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鸡精原干细胞的体外培养 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验旨在探索不同基础培养基对鸡精原干细胞（spermatogonial stem cells,SSCs）体外培养的影响,以期选出最佳的培养体系,并用其进行传代培养,以观察精原干细胞继代培养的特性。结果表明：在高糖DMEM培养体系和TCM199培养体系中,SSCs均能正常生长和增殖,在以DMEM和TC199为基础培养基的培养体系中,在SSCs的活率、克隆形成率上显著不差异,但SSCs在以DMEM为基础培养基的培养体系中生长情况较好,为最佳培养体系。在RPMI1640培养体系中,SSCs克隆形成率、活率较低,比前2种培养体系的效果差异显著。在添加细胞因子的培养基中精原干细胞在体外传至第3代。 相似文献
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采用不同型血清分别添加到TCM199和mTCM199培养液、RPMI1640和mRPMI1640培养液中，对兔原核期受精卵进行了体外序贯培养，并对各组间不同时期发育率进行了分析比较。结果显示：体外培养至第72h时，3个体外序贯培养体系间8-细胞胚率、桑椹胚率差异不显著（P〉0．05），当体外培养至囊胚时，100mL／L NBS＋TCM199（mTCM199）培养体系、100mL／L NBS＋RPMI1640（mRPMI1640）培养体系的囊胚率均显著低于100mL／L FBS＋RPMI1640（mRPMI1640）培养体系的囊胚率（三组的囊胚率依次是27．3％、35．9%、97．2%，P〈0．01）。但前两组之间差异不显著。结果表明，不同型血清对兔早期胚胎体外正常发育具有很大影响，序贯培养中添加国产NBS的培养液的培养效果明显低于添加进口FBS的培养液的培养效果。 相似文献
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采用30d胚龄左右的牦牛胚胎，用2种不同的消化液消化后，将所得的牦牛胎儿成纤维细胞（yakembryonicfibroblasts，YEF）培养于不同血清含量的RPM11640培养液中，并接种于2种不同材质的培养瓶表面，对YEF的分离方法、培养所需胎牛血清（FBS）添加量和不同基质表面对YEF生长的影响进行了研究。结果表明，含150mL／LFBS的RPMI1640培养基最适合YEF生长，可传代27次以上；经用RPMI1640和D-Hank’S液配制的2．5g／L胰蛋白酶消化，所得的YEF的细胞活率差异不显著（P〉0．05），其原代细胞在含100mL／L胎牛血清的RPMI1640培养液中的贴壁率差异极显著（P〈0．01）；不同生长基质对YEF的形态没有显著影响。 相似文献
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鸡胚精原干细胞体外保存能力的研究 总被引：4，自引：1，他引：4
采用二酶3步法获取孵化第19 d的鸡胚精原干细胞（SSCs）,比较在快速冷冻条件下3种冷冻保护剂（DMSO、乙二醇、甘油）在3个浓度5%、10%、15%条件下对鸡胚精原干细胞的冷冻保存效果进行研究。结果显示：（1）当DMSO的浓度为5%、10%及15%时,复苏后细胞存活率分别为73.1%、88.6%和74.8%,三者差异显著（P〈0.05）;而10%DMSO保存精原干细胞的存活率、复苏后培养细胞生长和集落形成均显著高于其它2个浓度;当乙二醇浓度为5%、10%和15%时,复苏后细胞存活率分别为69.4%、83.1%和65.2%,三者差异显著（P〈0.05）;复苏后无论饲养层存在与否,SSCs均能增殖,但未有AKP阳性集落生成;当甘油浓度为5%、10%、15%时,复苏后细胞存活率均小于15%,三者差异不显著（P〉0.05）;复苏后细胞存活时间极短,仅存活12 h左右;（2）当在10%DMSO浓度条件,复苏后SSCs在有饲养细胞层的条件下,培养5 d形成集落,表明10%DMSO是鸡胚精原干细胞适宜的冷冻保护剂。 相似文献
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将小鼠囊胚在饲养层、无类LIF因子的培养基中培养出类ES细胞团,将该类ES细胞团传至第三代,暂停传代,继续培养,则4～5 d后该细胞团会向周围分化出一种圆而发亮的衍生细胞,该衍生细胞会不断地向周围生长,约20 d后该衍生细胞铺满培养皿底.将该衍生细胞传至铺有饲养层的培养瓶中继续传代至第七代,再将其传代至无饲养层的培养瓶中,约12 d后,其在无饲养层的培养瓶中长满瓶底.以后随着传代数的增加,该细胞长满瓶底所需时间越来越短,最后稳定在2～3 d.对传代至第30代的细胞进行生长曲线测定,并以不同的基础培养基、不同的血清浓度、不同的胰岛素浓度等条件培养该细胞,结果发现：该衍生细胞分别在DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM-F12、PRMI1640等为基础的培养基中都能生长,但以DMEM-F12为最优.在血清浓度分别为10%、14%、18%的DMEM高糖培养基中培养显示：该细胞在高浓度血清的培养基中具有生长更好的趋势.在胰岛素浓度分别为0、0.25、0.5、1 μg/ml的DMEM高糖培养基中培养显示：该细胞在无胰岛素的培养基中无法正常生长,在0.5 μg/ml胰岛素浓度的培养基中生长最佳. 相似文献
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山羊胚胎体外培养条件的优化 总被引：1，自引：1，他引：0
为优化山羊胚胎体外培养条件,本试验比较了含有3种不同来源血清（优质胎牛血清、发情山羊血清、前列腺素（PG）处理后发情山羊血清）的M199对卵母细胞成熟效果的影响,成熟率分别为65.95%、49.2%、76.47%,差异极显著（P＜0.01）;本试验还分别采用了SOFaa、CR1aa+输卵管上皮细胞共培养,以及改进的DMEM/F12发育体系培养受精卵,结果发现,SOFaa、CR1aa+输卵管上皮细胞的发育培养系统得到的囊胚率为29.62%、24.73%,差异不显著(P＞0.05),改进的DMEM/F12发育液囊胚率最高为48.42%,差异极显著（P＜0.01）。 相似文献
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卵裂球培养是进行胚胎克隆的一种简便而实用的方法。它主要包括多个卵裂球培养或单个卵裂球培养，虽然不同的方法有各自的优缺点，但以单个卵裂球的无透明带培养最具实用价值。目前存在的根本问题是培养的卵裂球发育成功率不高，克隆胚胎的再克隆也有待进一步研究。 相似文献
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研究不同培养体系对胎牛成纤维细胞体外培养的影响及用牛血清白蛋白代替血清培养胎牛成纤维细胞的可行性。利用M199、DMEM、α-MEM、DMEM/F124种培养体系通过组织块贴壁培养对成纤维细胞体外培养液进行筛选,以α-MEM组细胞生长状况较好。分别用含2、4、6、8、10mg/mL BSA的α-MEM培养液对胎牛成纤维细胞进行原代及传代培养,5种浓度的BSA对原代培养时细胞开始游离出组织块的时间影响不明显,均在培养后的48h有成纤维细胞和上皮细胞混合游离出,但在传代培养时,胎牛成纤维细胞在8mg/mL BSA浓度的α-MEM中贴壁率较高。结果表明:培养胎牛成纤维细胞时,可用BSA代替血清,较适宜的培养体系为含8mg/mL BSA的α-MEM培养液。 相似文献
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酵母培养物在水产动物中的应用研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
酵母培养物是指在特定工艺条件控制下由酵母菌在特定的培养基上经过充分的厌氧发酵后形成的微生态制品,它主要由酵母细胞外代谢产物、经过发酵后变异的培养基和少量已无活性的酵母细胞所构成。代谢产物是对细胞外各类代谢物的总称,这其中有些物质是为人们所熟悉的,如肽、有机酸、寡糖、氨基酸、增味物质和芳香物质等，还有许多为人们所不熟悉的但实践证明对促进畜禽生长有益的“未知生长因子”等物质。长达几十年的科学研究和生产应用实践证明，酵母培养物中所含有的细胞外代谢产物可明显提高水产动物的生产力水平、优化饲料的营养价值、改善动物的健康状态。 相似文献
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基于探讨适合桑黄酮类化合物合成的优化培养条件,以桑品种陕桑305为材料,研究了培养基成分及其添加量对桑树试管苗黄酮类化合物含量的影响。结果表明:当培养基中果糖的质量浓度为30g/L,氮元素浓度为60.02mmol/L,氨态氮与硝态氮物质的量比为0.3165,MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O的质量浓度分别为11.15、4.3mg/L,激素质量浓度为0.1mg/LNAA(α-萘乙酸)、0.5mg/L6-BA(6-苄氨基嘌呤)、0.5mg/LKT(激动素)时,有利于桑树试管苗叶片中黄酮类化合物的合成;Mn2+和Zn2+浓度能影响苯丙氨酸解氨酶活性,当培养基中的MnSO4·4H2O和ZnSO4·7H2O分别为11.15、4.3mg/L时,酶活性最高。 相似文献
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动物胚胎体外培养研究进展 总被引：6，自引：0，他引：6
近年来动物胚胎体外培养取得了新进展.致密化前期胚胎利用葡萄糖作为能量底物的能力有限,但致密化后胚胎培养中葡萄糖的添加是必须的.自由氨基酸在早期胚胎的发育中是必需的,非必须氨基酸在致密化前发挥作用,致密化后期胚胎则需要所有氨基酸.血清对早期胚胎的发育有多重影响,BSA等一些生物大分子物质的配合添加可以取代血清的胚胎营养作用,并消除血清的负作用.在无血清培养液中,一些生长因子和细胞因子的加入是必须的.GSH等抗氧化物质添加进培养液可以对抗反应氧的作用,对胚胎发育起到保护作用. 相似文献