过14 d生根,生根率达100%。  相似文献   

16.
[目的] 建立高效稳定的甘菊再生体系,并确定卡那霉素和草丁膦的筛选压。[方法] 以甘菊无菌苗叶片为外植体,通过添加不同浓度的NAA和6-BA建立了甘菊遗传转化再生体系。[结果] 在5种芽诱导培养基中,MS3(MS+NAA 0.1mg/L+6-BA0.1mg/L)的再生频率最高,可达98%,其不定芽生根率可达100%。培养35d后,添加5和10mg/L卡那霉素的培养基上甘菊再生率为11.3%和10%,添加15和20mg/L卡那霉素的培养基上没有芽的分化;添加0.5mg/L草丁膦的培养基上甘菊再生率为8.7%,添加1mg/L草丁膦的培养基上没有芽的再生,添加1.5和2.0mg/L草丁膦的培养基上没有芽的分化。卡那霉素和草丁膦在甘菊遗传转化中的筛选浓度分别为8.0和0.8 mg/L。[结论] 该研究为进行甘菊转基因试验打下了基础。  相似文献   

17.
以白鹤芋花序为外植体,研究影响白鹤芋花序体细胞胚胎诱导、增殖、萌发和植株再生转化的主要因子。结果表明,体细胞胚胎直接诱导的最适培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L NAA,体细胞胚胎增殖最适培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L ZT+0.2 mg/L NAA,体细胞胚胎萌发最适培养基为MS+0.1 mg/L IBA+0.4 mg/L GA_3+30 g/L蔗糖,植株再生转化最佳激素配方为0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L GA_3。  相似文献   

18.
南瓜离体培养及植株再生的研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
研究了不同外植体、消毒方法、激素水平等对南瓜离体培养及植株再生的影响。结果表明:以子叶作为外植体可以通过愈伤组织途径之后形成再生植株;而以子叶节作为外植体可以直接诱导不定芽形成再生植株。诱导不定芽的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA;诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D;诱导南瓜不定根的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LIAA。  相似文献   

19.
以临优145的幼胚为外植体诱导植株再生,并进行农杆菌转化研究.以冬小麦品种临优145的幼胚为外植体,消毒后用解剖刀挑取幼胚,盾片朝上接种于MS+2,4-D 2 mg/L+肌醇100 mg/L+MES 400 mg/L+CH 100 mg/L+40 g/L麦芽糖+8 g/L琼脂的培养基中诱导愈伤组织,每2周继代一次,将诱导出的淡黄色、颗粒状Ⅱ型胚性愈伤组织接种于分化培养基(MS+ZT 1 mg/L+IAA 1mg/L+MES 400 mg/L+CH 100 mg/L+麦芽糖40 g/L+gelrite 2.6 g/L,pH 5.8)上培养2-3周,然后转接到再生培养基(1/10 MS+NAA 0.5mg/L+KT0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+gelrite 2.6 g/L,pH 5.8)中进行再生成苗.接种1229块幼胚,得到987块愈伤组织,Hyg抗性愈伤组织123块,抗性再生植株34株.在建立了再生体系的基础上,用根癌农杆菌介导法将GUS基因导入幼胚愈伤组织,抗性植株的PCR检测呈阳性.X-gluc染色表明,少部分愈伤组织出现肉眼可见的蓝色晕斑,说明GUS基因已经在小麦幼胚愈伤组织中表达.  相似文献   

20.
以当归种子为材料,研究激素组合、培养基对当归愈伤组织的诱导及植株再生的影响。结果表明:适宜当归愈伤组织的诱导培养基为H+0.5 mg/L 2,4-D,出愈率达到97.92%。继代增殖最佳培养基为H+0.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L IAA。诱导丛生芽的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L ZT,最高诱导率为90.3%。适合无根苗生根的培养基为1/2MS+0.5 mg/L IAA,生根率达35.5%。  相似文献   

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